Оксандролон или станозолол: — Новости ММА

Содержание

Welcome

Мои мысли Welcome
Мои мысли о море

Все больше и больше я думаю о море. Не хочу сказать, что никогда там не был, просто эта тишина и спокойствие не покидают меня ни на минуту.

Мои друзья часто отдыхают на море — не видя всей прелести и не слушая его. Для них это просто развлечение и отдых. Я вижу это иначе.

Умиротворение и мысли о величии океана. Здесь я могу отказаться от повседневной суеты и полностью погрузиться в свои мысли и отдых.

Вы, наверное, смотрели фильм «Достучаться до небес»? Именно об этом я и говорю. Сценарист похож на меня, и его вдохновение возникло из ниоткуда не зря.

Томас Ян и Тиль Швайгер — талантливые люди, они понимают и верят в то, что сделали при создании этого замечательного фильма.

Посмотрите, и вы измените свое отношение к морю, океану, и вы поймете мои мысли, которые я продолжу освещать здесь чуть позже.

Продолжение следует. ..

My thoughts on the sea

More and more I think about the sea. I do not want to say that I have never been there, just this silence and calmness does not leave me for a moment.

My friends often rest on the sea — not seeing all the charm and do not listen to it. For them, it’s just fun and relaxation. I see it deeper.

Peace, tranquility and thoughts of the greatness of the ocean. Here I can renounce the bustle of everyday life and completely immerse myself in my thoughts and rest.

You’ve probably watched the movie Knocking on Heaven? This is exactly what I am talking about. The writer is like me and his inspiration came out of nowhere for a reason.

Thomas Jan and Til Schweiger are talented people, they understand and believe in what they did in making this wonderful film.

Try and you change your attitude to the sea, the ocean and you will understand my thoughts, which I will continue to highlight here a little later.

To be continued…

— Новости ММА

Обращение к читателю.
Для начала я хочу сообщить, что целью данного блога является научное изучение методов биохимических манипуляций с атлетами различных боевых видов спорта и не является руководством к действию или пропагандой использования анаболических стероидов и других гормональных и не гормональных препаратов, аптечной продукции, биологически активных добавок, спортивного питания и т.д.

Этот блог может значительно пошатнуть вашу психику и вывернуть наизнанку представление о спорте в наше время. Я уверен, многие читатели знают о поголовном использовании различных препаратов и добавок спортсменами – этот блог создан для вас.
Вы в теме, а все остальные в ней обязательно окажутся. Да прибудет с вами Сила.


Почему препараты, которые выявляют в крови спортсменов так часто повторяются? Почему тренерский состав и врачи которые готовят бойцов заостряют свое внимание только на некоторых представителях фармакологических групп? Существуют многие другие стероидные препараты, которые ни разу не были выявлены на допинг пробах в UFC, Bellator и т. д. Давайте для начала разберем один из них.

Оксандролон – анаболик, является измененной формой дигидротестостерона. Имеет несколько отличий:
1) добавлена метильная группа в позиции 17-альфа, для защиты препарата при пероральном приеме. 
2) заменен углерод во второй позиции на кислород (17б-гидрокси-17а-метил-2-окса-5а-андростан-3-он) формула C19h40O3. Оксандролон является единственным коммерческим стероидом с таким изменением в структуре, оно влияет на возрастание анаболической активности стероида (частично это происходит, потому что в наличии сопротивление метаболизму под действием 3-гидроксистероид дегидрогеназы в скелетных мышцах). Он был разработан с целью достижения чистого анаболического эффекта, без существенной эстрогенной и прогестиновой активности. О оксандролоне знают в широких кругах, потому что это умеренный стероид, у которого отсутствуют побочные эффекты. Анаболичность у него в 6 раз больше, если сравнивать с тестостероном, но вот андрогенность значительно меньше.

Данный препарат широко применяется спортсменами, которые готовятся к соревнованиям по скоростных и силовых видах спорта, где необходимы чистые мышцы, без воды и жира.

Историческая справка

Впервые оксандролон описали в 1962 году. В медицину его ввела компания Searle (сейчас Pfizer), она поставляла его на рынок в США и Нидерландах под торговой маркой анавар. Помимо этого, препарат продавали в Аргестине, Австралии, Бразилии, Испании и Франции. Разрабатывали оксандролон в качестве умеренного анаболика, предполагалось, что его можно будет применять даже женщинам и детям. На протяжении длительного периода времени его применяли для лечения истощения, восстановления после травм, инфекций, длительного применения кортикостероидов, и для лечения больных остеопорозом. В 1989 году было принято решения остановить производство препарата, примерно на 6 лет он исчез с рынка. Снова в продажу он поступил в 1995 году, его начали назначать больным СПИДом, гепатитом, и для лечения задержки роста у детей.

Большому количеству пациентов не нравилась монополия препарата и установленная цена (30 долларов за упаковку, не смотря на то, что всего 6 лет назад цена стояла 3,75). По истечении нескольких лет было принято решение снизить цену на препарат. Оксандролон можно приобрести не только в США, но не повсеместно.

Фармакологическое действие (по данным производителя)

Проникая в ядра клетки, станозолол активизирует генетический аппарат клетки, это приводит к увеличению синтеза ДНК, РНК и структурных белков, активации ферментов звена и усилению тканевого дыхания, окислительного фосфорилирования, синтеза АТФ и накоплению макроэргов в клетке. Способствует выработке кальция, угнетает катаболические процессы, спровоцированные глюкокортикоидами. Улучшает трофику тканей, провоцирует отложение кальция в костях, задерживает в организме азот, фосфор, серу. Гемопоэтическое действие зависит от увеличения синтеза эритропоэтина.

Стероидный профиль оксандролона

Активность вещества: 8-12 часов
Классификация: Стероид Анаболического / Андрогенного происхождения
Способ применения: в виде таблеток
Дозировки: Мужчины 20-80мгдень Женщины 10 – 20 мг/день
Акне: Да
Задержка воды: Нет
Высокое кровяное давление: Да
Гепатотоксичность: да (слабая)
Эстрогенная активность (ароматаза): Нет
Прогестагенная активность: нет
DHT(дегидротестостерон) конвертация: нет
Снижение HPTA функции (выработка собственного тестостерона): Да
Анаболическая активность(400%) Андрогенная активность(25%)
Время обнаружения – 3 недели (примерно, в связи с тем, что ДК постоянно усовершенствует методы обнаружения запрещённых веществ, так же это зависит от спортсмена, применяет ли он фенобарбитал и фуросемид с целью ускорения выведения препарата)

Основные эффекты 

Способствует построению жесткой сухой мускулатуры
Влияет на возрастание силовых показателей
Оказывает жиросжигающий эффект
Увеличивает синтез соматропина (гормона роста)

 

Применение оксандролона

В результате исследований было выявлено, что прием пероральных ААС вместе с едой снижает биодоступность препарата. Это связано с жирорастворимой природой ААС, что может дать возможность части препарата раствориться в жире из пищи, а это снизит всасывание ААС в желудочнокишечном тракте. Для достижения максимального эффекта данный препарат следует принимать на пустой желудок.

Прием для мужчин

В медицинских целях препарат принимают по 2,5-20мг в день на протяжении 2-4 недель, бывало, что принимали и по 3 месяца. Обычная дозировка с целью улучшения телосложения – 50-80 мг в день (спортсмены, у которых большая мышечная масса могут использовать его по 100-150 мг в день) на протяжении 6-8 недель подряд. Оксандролон обычно совмещают с другими стероидами, чтобы улучшить эффект. К нему можно добавить 200-400 мг тестостерона пропионата в неделю, это снизит уровень задержки воды и жира больше, чем в случае с тестостероном энантатом. Для сушки можно использовать оксандролон с тренболоном (150мг в неделю) или примоболан (200-300мг в неделю). В курсах, где целью стоит набор массы можно добавлять к оксандролону 200-400мг нандролона деканоата (помним про каберголин) или 800 мг болденона ундесилината в неделю.

Прием для женщин

Медицинские назначения для женщин почти не отличались, разве что вводился запрет на прием препарата во время беременности и перед зачатием. Вероятность возникновения побочных эффектов у женщин очень маленькая. Если проводится работа над телосложением, принимают по 5-10-20мг (в зависимости от проявлений эффектов вирилизации), на протяжении 1-1,5 месяцев. Быстрые спортсменки могут принимать другие стероиды, например, примоболан или болденон.

Побочные действия оксандролона

Несмотря на то, что оксандролон относят к анаболикам, риск возникновения андрогенных побочных эффектов все еще присутствует (к примеру, повышенная жирность кожи, прыщи, рост волос на теле и лице). Высокие дозы, вероятно, вызовут их. Анаболические стероиды могут привести к ухудшению потери волос по мужскому типу. Женщинам следует напоминать о вероятных вирилизующих эффектах ААС (например, огрубление голоса, нерегулярные месячные, изменение в структуре кожи, рост волос на лице и увеличение клитора).

У данного стероида низкая андрогенная активность, порог андрогенных побочных эффектов значительно выше, чем у тестостерона, метандростенолона или флюоксиместерона.

Оксандролон не до конца вступает в реакцию с 5а-редуктазой. Он превращается в более андрогенную производную хуже, чем тестостерон. Подобная ситуация с примоболаном и станозололом.

Оксандролон – с17-альфа алкилированный препарат. Это изменение защищает препарат от дезактивации печенью, давая возможность большому проценту лекарства попасть в кровоток после перорального приема. Алкилированные ААС могут быть гепатотоксичными.

Оксандролон мало напрягает печень, плохо метаболизируется. Этот факт подтверждается тем, что больше третьей части препарата выходит с мочой в неизменном виде. В другом проводимом исследовании сравнивали эффект 17-альфа алкилированных препаратов, таких как метилтестостерон, норэтандролон, флюоксиместерон и метандриол. В этих исследованиях было доказано, что под влиянием оксандролона выделение сульфобромофталеина почти не изменилось.

20мг оксандролона дают меньшую на 72% задержку СБФ, если сравнивать с такой же дозой флюоксиместерона. Более новое исследование затрагивало ВИЧ-положительных людей (262 мужчины) и увеличивающиеся дозы оксандролона (20,40 и 80мг).

Препарат применяли на протяжении 12 недель. У группы, принимающей 20мг оксандролона в день, не было выявлено статистически значимого увеличения уровня АЛТАСТ. Те, кто употреблял 40мг, показали 30-50% увеличение АЛТАСТ, в то время как группа с 80мг показала 50-100% увеличение уровня. Примерно 10-11% людей почувствовали токсичность в группе 40мг, в группе 80мг этот процент возрос до 15%. Конечно, не следует полностью исключать вероятность серьезных проблем, но оксандролон считают одним из наиболее безопасных 17-альфа алкилированных препаратов.

ААС могут иметь вредное влияние на холестерин крови, к примеру, уменьшение уровня «хорошего» ЛПВП, смещение баланса в сторону риска атеросклероза. Относительное влияние ААС на липиды зависит от дозы, пути ввода, типа стероида и уровня сопротивления печеночному метаболизму. У оксандролона сильное влияние на регулирование холестерина печенью, так как у него неароматизирующаяся структура, структурное сопротивление распаду и пути ввода. Ранее упоминалось исследование на ВИЧ-положительных мужчинах, 20мг оксандролона вызвали сокращение уровня ЛПВП на 30%. ЛПВП был подавлен в среднем на 33% в группе 40мг и на 50% в группе 80мг. Это сопровождалось увеличением уровня ЛПНП в группах 40мг и 80мг (30-33%), что влияет на возрастание атерогенного риска. ААС могут негативно влиять на давление крови и триглицериды, снижать расслабление эндотелия сосудов, привести к гипертрофии желудочков сердца, а это потенциально увеличит риск возникновения сердечнососудистых заболеваний и инфаркта. Сейчас известно, что все ААС вызывают отрицательные изменения в организме. Для снижения нагрузки на сердечнососудистую систему, советуют свести к минимуму употребление насыщенных жиров, холестерина и простых углеводов во время курса ААС. Советуют употреблять добавки, к примеру, рыбий жир, липид стабил и подобные продукты.

Все ААС в дозах, которые необходимы для строительства мышц, угнетают эндогенное производство тестостерона. Оксандролон не является исключением. В вышеупомянутом исследовании ВИЧ-положительных мужчин, двенадцать недель употребления дозы в 20-40мг в день вызвали сокращение уровня тестостерона в крови на 45%. В группе 80мг это уменьшение уровня было примерно 66%. Также было замечено снижение уровня ЛГ в первых двух группах на 25-30% , и на 50% снизился он в группе 80мг. Другие исследования, в которых изучали влияние оксандролона на мальчиков с отсроченной половой зрелостью, показали, что существенное подавление ЛГ и тестостерона происходит и при дозе 2,5мг в день. Если не принимать вещества, которые стимулируют выработку тестостерона, он придет на обычный уровень на протяжении 1-4 месяцев после курса. Следует отметить, что в длительном периоде гипогонадотропный гипогонадизм может развиться во вторичный, а это может потребовать медицинского вмешательства (следует помнить о ПКТ).

Показания к лекарственному применению

Нарушение синтеза белков, кахексия различного происхождения, травмы, ожоги, до-и послеоперационные периоды, период восстановления после инфекционных болезней и облучения; токсический зоб, мышечная дистрофия, остеопороз, отрицательный азотистый баланс при кортикостероидной терапии, гипо-и апластическая анемия, лечения больных СПИДом, гепатитом, лечение задержки роста у детей.

Противопоказания к лекарственному применению

Повышенная чувствительность к компонентам препарата; рак предстательной железы, рак молочной железы у мужчин, карцинома молочной железы у женщин с гиперкальциемией; ишемическая болезнь сердца, атеросклероз; печёночная и почечная недостаточность; острый и хронический простатит; период беременности и кормления грудью.
Источник информации:madbear.info

Просмотров: 17

Стероиды с минимальной побочкой

Легкие стероидные препараты


Легкими стероидами называют вещества, которые имеют небольшой побочный эффект и при правильном дозировании становятся практически безопасными.

Станозолол и его характеристики


Если вы ищете безопасные стероиды, то вполне достойным выбором может стать препарат Станозолол. Дозировки варьируют от пятидесяти до ста миллиграммов за сутки. У препарата нет ароматизирующего эффекта. Срок же действия от семи до десяти часов.

Станозолол больше распространен среди легкоатлетов. Были в спорте случаи, когда спортсмены попадались на применении этого вещества и теряли свои медали.

Спортсмены относят Станозолол к уникальным средствам. Ведь это – единственный препарат, который содержит в составе аж пять бензольных колец. Хотя в иных средствах этих колец всего по четыре.

По своим свойствам Санозолол относится к эффективным антагонистам вещества прогестерона. Соответственно он используется в комплексе с прочими препаратами для подавления прогестагенного влияния иных средств стероидного типа.

Для использования можно выбрать выпуск для орального употребления или для введения инъекций. И в этом случае стероид сумел отличиться. Дело в том, что большая часть инъекционных препаратов – масляные растворы. Ну, а Станозолол выпускается в виде водной суспензии. Поскольку оба вида ничем не отличаются друг от друга по влиянию на организм, то спортсмен самостоятельно может выбрать метод введения стероида в организм.

В результате применения Станозолола происходит существенная прибавка в мышцах, в весе. Вес у спортсмена сохраняется даже в период интенсивным тренировкам и сидении на диете.


Оксандролон


Другим безопасным препаратом является Оксандролон. Средняя дозировка препарата – от пятидесяти до ста пятидесяти миллиграммов. Срок так называемой полужизни порядка восьми часов. Создавался препарат еще в далеком 1964. Средство отличается практически полной безопасностью в отношении здоровья спортсменов. Но есть и небольшая загвоздка. Эффект от применения Оксандролона также небольшой.

Дело в том, что изначально этот препарат разрабатывался именно для женщин. Применяют его и при детских заболеваниях, которые связаны с атрофией мышц.

В мире бодибилдинга препарат закрепился прочно. И все дело в том, что его активно используют представительницы прекрасного пола, ведь он не вызывает вирилизации – омужания.

Если вы до сих пор не знаете, где купить стероиды без кидалова, то обратите внимание на компанию AthleticPharma. В магазине предлагаются вещества с сильным эффектом и легкие стероиды: Станозолол, Оксандролон, а также Метелонон. Все они высокого качества и действительно работают.

Оксандролон | Персональные блоги | Do4a.com

​В будничной суете, озираясь по сторонам, я вижу семимиллиардный человеческий муравейник, который одним сплошным потоком ежеминутно куда-то торопится, спешит, бежит, увлекая за собой моё внимание, и, превращая людскую уникальность в нечто усреднённое, рядовое. Наблюдая за этим процессом, изредка я встречаю людей, не похожих на остальных, выделяющихся на фоне всеобщего безумия. Эти одиночки не выбирают легких путей. Они вынуждены рисковать каждый день либо под колоссальными весами на штанге, либо под чудовищными волнами гипогликемии и послекурсовой депрессии. Они бредут по раскалённым пескам бодибилдерского бытия, пробираются сквозь тернии потенциальных побочек принимаемых препаратов, карабкаются на отвесные скалы культуризма, забывая о страхе и боли. Они обречены на ежедневный подвиг. Это особый сорт людей, образ жизни которых отличен от способа существования других людей. Эти люди имеют особые взгляды, вкусы и пристрастия. Нужды и потребности таких людей тоже уникальны. Если простые смертные довольствуются эстрогенонаполненными углеводами, алкогольным угаром и ультрафиолетом ночных клубов, то нам с вами этого мало, нам нужно больше. Мы питаемся высококачественным белком, наслаждаемся энергией солнечных лучей, проводим большую часть жизни в телесном самосовершенствовании, которое достигается путём тяжелых тренировок и фармакологических экспериментов. Для достижения наших целей мы вынуждены изучать диетологию, физиологию, анатомию, методические основы тренировочного процесса и много чего еще. Но главное место в нашей иерархии знаний занимают биохимия и фармакология. Без глубокого понимания биохимических процессов, происходящих в организме, и фармакокинетики употребляемых медикаментов не возможен рост нашего спортивного мастерства. Качественные изменения нашей физической формы напрямую зависят от того, достаточно ли мы проинформированы и умеем ли мы грамотно использовать полученные из различных источников знания. В настоящее время человек погружен в информационное поле и не испытывает дефицита знаний. Но зачастую достоверность и актуальность тех данных, которые мы черпаем из книг и интернета, вызывают сомнение. Я надеюсь, что при помощи моих статьей, которые являются своеобразным информационным фильтром, представители различных спортивных дисциплин смогут разобраться со всеми аспектами использования спортивной фармакологии и узнают о всех тонкостях применения тех стероидов, которые им наиболее интересны. В этой статье я продолжу тему поиска философского камня от фармакологии, которая была уже затронута и разобрана в одной из моих прошлогодних работ. Проблема безопасного приёма стероидов связана с такими «мягкими» препаратами, как примоболан и оксандролон… о красоте и величии оксандролона ( самого редкоупотребляемого и одного из самых дорогостоящих препаратов на «черном» рынке РФ) я в этой статье и порассуждаю.
​Оксандролон – символ безвредного употребления запрещенных веществ. Фармакологическая икона, мироточащая сотнями литров атлетического счастья, на которую молятся тысячи спортсменов и спортсменок в ожидании удачного прохождения ДК с обязательным получением в финале своих мытарств богоподобных форм. Серийное производство этой «иконы» началось в середине 1960х годов в стенах одной из многочисленных фарм.компаний Америки. По сути курс оксандролона является средним по силе анаболиком со слабым андрогенным эффектом, но можно сказать и по-другому, оксана – посредственный андроген с маломощным анаболическим действием. Изначально этот мягкий стероид имел чисто медицинское назначение и применялся при лечении женщин, детей и других изящных существ, но уже буквально через несколько лет после своего появления на свет Божий почти весь анавар, производимый американской фарм.промышленностью, стал использоваться поклонниками здорового образа жизни с легким налётом атлетизма. Курс оксандролона стал хорошей медикаментозной альтернативой дианаболу – самому распространённому стероиду того времени. Представители самых разных видов спорта очень быстро оценили все достоинства оксаны и стали применять её на постоянной основе в своих стероидных циклах.
​Как уже говорилось выше, анавар – чрезвычайно мягкий анаболический стероид с низкой андрогенной активностью. Андрогенный индекс препарата — 24. Анаболический индекс — 322-630. Полное его научное название (хим.формула) — 5альфа-андростан-2-окса-17альфа-метил-17бета-ол-3-он. Андрогенная природа обусловлена происхождением препарата, оксандролон – дериват дигидротестостерона, что роднит его с винстролом. Низкая андрогенность препарата объясняется тем, что из-за своего молекулярного строения он не имеет достаточную способность к взаимодействию с ферментом 5-альфа редуктаза и превращению в более сильную дигидро-форму, по этой причине анавар во много раз слабее тестостерона. Период активности (время действия) препарата в организме составляет примерно 8 – 12 часов, поэтому анавар можно употреблять два раза в день, но более частые приёмы предпочтительнее. Функциональность курса оксандролона связана с ускорением и оптимизацией множества различных биохимических процессов внутри организма. Как и другие анаболики, анавар оказывает сильное воздействие на белковый обмен. Под влиянием стероида усиливается синтез протеинов и тем самым ускоряется производство белка организмом. Этот эффект выражается в положительном балансе азота и в улучшении общего состояния атлета. Можно отметить и то, что курс оксандролона оказывает положительное влияние на баланс кальция и других микроэлементов, что способствует поступлению кальция, магния и калия в костную ткань. Оксандролон соло благотворно влияет на центральную нервную систему спортсмена, помогая очень быстро восстанавливаться после тяжелых тренировок. Анавар — прекрасный антикатаболик. Антикатаболическое действие препарата заключается в том, что стероидные молекулы препарата блокируют, находящиеся на мембране мышечной клетки, рецепторы кортизола. И производимый организмом кортизол, сильный катаболический гормон, утрачивает свою разрушительную силу и мышечная клетка не теряет протеин, т.е. снижается процент белка, который расходует организм под воздействием катаболических процессов. Рост силы в период приёма оксаны связан с тем, что этот анаболик повышает в мышечной клетке синтез креатинфосфата, который играетрешающую роль в восстановлении аденозинтрифосфата (АТФ). АТФ – источник всех мышечных движений, т.к. является горючим материалом, необходимым клетке для совершения работы. АТФ накапливается в мышечной клетке и при необходимости превращается в аденозиндифосфат. Этот процесс высвобождает энергию, позволяющую работать мышечной клетке. Для обратного процесса АДФ в АТФ также нужен КФ. Чем его больше, тем быстрее идет это восстановление и тем больше АТФ находится в распоряжении мышечной клетки. На практике это означает, что мышца становится сильнее.
​Если сравнивать воздействие на организм этого неказистого стероида с работой других анаболиков, то больше всего оксандролон похож на мастерон и винстрол, которые, как и оксана, не склоны к ароматизации, что является главным преимуществом этих препаратов. Многие спортивнозависимые люди останавливают свой выбор на оксандролоне именно по причине полного отсутствия риска быть залитым и водянистым при его употреблении. Предсоревновательный период сушки редко обходится без анавара. Оксандролон соло позволяет с максимальным комфортом и без лишнего риска добраться до вожделенного многими атлетами пункта назначения – идеального тела с изумительно сухой мускулатурой. На финальной стадии подготовки при низкоуглеводной/безуглеводной диете и в особом режиме тренинга мясо культуристов при грамотном использовании оксандролона приобретает фантастическое сечение и глубину. Профессиональный и любительский бодибилдинг – не единственный ареал обитания любителей оксаны, силовики так же являются поклонниками этого анаболика. Пауэрлифтеры и ТАшники хоть и называют оксандролон бабским препаратом и используют по отношению к этому медикаменту эпитеты «слабый» и «никчёмный», однако применяют анавар с огромным удовольствием при первой же возможности. Особым почётом пользуется оксандролон соло в легких весовых категориях и у тех атлетов, чей страх залететь на ДК перевешивает опасение потратить на этот стероид последние деньги. Конечно, применение анавара в ПЛ и ТА не носит столь массового характера, как в культуризме, однако по понятным причинам профессиональный силовой спорт без подобного рода препаратов немыслим.

Анавар хорошо себя зарекомендовал и в других более легких спортивных дисциплинах, в которых важны скорость, выносливость и взрывная сила. Плавцы, спринтеры, марафонцы, прыгуны, бойцы и многие другие используют в своих курсах анавар. На мой взгляд, легкоатлетам оксандролон подходит лучше всего. Именно в скоростно-взрывных видах спорта оксандролон соло полностью раскрывает свой потенциал. Регулярные романтические встречи с оксаной наделяют спортсмена просто-таки феноменальной скоростью и выносливостью. Причём даже терапевтические дозировки отлично работают на атлетах и дают значительное улучшение спортивных результатов.

​Не смотря на всё своё великолепие применение оксандролона не лишёно и недостатков. За последние пару десятилетий анавар трансформировался в умах доморощенных качков и придукорватых гуру в никое подобие священного животного. И теперь мы имеем дело не с рядовым медикаментом, а с настоящей фармакологической коровой, которую нельзя ни пнуть, ни дурным словом наградить, ни даже косо посмотреть в ее сторону. Куда ни посмотришь, везде – в любой статье, на любом форуме – только и слышишь хвалебные песнопения в честь этого индийского истукана. И воду он не задерживает, и эндогенный тестостерон не понижает, и прыщей от него нету, и не ароматизируется вовсе. Короче, мечта поэта качка!.. Однако не всё так радужно, под овечьей шкурой скрывается вполне себе обычная волчара. Анавару присущи почти все те же побочки, что и другим оральным ААС, правда не в столь ярких проявлениях. Далее поговорим о том, почему спортсмены подчас готовы отдать последний рубль за этот волшебный эликсир, а так же подробнейшим образом пройдемся по всем минусам употребления анавара, т.е затронем тему побочек.

Покупка недешёвого анавара и его потребление – не случайное событие в жизни спортсмена. Подобный волевой акт совершается для достижения определённых целей и решения конкретных задач. Я постараюсь разложить всё по полочкам и проанализировать мотивационный аспект, затронув попутно множество других факторов. Применение оксандролона вводится в рацион атлета, как правило, по следующим причинам:

1. Для первого фарм.опыта из всего доступного ассортимента стероидов иногда выбор новичка останавливается на самом недоступном препарате – анаваре. И хотя первый курс на оксане – редкое явление, я считаю этот «безопасный» стероид одним из лучших вариантом для начинающего фармпотребителя.

2. Применение оксандролона на так называемом «мосте». При помощи оксы некоторые продвинутые химики, которые сидят на чрезвычайно длинных/ «вечных» курсах, дрейфуют в медикаментозном океане между сложноустроенными фарм.островами, тем самым обеспечивая свой организм необходимым отдыхом от мощных препаратов и ежедневных инъекций. На мой взгляд, для подобных целей больше подходят инъекционные препараты пролонгированного действия типа теста энантата, но некоторые спортсмены придерживаются иной точки зрения и в качестве промежуточного препарата используют анавар в дозировке 30 – 60 мг в день сроком до двух месяцев.

3. Следующая и самая распространенная причина поедания оксандролона – «сушка». Это финальная фаза подготовки к соревнованиям, когда культуристы вынуждены использовать не ароматизирующиеся и не задерживающие воду препараты короткого действия. Обычно в этот период анавар комбинируется с винстролом и некоторыми другими стероидами.

4. Необходимость прохождения допинг – контроля. Как известно, сроки обнаружения анавара – 3-4 недели, поэтому многие спортсмены подводятся к ДК на этом замечательном препарате, заблаговременно отменяя его. В этом же пункте повторюсь и укажу еще одну немаловажную причину употребления анавара – потребность удержаться в одной весовой категории, что актуально для ПЛ и ТА. Некоторые силовики, которые не желают переходить в более тяжёлую весовую категорию, едят оксану по той причине, что она даёт им возможность в течение некоторого времени становиться сильнее без увеличения веса тела.

5. Иногда качки используют анавар для выравнивания гормонального фона на курсе. Дело в том, что применение инъекционных стероидов не может обеспечить постоянства гормонального фона в организме, причиной чего является неравномерное поступление действующего вещества в кровоток из масляного депо, нестабильность активизации препарата и куча других факторов. Дополнительный приём таблетированных препаратов позволяет стабилизировать уровень гормонов, в результате спортсмен легче переносит так называемые стероидные ямы на курсе.

6. Понижение ГСПГ. Мало кто знает, что анавар, наряду с другими ААС, неплохо справляется с задачей повышения уровня свободного тестостерона. Ну а те, кто знает, используют оксандролон в небольших дозировках во второй половине курса.

7. Атлеты, которые испытывают проблемы с давлением во время стероидных курсов, часто отказываются от других, более дешевых, но очень сильно ароматизирующихся препаратов в пользу оксаны, которая даже при довольно-таки серьезных дозировках позволяет держать АД в пределах нормы.

8. Малая гепатотоксичность. Иллюзорность подобных воззрений легко обнаруживается при детальном рассмотрении хим.структуры препарата. Это 17-альфа алкилированный оральный стероид, данная молекулярная особенность защищает действующее вещество от разрушения при прохождении через печень и делает препарат гепатотоксичным. Безусловно, приём анавара переносится печенью (и организмом в целом) гораздо легче нежели употребление других ААС с 17-альфа структурой, это видимо объясняется тем, что приблизительно треть вещества остаётся в неизменном виде после выделения его с мочой, однако при длительном использовании достаточно высоких дозировок оксандролона на печень всё же оказывается вполне ощутимое «давление».

9. Слепая вера в особые способности оксандролона, а конкретно в то, что этот препарат не влияет на собственную выработку тестостерона. Якобы анавар не запускает негативный механизм обратной связи оси гиталамус-гипофиз-яички, который срабатывает при приёме других анаболических стероидов. Данное утверждение легко опровергнуть, сделав все необходимые анализы после 8-ми недельного курса на средних дозировка (40-50мг препарата в день). Уровень своего тестостерона будет почти на нуле. Я могу согласиться с тем, что короткие четырехнедельные курсы на терапевтических дозировках почти никак не повлияют на мужской организм в плане снижения эндогенного теста, но и на росте силы и выносливости такое экономное употребления оксаны врядли каким-то образом скажется. Нам же интересен исключительно факт приёма эффективных дозировок и тот результат, который мы получим, и который будет сопровождаться определенными изменениями в организме.

10. Иногда оксандролон рассматривается как стероид для тех, кто страдает от повышенного уровня холестерола и триглицеридов. Ранние исследования показали, что оксандролон способен понижать общий холестерол и уровень триглицеридов у подобных пациентов, и первоначально была высказана мысль о возможности применения этого препарата как гиполипидного (понижающего уровень липидов) средства. Однако при последующих исследованиях было выяснено, что хотя употребление оксандролона и может быть связано с понижением общего холестеринового уровня, но это понижение сопровождается таким перераспределением соотношения между «хорошим» и «плохим» холестеролом, что обычно наблюдается движение в неблагоприятном направлении. Это, практически сводит на нет какие бы то ни было позитивные эффекты, которые препарат может оказывать на тригилицериды или общий холестерол, и в действительности делает его опасным в случаях сердечных проблем, особенно при использовании в течение длительного периода времени.

11. Миф о жиросжигающих свойствах оксандролона. В некоторых ветхозаветных переводных статьях указывалась эта особенность оксаны. На самом же деле никакого прямого воздействия на липолиз стероид не оказывает, а зачастую даже ухудшает ситуацию со сбросом лишнего веса, т.к. у некоторых людей во время приёма оксандролона наблюдается чудовищный жор.

12. Если качёк вдруг узнаёт, что он на самом деле женщина (или ребёнок), то это внезапное открытие тоже является серьезной причиной для начала приёма анавара.

13. Иногда можно встретить еще одну причину/цель покупки и поедания оксандролона – непреодолимое желание (стремление) потратить кровнозаработанные/сложнонаворованные нефтедоллары/жидоевро на нечто элитарное и малодоступное.

Если применение анавара соло является делом простым и незамысловатым, то его комбинирование с другими ААС и в целом организация курса для большинства начинающих химиков представляется сложнейшей задачей, поэтому остановлюсь на этом вопросе более подробно и приведу примеры конкретных стероидных курсов.

1. Вариант для молодняка. В качестве первого в жизни знакомства с химией хорошо подходят не длинные курсы сроком до шести недель при суточной дозировке в 40мг. При такой слабой фарм.поддержке мы добиваемся небольшого прироста мышечной массы и улучшения скоростно-силовых показателей при совершенном отсутствии побочек, что очень важно для новичков. ПКТ после такой фармзагрузки делать обязательно.

2. А вот уже для второго фарм.опыта хорошо подойдёт классическое сочетание андроген+анаболик. Оксана по 40мг в день + 50мг – 100мг тестостерона пропионата через день. Продолжительность от 6 до 8 недель. Используя небольшие дозировки и короткие препараты, сразу после курса мы будем иметь средненький результат при минимуме побочек и минимуме отката.

3. Курс для параноиков с невысоким IQ. 8 недель приёма по 30мг анавара в день и по 30мг станозолола. Такая комбинация хорошо подходит для тех спортсменов, которые панически боятся проникновения в свои нежные ягодички острой металлической иглы, однако хотят прогрессировать. Лично мне такая версия фармпотребления не нравится по понятным причинам и никому не рекомендую так себя травить.

4. Оксандролон – препарат не для аскетов, предпочитающих деку и метан, это стероид для фарм.гурманов, находящихся в бесконечной поиске чего-то экзотического и необычного. Шестинедельный курса оксаны по 40мг в день + 100мг мастерона + тест пропионат через день обеспечит самого взыскательного фарм.потребителя наилучшими впечатлениями и сверхкачественной мышечной массой. Не забываем подстраховаться на таком курсе ингибиторами ароматазы.

5. Идеальным курсом считаю дуэт с обязательным участием оксаны и тестостерона пропионата. Анавар 50мг в день + тест. пропионат 400 — 500мг в неделю и всё это на пару месяцев. Курс для искушенного химика. Такая комбинация демонстрирует подлинный симбиоз препарата и спортсмена.

6. Вариант для наращивания максимального количества качественного мяса. Анавар 50мг в день + тест. пропионат 400 – 500 мг в неделю + 300 – 400 мг тренболона ацетата в неделю. Сроки курса — от 6 до 8 недель. Рост мышечной массы и оформление тела будут видны в зеркале буквально каждый день. Помним о возможном появлении признаков тренового гино и прикрываемся по необходимости фарестоном, например.

7. Курс 6 – 8 недель. 400мг – 600мг примы в неделю + 50мг оксандролона в день + тестостерона энантат 200-300мг в неделю. Совмещение двух наиболее безопасных и безумно дорогих препаратов с тестостероновым сопровождением придётся по сердцу спортсменам, которые дорожат своим здоровьем и не экономят на нём. Такое сочетание медикаментов обеспечит небольшую прибавку в массе и силе, а так же даст хорошее восстановление после тяжелых тренировок и поддержит организм на жесткой диете.

8. Курс на 10 — 14 недель. Первые 10 недель: болденон 800мг в неделю + тест ципионат 500мг в неделю + анавар 50мг в день. Последние 4 недели курса — тест пропионат 100мг через день. Этот массонаборный вариант подойдет для тех, кто только начинает своё знакомство с длинными эфирами и хочет добиться хорошего результата.

В рамках одной статьи просто невозможно перечислить все варианты использования анавара. «За бортом» остались различные малопонятные мне варианты комбинаций дека + оксандролон или анапа + оксандролон. Ничего не сказал о предстартовых курсах типа анавар + халотест, которые используются перед прохождением ДК. Так же не стал останавливаться на конкретных примерах предсоревновательной сушки с использованием различных жиросжигателей и стимуляторов, т.к это уже тема отдельной статьи.

Итак, подведём итоги. Наш вердикт. Препарат безусловно является интереснейшей альтернативой более мощной химии и имеет свою отдельную нишу в структуре фарм.потребления , но рекомендовать его я могу лишь профессиональным спортсменам, чья спортивная карьера во многом зависит от применения подобных узкоспециализированных медикаментов, и тем химикам-любителям, которые трепещут перед потенциальными побочками других стероидов.

 

«Попасться на станозололе — это великая глупость!» — спортобозреватель о допинговом скандале в Казахстане

Известный спортивный обозреватель Леонид Юрьев прокомментировал допинг-скандал, в центре которого оказались Илья Ильин, Майя Манеза, Светлана Подобедова и Зульфия Чиншанло. Он считает, что проблема, возможно, не только в неспортивном поведении наших чемпионов, а в том, что они «сидят» не на тех препаратах. 

«Наши атлеты на станозололе попадались постоянно, – говорит Леонид Юрьев. –  Производное от дегидрометилтестостерона – то, на чём наши спортсмены массово завалились в  2013 году. Собственно, когда начался скандал с употреблением российскими спортсменами мельдония, в Казахстане было дикое злорадство. Я тогда написал текст, говоря о том, что не надо радоваться их проблемам, надо подумать о том, что нам это выйдет боком. Казахстанская наука в спорте уступает российской просто на порядок. Если они придумали как мешать стероиды с алкоголем, чтобы они не выявлялись на допинг-контроле, то у нас наука даже в этом направлении не двигалась вообще. Попадаться на станозололе – это великая глупость, это препарат советских времён. Посмотрите, кто на чём попался – это одни анаболики. Причём «загремели» только Казахстан и Восточная Европа. Это говорит о том, что у нас пещерный уровень спортивной науки». 

Леонид Юрьев уверен, что казахстанских спортсменов нужно защищать несмотря ни на что. Вот только наши чиновники, по его мнению, не умеют этого делать. 

«У нас катастрофически отсутствует умение защищать спортсменов. У нас чиновники умеют только пожимать руку и позировать, – говорит Леонид Юрьев. –  Пока в России воспитывали юристов мирового класса, пока там спортсмены учились сохранять чеки из ресторанов, чтобы доказать свою невиновность, если в мясе окажется кленбутерол, а у нас все оправдания про то, что этого не может быть, наветы конкурентов и прочее. У нас нет умения юридически грамотно выстраивать свою защиту. До Олимпиады времени в обрез. Как отстоять наших звёзд? В хорошей спортивной нации своих защищают до последнего. Пусть это сукин сын, но это наш сукин сын. Если бы в своё время в полуфинале Олимпиады по вольной борьбе индус укусил бы не Акжурека Танатарова, а американского спортсмена, то там такое было бы! А у нас никто не сделал ничего. Мы показываем тем самым, что нас можно бить». 

16 июня стало известно, что четверо казахстанких тяжелоатлетов провалили повторные допинг-тесты с Олимпиады в Лондоне 2012. У Ильи Ильина в организме нашли дегидрохлорметилтестостерон и станозолол; у Зульфии Чиншанло – оксандролон, станозолол; у Майи Манезы – станозолол; у Светланы Подобедовой – станозолол.

Министр культуры и спорта Арыстанбек Мухамедиулы, комментируя допинг-скандал, заявил, что право оспаривать результаты антидопинговой комиссии могут только сами спортсмены.

Дисциплинарная комиссия рассмотрит вопрос по наградам спортсменов и их участию в Олимпиаде в Рио-де-Жанейро 27 июня. 

Станозолол и Оксандролон, как самые безодибные стероиды


Автор: Алексей — консультант сайта ru-steroid.site Место в рейтинге авторов: 16

(стать автором) Дата: 2017-01-12 Просмотры: 21 487 Оценка: 4.2

Все статьи автора >> Медали статьи >>

Идёт загрузка статей…

Важно! Сайт «Твой Тренер» не продаёт и не призывает к употреблению анаболических стероидов и других сильнодействующих веществ. Информация предоставляется для того, чтобы те, кто всё же решил их принимать, делали это максимально грамотно и с минимальным риском для здоровья.

В этом обзоре мы постараемся более подробно разобрать влияние стероидных препаратов с незначительными побочными эффектами, возникающими во время курса приема стероидов, также известными как «легкие стероиды».

«Станозолол»

Stanozolol является стероидом анаболического и андрогенного действия. Он выпускается в таблетированной и инъекционной форме. Препарат достаточно редко вызывает побочные явления и зачастую применяется женщинами (следует отметить, что при превышении дозировок вирилизация и маскулинизация все же вероятны). Отзывы на «Станозолол» в таблетках говорят об их токсичности для печени. Поэтому рекомендуется применять инъекционный раствор.


Комбинированные курсы

При использовании препарата в комплексе с другими средствами следует выбирать стероиды, направленные на создание сухой, качественной мускулатуры.

Одним из лёгких и эффективных комплексов будет Оксандролон и инъекционный Мастерон. Подобный вариант позволит создать качественную форму при минимальном риске побочных эффектов и вреде организму. Оба препарата в данной связке хорошо дополняют друг друга, и при минимальных дозах дадут мощный синергический эффект. На таком курсе, длиной в 40 дней, атлет может получить 6 кг безупречной мускулатуры.Курсы с препаратами, имеющими высокие андрогенные эффекты, направленные на увеличение массы в комплексе с оксандролоном не дадут хорошего результата.

ПОДРОБНЕЕ ПРО: Как использовать насадки для увеличения члена

Во-первых, оксандралон не способен дать прирост массы, как другие препараты, например, метандиенон или станозолол, в случае, если нужно набрать большую, но качественную массу. Во-вторых, цена оксандролона в несколько раз выше, чем у того же станозолола.

Курс сустанона, или других длинных эфиров тестостерона, с оксандролоном не даст желаемого результата, а вот оксандролон и тестостерон пропионат будет отличным вариантом для набора сухой рельефной мускулатуры, или удержания ее в промежутке между полноценными стероидными курсами из четырех или шести препаратов. Данный курс составляется то принципу пирамиды, описанной выше. Пропионат нужно ставить по 1 мг через день с утра.

Эффект от приема

  1. Stanozolol — достаточно специфичный стероид. Он почти не вызывает прироста мышц, но зато придает телу красивую рельефность. Препарат значительно увеличивает видимость вен и способствует сжиганию жировых клеток.
  2. Помимо этого, стероид выводит скопившуюся жидкость.
  3. За счет уменьшения уровня глобулина, связывающего половые гормоны, препарат улучшает эффективность приема других стероидов (отзывы, размещенные в сети Интернет, доказывают такое действие препарата).
  4. Усиливает аппетит.
  5. Увеличивает показатели выносливости и силы.

Описание

Курс на сухую массу тестостерон энантат и оксандролон подойдет новичкам у которых нет большого опыта в приеме стероидов. Данный курс также могут использовать девушки. Дозировку тестостерона им нужно уменьшить до 20м/неделя (0,1 мл), а оксаны — до 15, 20, 25 … мг.день (в 2 раза). Эфир энантат необходим для поддержания уровня тестостерона в референтах, поскольку окснадролон сильно подавляет его выработку.

Любая составляющая курса заменяется на аналог, если ее нет на складе.

  • Testosteron enanthate (6 ампул по 250 мг/мл)
  • Оксандролон (Balkan Pharmaceuticals) — 200 таб
  • Clomed (40 таблеток по 50 мг, действующее вещество – Clomiphene)
  • Анастразол (Balkan Pharmaceuticals) — 10 таб

«Оксандролон»

Стероид распространен из-за своего небольшого андрогенного воздействия и высокого анаболического индекса. Как и многие другие препараты, изначально «Оксандролон» разрабатывался в лечебных целях. Его применяли для терапии анемии, синдрома Тернера, борьбы с ВИЧ-инфекцией, восстановления после ожогов и для укрепления костей. Спустя время препарат стал популярен среди спортсменов. Для соревнующихся атлетов препарат является запрещенным.

Описание

Курс на сухую массу оксандролон и тестостерон энантат представляет собой более мощную версию курса для новичков энантат и оксандролон. От своего более простого аналога он отличается увеличенным вдвое количеством инъекций тестостерона, а также применением на курсе такого гормонального препарата, как ХГЧ , и более продолжительной ПКТ. Опытные атлеты могут увеличить количество недель в курсе до 14 (дозировки сохраняются). Отдыхать после такого курса необходимо практически столько же, как и длится сам курс.

Любая составляющая курса может быть заменена на аналог, если ее не будет на складе.

  • Testosteron enanthate (12 ампул по 250 мг/мл)
  • Оксандролон (Balkan Pharmaceuticals) — 200 таб
  • Clomed (40 таблеток по 50 мг, действующее вещество – Clomiphene)
  • Анастразол (Balkan Pharmaceuticals) — 10 таб
  • MAGNYL
    (5000 ME, действующее вещество — хорионический гонадотропин человека)

Эффект от приема «Оксандролона»

  1. Увеличение твердости мышц и рельефности. Чаще всего средство используют именно для этого. Атлеты на курсах снижения подкожного жира с «Оксандролоном» получают качественные, рельефные мышцы без скопления воды.
  2. Повышение показателей силы. Стероид часто используется легкоатлетами, боксерами, лыжниками и атлетами весовых категорий.
  3. Сжигание жира.
  4. Увеличение уровня гормона роста.

Часто спортсмены, использующие препарат, жалуются на несколько побочных эффектов. «Оксандролон» может вызывать диарею, так как он раздражающе действует на слизистую желудка. Помимо этого, он создает дополнительную нагрузку на печень, хотя считается, что он менее токсичен, чем другие препараты. Специалисты отмечают, что соблюдение правильной дозировки не несет вреда здоровью.

Побочные эффекты

Побочных эффектов у этого ААС не так уж и много, но они всё же имеются, особенно при больших дозировках, впрочем, как и у любого другого препарата. В основном они направлены на репродуктивную функцию и либидо. К возможным негативным явлениям следует отнести:

  • Снижение выработки собственного тестостерона.
  • Атрофия яичек.
  • Снижение либидо.
  • Слабая эрекция.
  • Гепатотоксичность. Она хоть и довольно низкая, но тоже присутствует негативное влияние на печень.

Не факт, что все эти ужасти постигнут именно вас, но таковой риск имеется. Так что предварительно хорошо подумайте, прежде чем употреблять всякую химию. Если у вас уже до приёма «оксаны» имеются какие-либо нарушения работы печени или половых органов, то от препарата лучше сразу отказаться, да и от анаболических стероидов в целом. Ни в коем случае не превышайте дозировки и не нарушайте инструкции, тогда, с наибольшей вероятностью, все эти «кары египетские» обойдут вас стороной.

Особенности

Курс «Оксандролон» и «Станозолол» считается затратным с финансовой точки зрения, так как оба препарата относятся к очень дорогим, но в то же время качественным. Следует отметить, что оба стероида не сильны в плане набора мышц, но все же наблюдается их небольшое увеличение. Эти препараты отлично подходят тем спортсменам, которые преследуют цель увеличить силу и выносливость, при этом не навредив организму. Чаще всего курс «Оксандролона» и «Станозолола» выбирают с целью избавления от лишнего жира и быстрого приведения тела в спортивную форму.

В комплексе эти два препарата способны дать отличный результат и улучшить работу друг друга. При этом после использования не наблюдается процесса ароматизации, поскольку полностью исключается андрогенное воздействие. Это гарантирует выход воды из организма, что позволяет получать только качественную мускулатуру.

В итоге на протяжении всего курса атлет может видеть постепенное сжигание жировых клеток, которое сопровождается увеличением мышц, что визуально делает тело рельефным и спортивным.

Отзыв о соло-Оксандролон.

«Принимал Оксандролон два раза, и каждый раз удивлялся его свойствам эффективности. Первый раз принимал курс этого препарата соло, по 30 мг в сутки на протяжении 2 месяцев, и за курс моя мускулатура выросла аж на 4 кг. Очень возросла физическая сила, и при всем этом не было ни одного побочного эффекта. Где-то вычитал, что препарат не имеет ароматизации и не приводит к гинекомастии, убедился на личном опыте. Второй курс Оксандролона прошел через 16 недель после первого, при этом помимо основного препарата принимал Кленбутерол. Дозу Оксандролона увеличил до 40 мг в сутки, а Кленбутерол пил по 3 таблетки. За 6 недель очень сильно увеличилась сила, а мышцы стали еще более рельефными, упругими, практически каменными. Хотя набор составил всего 3 кг, выглядела мускулатура будто я набрал все 10. Даже не ожидал что мои мышцы будут такими рельефными, выпирающими и венозными. Оксандролон действительно стоящий и крутой препарат.»

Алекс г. Питер 26 лет.

Совместный прием

В данный курс входит:

  • «Оксандролон» — 100 таблеток;
  • «Станозолол» — два флакона по 10 миллилитров;
  • «Кломид» — 20 таблеток, применяется после курсовой терапии.

Итак, как принимать «Оксандролон» и «Станозолол» вместе? Курс начинается с понедельника — так проще ориентироваться. Предложенные дозы являются небольшими, поэтому подойдут для новичков.

«Оксандролон» используют:

  • на 1-й неделе — 2 таблетки в день;
  • на 2-й — 3 таблетки в день;
  • на 3-й — 4 таблетки в день;
  • на 4-й — 3 таблетки в день;
  • на 5-й — 2 таблетки в день.

Суточный прием можно не разделять, выпивать препарат за один раз. Но правильнее будет разделить суточную дозировку на несколько приемов. Сами таблетки можно употреблять в любое время, запивая большим количеством жидкости. Препарат следует применять каждый день, независимо от тренировок.

«Станозолол» используют параллельно с «Оксандролоном». Начинают прием также с понедельника. Колоть препарат следует три раза в неделю: в понедельник, среду и пятницу (по одной ампуле). В дни тренировки инъекция ставится либо за час до начала, либо вечером после занятий.

Практически все анаболические стероиды вводятся только внутримышечно, чаще всего в ягодицу. Профессиональные спортсмены, которые подвергаются интенсивным нагрузкам на тренировке, применяют другой метод. Они вводят препарат в определенные мышцы. Это делается для получения максимального результата, ведь средство попадает сразу в нужное место. В таком случае правильнее всего вводить по полкубика в одну и другую руку. Перед уколом необходимо хорошо взболтать ампулу для того, чтобы действующее вещество полностью растворилось. Новичкам рекомендуется найти опытного человека, который покажет правильное место введения препарата.

Курс Oxandrolone Соло

Препарат рекомендован с целью увеличения рельефности мускулатуры. Стероид не подходит для набора массы. Он проявляет крайне низкую активность к приросту веса, что делает использование Анавара достаточно затратным с этой целью. Максимальный эффект ощущают спортсмены, имеющие хорошую массу мышц и средний показатель содержания жировой ткани. Рекомендованная продолжительность курса соло составляет от 6 и до 8 недель, а ежедневная дозировка равна 20-80 мг. Широкий диапазон принимаемого количества стероида зависит от индивидуальных особенностей.

На выбор оптимальной дозировки препарата оказывают влияние следующие факторы: имеющийся у атлета опыт употребления андрогенных и анаболических стероидов, физиологические возможности и особенности, программы тренировок, поставленная цель и другие аналогичные показатели. Невозможно ожидать максимального эффекта от приема Оксандролона без предварительного медицинского полного осмотра и консультации со специалистом. Курс приема Анавара требует внимательного мониторинга физиологических показателей, чтобы своевременно провести корректировку.

Принимать стероид лучше всего по нарастающей. Начинать следует с минимальных 20 миллиграмм, а затем поднимать дозировку до оптимальной нормы. Чтобы уравновесить гормональный фон и минимизировать побочные явления, принимаемое количество препарата рекомендуется делить на несколько раз в сутки. Послекурсовую терапию (ПКТ) начинают на третьи сутки после отмены Оксандролона. Она предполагает прием в течение 7-14 дней по 10 мг Тамоксифена ежедневно. Усилить эффект позволяет грамотное спортивное питание.

Противопоказания

Перед применением любого стероида необходимо обратиться за консультацией к врачу. Курс «Оксандролон» и «Станозолол» имеет некоторые противопоказания. Принимать средства не рекомендуется при:

  • заболеваниях почек и печени;
  • патологиях сердца и сосудов;
  • индивидуальной непереносимости одного из компонентов;
  • беременности и кормлении грудью.

Оксандролон или станозолол – что лучше?

Из плюсов станозолола можно отметить больший прирост мышечной массы и низкую цену. Длительность приема станозолола может быть больше на две недели. Однако есть ряд недостатков, например, препарат сильно снижает водный баланс в организме, тем самым увеличивает риск получения тяжелых травм во время тренировочного процесса. В остальном, все побочные эффекты станозолола выражены сильнее, а при использовании Анавара, вред можно сократить к минимуму. При соблюдении доз и срока приема, ПКТ можно провести, используя минимум средств.

Свойства и особенности

1. Оксандролон, в отличие от других анаболических стероидов, абсолютно не подавляет выработку собственного тестостерона. Поэтому он не требует использования каких-либо препаратов при выходе из «курса».

2. Кроме этого, он не ароматизируется. То есть во время его применения уровень эстрогенов (женских половых гормонов) не увеличивается. Это очень удобно. Ведь в таком случае отпадает необходимость использования препаратов, подавляющих эстрогены. И риск развития гинекомастии у мужчин отсутствует. А у женщин, даже в больших дозировках, не наблюдается развитие вторичных половых признаков по мужскому типу. Короче, он не превращает женщин в мужчин и мужчин в женщин )).

3. Оксандролон является одним из самых сильных антикатаболиков среди анаболических стероидов. Он блокирует рецепторы кортизола, который «виновен» в разрушении мышц. Тем самым оксандролон способен значительно снизить скорость распада мышечной ткани.

4. Оксандролон стимулирует выработку креатинфосфата в мышцах. А это напрямую влияет на рост силы мышц. Однако он бесполезен для набора мышечной массы. То есть сила от него вырастет, а масса нет. Исследования показали, что к небольшому приросту массы могут привести только значительные дозировки (100 и более мг в сутки).

Свойства Станозолола

Этот препарат на фоне других ААС выделяется универсальностью. Благодаря этому он активно используется представителями различных спортивных дисциплин. В культуризме с его помощью атлеты проводят сильные курсы сушки, а в циклических дисциплинах можно существенно увеличить выносливость. Обладая мощным анаболическим воздействием на организм (320 процентов от тестостерона), на курсе этого препарат вам не удастся набрать большое количество массы.

Среди положительных эффектов анаболика можно выделить:

  • Обладает сильными жиросжигающими свойствами.
  • Ускоряются процессы утилизации жидкости.
  • Позволяет увеличивать не только силовые параметры, но и выносливость.
  • Ингибирует работу глобулина.

Исходя из рассмотренных свойств стероида, становится понятна причина его популярности среди легкоатлетов, штангистов, велосипедистов, лифтеров и т.д. Представителям этих дисциплин стероид помогает быстро увеличивать силу и выносливость, но при этом существенного прироста массы тела не наблюдается. Выше уже говорилось, что Станозолол используется в культуризме в первую очередь для проведения сильных жиросжигающих курсов. Кроме этого при его сочетании с другими ААС можно набирать качественную массу.

Станозолол представляет собой дериват дигидротестостерона и совершенно лишен способности к ароматизации. Сегодня фармацевтическими компаниями выпускается таблетированная и инъекционная версия станазы. Второй препарат многие атлеты по привычке называют Винстрол. Именно под таким торговым названием на рынке появился первый стероид в уколах на основе Станозолола.

Дело в том, что действующее вещество анаболика сразу попадает в кровоток и не разрушается в пищеварительном тракте. В результате на курсе он проявляет более высокую андрогенную активность в сравнении с таблетками. Это говорит о том, что даже при его использовании мужчинами не стоит полностью исключать вероятность проявления андрогенных негативных эффектов. Впрочем, при использовании препарата в рекомендуемых дозах, наблюдаются они крайне редко. Также заметим, что станаза отличается низкой андрогенностью, в сравнении с мужским гормоном этот показатель составляет не более 30 процентов.

Что касается рекомендуемых дозировок, то они зависят от гендерной принадлежности и поставленных задач:

  • Для спортсменок суточная доза таблетированного ААС составляет не более 20 мг.
  • В культуризме оральный анаболик используется каждый день по 30-60 мг. Инъекционную станазу также рекомендуется ставить ежесуточно, а единовременная доза составляет 50 мг.
  • Для увеличения физических параметров спортсменам достачано принимать в течение дня 30-40 мг.

Также среди негативных свойств стероида следует выделить его способность нарушать баланс липопротеиновых соединений. Этот побочный эффект характерен для всех ААС и устраняется с помощью введения в рацион жирных кислот омега-3. Однако наиболее серьезным недостатком анаболика можно считать возможность осушения суставов. Вполне очевидно, что это связано со способностью анаболика быстро утилизировать жидкость.

Станозолол нередко используется, но наибольшим успехом в бодибилдинге пользуются комбинированные курсы с его участием. Мы не рекомендуем лишь сочетать таблетированную станазу с другими оральными ААС. Это связано с наличием у всех препаратов этой группы гепатотоксичности. В результате их совместное применение может создать высокую нагрузку на печень. Наибольшей популярностью среди атлетов пользуются связки Станозолола с эфирами Тренболона, Нандролона, Тестостерона, а также Примоболаном, Мастероном и Болденоном.

Анаболические стероиды — разумный минимализм: лучше меньше, да дольше (Д.Яковина)

4.1 / 5 ( 16 голосов )

Данная статья основана на личном опыте автора и опыте его друзей и знакомых. Автор не претендует на роль гуру в фармакологии и фитнес-гуру, эти места давно заняты, а всего лишь желает выразить свою точку зрения и готов вступить в дискуссию. Статья адресована широкому кругу лиц, практикующим употребление гормональных препаратов с целью улучшить результаты от занятий бодибилдингом, но не имеющим соревновательных амбиций. Поскольку статья большая по объему, она будет выкладываться по частям, по мере написания.

Прежде чем приступить к обсуждению темы, выведенной в заголовок статьи, давайте потеоретизируем о понятиях, то есть о смысле, который мы придаем конкретным словам и выражениям, используемым при разговоре о стероидах. «Стероиды работают и не работают». Что значит «работают»? Это значит – действуют, соответственно «не работают» – значит, не действуют. Все просто? Не совсем! Например, работает ли оксандролон в дозировке 20 мг в день? Однозначно нет, скажете вы, это же легкий стероид, да еще и в такой детской дозе! А я вот не соглашусь… Аргументы? Пожалуйста!

Аргумент № 1
Этой ежедневной дозы оксандролона хватает многим представителям прекрасной половины человечества, чтобы выигрывать соревнования по бодибилдингу и бодифитнесу при любом уровне подготовленности и фармакологическом стаже.

Аргумент № 2
Этой ежедневной дозы оксандролона хватает многим спортсменам, чтобы стать чемпионом Европы по легкой атлетике (спринт, бег с препятствиями, метание копья (информация получена из первых рук)).

Аргумент № 3
Этой дозы оксандролона хватило 32-м здоровым мужчинам зрелого возраста (60–87 лет), не занимающимся спортом, чтобы за 12 недель непрерывного приема набрать в среднем по 3 кг мышечной массы и потерять 1,9 кг жира («Журнал прикладной физиологии», 1 марта 2004 года, том 96).

Предвкушаю контраргументы: «Ну, женщины – это не мужчины, им много не надо, у легкоатлетов другие цели, нежели у бодибилдеров, а у старых пердунов нет своего тестостерона, потому на них любые дозы экзогенного теста (и его производных) оказывают положительный эффект». И это правда, крыть нечем! Однако я все это написал лишь для того, чтобы продемонстрировать, что понятие «не работает» не абсолютное, а относительное. Не работает в отношении Васи, но работает в отношении Любы и Михаила Кузьмича, и уверяю вас, найдется не один Петя, который набрал десяток-другой килограмм мышечной массы, практикуя курсы ААС, в которых, кроме 20 мг/день оксандролона, ничего не было. Можно провести дальнейшие аналогии в отношении применяемых «соло» других препаратов – примоболан инъекционный, параболан в таблетках, станозолол инъекционный и оральный. Эти препараты действуют, и действуют эффективно даже при небольших дозировках… на легкоатлетов. Да, действие это выражается в основном в росте скорости и силы, но сравнивая порой мускулатуру гимнастов и многих парней из качалки, стандартный курс которых состоит из 500 мг сустанона и 200 мг нандролона в неделю, а также 30 мг метана ежедневно (заметьте, заурядные дозировки), начинаешь задумываться: парни, что то вы делаете не так…

Но почему так несправедливо: одни целенаправленно пашут в тренажерном зале и  используют «качковские» дозы массонаборных стероидов, но ничего не добиваются, другие же захаживают туда раз в неделю, проводя чисто вспомогательные тренировки, практикуют буквально терапевтические дозировки какого-нибудь легкого анаболика, а выглядят покруче многих качков. Да потому что первые тренируются по принципу «бери больше, кидай дальше», а у вторых четко организованный и тщательно спланированный тренировочный процесс. И теперь мы снова вернемся к тому, о чем было сказано выше: понятие «не работает» относительное! Добавим конкретики: легкий анаболический стероид не работает в отношении Васи, потому что Вася использует его в других условиях, нежели Петя. Еще конкретнее: Вася не создает условия, при которых легкий анаболик может проявить себя эффективно, либо наоборот, создает условия, препятствующие тому, чтобы последний заработал. А у Пети все зашибись, Петя никогда не сомневался, что все стероиды работают даже в небольших дозировках! Но только для каждого надо создать соответствующие условия. Если в Тульской области низкие урожаи ананасов, это не значит, что ананасы плохо растут, это значит, что ананасы плохо растут в Тульской области.

Важное дополнение: торговцы стероидов никогда не сколотят капитал на легкоатлетах, те когда хотят купить стероиды, берут флакон «станазы» 10 мл один на троих.

Продолжим дальше о понятиях… «Стероиды перестали работать». Исходя из предыдущей формулировки «работают – значит действуют», можно предположить, что «перестали работать» – значит перестали действовать. Что под этим понятием обычно подразумевают? Цитирую с форума: «За 6 недель приема метана я набрал 8 кг массы, жим лежа вырос на 20 кг, однако дальше вес встал, силовые тоже не растут уже несколько недель. Почему метан больше не действует, забились рецепторы или это привыкание к препарату? Что делать дальше, заменить метан на винстрол или поднять дозировку?» С этой ситуацией сталкивались все. Начав стероидный курс, мы какое-то время прогрессируем в массе и силе, потом прогресс замедляется и останавливается полностью. Дальше кто-то повышает дозировки, а кто-то меняет комбинацию препаратов, но как показывает практика, даже если после этого и появляется прогресс, то он несравним с началом курса, и в любом случае в ближайшее время все встанет мертвым колом независимо от того, применяли ли мы мощный тестостерона энантат или легкий примоболан. После этого, как правило, многие оканчивают курс, не видя дальнейшего смысла в его продолжении: стероиды больше не действуют, перестали работать. Я снова не соглашусь… Когда мы садимся в свой автомобиль, запускаем двигатель и начинаем движение по дороге, можно ли сказать, что наш автомобиль работает? Ну конечно же, он ведь выполняет свою основную функцию – движется! А когда мы, остановившись на красном сигнале светофора, выжимаем сцепление, переключаем коробку передач в нейтральное положение и стоим, удерживая ногу на педали тормоза, автомобиль работает? Он рычит звуком запущенного двигателя, выхлопная труба загрязняет атмосферу угарным газом и окисью азота, но при этом мы не едем, а стоим. Автомобиль в это время не выполняет своей прямой функции – двигаться дальше. Но разве можно сказать, что он не работает? Стоит только включить передачу и отпустить педаль тормоза, как движение начнется снова. Так же и в стероидном курсе. Мы встали, вес не растет, но набранный результат, выражающийся в мышечных объемах и силовых показателях, не падает, он держится на одном уровне, которого мы только что достигли – «двигатель заведен, но машина не едет». А если мы перестанем использовать стероиды, этот достигнутый уровень стремительно начнет снижаться, потому что теперь стероиды действительно не работают… Их больше нет, двигатель заглох. Пока стероиды есть в организме, мы находимся в форме, значит, они проявляют свое действие.

Отсюда вывод: стероиды работают всегда! Вечный курс вечно работает! Но работа эта выражается по-разному. Когда-то мы движемся вперед, а когда-то стоим на месте с заведенным двигателем, но стоит только включить передачу и отпустить педаль тормоза, как движение начнется снова. Проблема отсутствия движения чаще всего заключается в нас самих. Стремясь к быстрому и выраженному прогрессу, мы либо перегреваем двигатель и выводим его из строя, либо обладая навыками вождения на уровне «чайника», постоянно тормозим, не давая возможности заведенной машине ехать дальше.

Теперь, если объединить два вышесказанных вывода «Все стероиды работают, даже в небольших дозировках» и «Стероиды работают всегда», добавить к этому важные дополнения о том, что «для каждого стероида надо создать соответствующие условия», «проблема отсутствия движения чаще всего заключается в нас самих», то намечаются определенные принципы, на которых можно построить практические рекомендации по эффективному применению анаболических стероидов в минимальных дозировках. Понимаете, о чем я? Даю наводку. Метан – хороший анаболик? Учитывая, что миллионы людей достигли с помощью его одного огромных результатов в росте массы и силы, то, скорее всего, да. Вспомните свой первый курс на метане: резкий скачок в массе и силе, прибавка 5-6 кг веса тела в месяц и 15–20 кг к рабочим весам на штанге – это заурядные показатели. А если бы мы в течение этого месяца тренировались ежедневно по 3 часа, а питались несколькими бутербродами и тарелкой супа в день, достигли бы мы такого прогресса? Скорее всего, нет. Что уж там – гарантированно нет! Ибо мы создали условия, препятствующие тому, чтобы метан проявил себя как хороший рабочий анаболик. И теперь пусть задумаются те, кто на первом курсе метана спрогрессировал с гулькин нос, хотя использовал те же дозы, что и другие. Проблема отсутствия вашего прогресса не в том, что это «не ваш препарат» или «это был фейк», а в том, что вы не создали необходимых условий для его работы – оптимального режима тренировок и питания. Если развить мысль еще дальше, то можно заявить следующее: для разных стероидов и разных дозировок этих стероидов необходимы разные условия. Если тестостерон «прощает» многие погрешности в методике тренировок, то примоболан требует четкого плана, предусматривающего распределение нагрузок во времени. Оба препарата хорошо стабилизируют андрогенный рецептор, однако тестостерон обладает свойствами, которых нет у примоболана: выраженная антикатаболическая активность, негеномная активность, восстановление ЦНС, повышение синтеза ИГФ-1 и соматропина, увеличение запасов гликогена. На тестостероне намного легче добиться результата, ибо меньше приходится думать. Тестостерон обладает очень большой силой действия, но и эту силу многие умудряются свести на нет своим бестолковым подходом к тренировочному процессу и наплевательским отношением к нутрициональной поддержке организма, объясняя причину слабого «выхлопа» граммовых доз низкой чувствительностью к препаратам.

«А не все ли равно, на каких дозах мы достигаем прогресса?».

Побочные эффекты

Нет никакого смысла подробно рассказывать о побочных эффектах, которые возникают при приеме стероидов. О них известно каждому культуристу, независимо от факта использования последних. Парадоксально, что тот, кто еще не держал в руках ни одной таблетки или ампулы, знает о «побочках» больше, чем умудренный опытом «химик». Именно теоретики ревностно и эмоционально доказывают, что стероиды — это зло. Тем самым они оправдывают свой «натуральный» путь. Некоторые индивиды настолько отличились в приступах антистероидной истерии, что для них придумали специальный термин — «агрессивный натурал». Это страшные и опасные люди… особенно в Интернете. Практики же, несмотря на то, что испытали на своей шкуре треть из общеизвестных побочных эффектов, утверждают, что стероиды безопасны, причем это не просто оправдание, а порой истинная вера в это. Их логику понять несложно. Что такое здоровье? Многие ответят: «Это когда ничего не болит и не беспокоит». Однако это ничего многие понимают по-разному. Приведу пример, и снова с автомобилем. Когда-то давно был у меня ВАЗ 2105, у него плохо работал генератор — вырабатывал недостаточно энергии, аккумулятор плохо держал заряд и разряжался при нагрузке, стартер замыкал — при пуске «замыкал на себя». Зимним утром у меня было в распоряжении максимум три попытки запустить холодный двигатель. После третьей попытки аккумулятор разряжался до такой степени, что не мог заставить замыкающий сам себя стартер совершить вращательное движение. После этого я проклинал свою машину и матерился, но зная, что в этот момент ничего исправить не могу, выходил и пытался завести ее с «толкача». Благо это удавалось всегда. После того как машина заводилась, настроение поднималось, а негативные эмоции исчезали. Я, не включая магнитолу, ближний свет, обогрев заднего стекла, чтобы энергии, которую вырабатывает полуживой генератор, хватило на подзарядку такого же полуживого аккумулятора, начинал движение в нужном мне направлении. А когда двигатель прогревался, машина вообще заводилась без проблем, я больше не изрыгал проклятия и мат. И так каждый день. Автомобиль ездил, однако это не значит, что он был исправен. Я просто приспособился к нему и смирился с существованием неисправностей. Эксплуатация собственного организма «химиком» схожа с эксплуатацией подержанного ВАЗа, у которого 30% деталей неисправны, а он все равно на ходу. «Ну и что, что вся спина в прыщах и от давления «разрывается» голова, не смертельно, потом пройдет, и главное, что это не препятствует тренировкам, да и масса вроде «прет»». Многие, очень многие потребители стероидов воспринимают как должное возникающие побочные эффекты, смиряются с ними, приспосабливаются к ним и в итоге игнорируют их. Вот если бы ноги отнялись или зрение пропало — это да, это пора бить тревогу! А теперь вернемся к нашей теме «А НЕ ВСЕ ЛИ РАВНО, НА КАКИХ ДОЗАХ?..»

Еще в конце XVIII века английский медик Вильям Визеринг писал: «Яд в малых дозах — лучшее лекарство; полезное лекарство в слишком большой дозе — яд». Именно доза определяет сам факт появления побочных эффектов и их выраженность. С этим никто не поспорит. Чем больше доза стероида, тем больше шансов, что «побочки» дадут о себе знать не только на листе результатов анализов, но и в более понятных и осязаемых признаках: головная боль, акне, перепады настроения, падение либидо, гинекомастия. Для большинства 2000 мг тестостерона в неделю могут вызвать целый букет неприятностей, а выхлоп в плане роста массы и силы будет не больше, чем от 500-750. Есть и другая крайность — слишком малая доза. 50 мг тестостерона в неделю не вызовут никаких побочных эффектов, но и выхлоп с этого мизера никакой. Увеличим мизер в два-три раза и получим так называемую пороговую дозу, или минимально действующую, или терапевтическую, с которой лекарственное средство только начинает проявлять биологические эффекты. Терапевтическая доза нам, мужчинам в расцвете сил, мало подходит, так как рассчитана явно не на тех, кто перемалывает в зале тонны «железа», но это уже то, что хоть слабо, а работает при невысокой вероятности появления побочных эффектов. А вот если мы повысим дозу еще больше, то достигнем некого количества препарата, которое является по-настоящему «рабочим» и при этом вызывает относительно малое негативное воздействие на здоровье. Дальнейшее же повышение этого количества не приведет к значительному росту «рабочести», но приведет к увеличению выраженности побочных эффектов. Вспомните название статьи «Разумный минимализм…». Теперь понимаете, что я имел в виду? Не просто минимум, а разумный минимум. И вот еще такой момент. Те, кто после курса стероидов, основанного на общепринятых дозировках, говорит, что не набрал «с него» ничего, — ошибается. Он, как минимум, набрал букет из негативных для здоровья факторов. Часто встречается фраза: «С того курса я набрал только пару килограмм воды и прыщи на спине». «Побочки» живут своей жизнью, им плевать, растут ваши мышцы или нет, они появляются всегда тогда, когда тому способствует определенная доза употребляемого препарата.

Продолжим. И снова «А НЕ ВСЕ ЛИ РАВНО, НА КАКИХ ДОЗАХ МЫ ДОСТИГАЕМ ПРОГРЕССА?»

Не все равно! Ибо стероидный курс имеет свойство рано или поздно заканчиваться. В тот момент, когда мы прекращаем принимать препараты, происходит резкое падение уровня анаболических гормонов. Гормоны — это вам не витамины, это вещества, задачей которых является передача сигналов или, если хотите, приказов различным клеткам организма. Высокий уровень любых гормонов вызывает сильнейшие изменения в обмене веществ. Некоторые изменения мы можем наблюдать визуально во внешнем виде человека. Совсем не сложно поставить такие диагнозы, как гинекомастия, вирилизация, акромегалия, синдром Иценко-Кушинга. А уж внутри нас происходит настоящая метаболическая буря, высокий уровень хотя бы одного гормона изменяет деятельность многих систем организма и тот переходит в режим ненормального функционирования. И чем выше доза используемого на курсе препарата, тем сильнее эти изменения. Конечно, в Халка от стероидов вы не превратитесь, но у некоторых на курсе башню сносит основательно. А теперь представьте, что мощная гормональная подпитка прекратилась. Резкое падение уровня гормонов вызывает сильнейший метаболический стресс. «Выход» с курса подобен выходу из дома через окно. Чем больше была используемая доза на курсе, тем выше этаж вашего дома, из окна которого вы выходите. Очевидно, что падение будет болезненным в любом случае. Однако, прыгнув из окна первого этажа, вы быстренько отряхнетесь и пойдете дальше, а вот приземлившись с высоты этажа так пятого, вы еще не скоро встанете на ноги… Чувствуете разницу? Замечу, что некоторые побочные эффекты начинают проявлять себя именно после курса — акне, например…

Любой стресс губительным образом сказывается на мышечной массе: чем больше стресс, тем больше мышечный катаболизм. Такова физиология. Значительное уменьшение уровня гормонов, вызванное окончанием курса, это и есть стресс. Падение тестостерона с 2000 мг в неделю до нуля — больший стресс, чем с 350 мг до нуля, а значит и бо́льшая скорость «отката» — послекурсового катаболизма. Хорошо жить на первом этаже… Теперь заметьте, что я сказал скорость, а не степень. Мало кому удается сохранить все набранное на курсе, рано или поздно многие из нас вернутся в докурсовые кондиции. Но одни потеряют все за 6 недель, а другие — за 6 месяцев. Величина используемых дозировок здесь — это одна из причин такой большой разницы во времени. Позвольте процитировать самого себя абзацем из другой статьи: «К сожалению, повышенный уровень кортизола после отмены ААС — это не единственная причина обвала результатов. Надо реально осознавать, что уровень анаболизма при приеме гормонов извне на порядок выше того, что нам могут дать свои собственные гормоны, вырабатываемые организмом. Если мы набрали 6 кг массы и 20 кг силы в основных базовых движениях за один курс, при этом принимая в совокупности 1500 мг андрогенов в неделю, то разве можно удержать все набранное только лишь натуральной секрецией тестостерона, равной жалким 35-50 мг в неделю? Разве можно с естественным уровнем тестостерона, который в тридцать раз меньше того, что мы имеем на курсе, также успешно восстанавливаться после 12 подходов на грудь за семидневный промежуток времени? Думаю, ответ очевиден». Исходя из тематики настоящей статьи, дополню вышеуказанную цитату следующим: тяжело удержать результаты, набранные с помощью 1500 мг андрогенов в неделю, но если те же результаты будут достигнуты с помощью 350 мг, то сохранить набранное будет проще. Точно так же, как проще жить, когда твою зарплату, равную тридцати тысячам рублям, урезали до десяти, чем если бы ее сократили до той же суммы со ста пятидесяти — при таком доходе привыкаешь жить на широкую ногу: хочешь — пирожное, хочешь — мороженое!..А потом -у разбитого корыта…

Подытожим:
От величины дозы зависит вероятность проявления побочных эффектов и их выраженность;
От величины дозы зависит эффективность послекурсовой терапии — восстановления нормального функционирования организма и сохранение набранных результатов.

А ведь это только начало… 

Похожее

Оксандролон — обзор | Темы ScienceDirect

Возраст

В некоторых медицинских ситуациях предельная польза от «анаболических» андрогенов может перевешивать их риски. Необходимость лечения опасных для жизни эпизодов тяжелой наследственной ангиомы у детей может, например, оправдать использование оксандролона или других анаболических препаратов, но требуемые дозы могут вызвать заметную вирилизацию [91]. У детей, которые могут случайно подвергнуться воздействию андрогенов или анаболических стероидов или при неосмотрительной терапии (например, для улучшения аппетита), существует особый риск вирилизации, преждевременного полового развития и раннего закрытия эпифизов.Сообщалось даже о вирилизации после местного применения андрогенов [92].

Изучалось долгосрочное применение оксандролона у детей с очень тяжелыми ожогами (покрывающими 40% или более поверхности тела). В контролируемых условиях 84 ребенка (56 девочек и 28 мальчиков; средний возраст 8 лет) получали лечение в течение 1 года плацебо или пероральным оксандролоном 0,1 мг / кг 2 раза в день [93]. При выписке (95% выздоровление) и через 6, 9 и 12 месяцев после ожога оксандролон улучшил безжировую массу тела, содержание минералов в костях и минеральную плотность костной ткани по сравнению с плацебо, и не было отрицательного воздействия на печеночные трансаминазы.Последнее открытие и отсутствие других побочных эффектов предполагает, что такое лечение очень сильно обгоревших детей оправданно.

Интерес к применению андрогенов у пожилых мужчин сохраняется, с одной стороны, давняя надежда на восстановление потенции и либидо, а с другой стороны, уверенность в том, что сердечно-сосудистые перспективы могут быть улучшены. Неопределенности, существующие в этом последнем отношении, были подробно рассмотрены в статье, заслуживающей прочтения полностью; это лучше всего резюмируется в собственном заключении автора, что «… в целом, андрогены могут предотвратить заболевание артерий так же вероятно, как и вызвать его…» [94].

Использование оксандролона было повторно изучено в проспективном сравнительном исследовании у 61 ребенка с ожогами 40% общей площади тела [95]. Они были рандомизированы для приема перорального оксандролона 0,1 мг / кг два раза в день (n = 30) или плацебо (n = 31) в течение 12 месяцев после травмы. Оксандролон значительно улучшил безжировую массу тела, содержание минералов в костях и мышечную силу. Сывороточный IGF-1, захват Т3 и индекс свободного тироксина были значительно увеличены оксандролоном. Во время и после окончания лечения наблюдалось значительное увеличение роста и веса.Для окончательной оценки требуется более широкий взгляд на эти проблемы от экспертов по ожогам. К выводу о влиянии на рост следует относиться с некоторой осторожностью, поскольку андрогены могут привести к раннему закрытию эпифизов. Однако главный вопрос должен заключаться в том, ускорилось ли восстановление или стало более полным.

Введение станозолола в сочетании с физическими упражнениями приводит к снижению активности теломеразы, возможно, связанной со старением печени

Int J Mol Med. 2018 июл; 42 (1): 405–413.

, # 1, * , # 1, * , 2 , 3 , 3 , 4 , 3 , 3 , 5 , 3 и 1

Эрен Озкагли

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета

Мехтап Кара

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета

Тугба Котил

2 Кафедра гистологии и эмбриологии медицинского факультета Стамбульского университета, Стамбул 34116, Турция

Персефони Фрагкиадаки

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Манолис Н.Цацаракис

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Кристина Цицимпику

4 Государственная химическая лаборатория Греции, 11521 Афины

Polychronis D. Stivaktakis

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Димитриос Цукалас

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Деметриос А.Спандидос

5 Лаборатория клинической вирусологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион, Греция

Аристидес М. Цацакис

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Букет Альпертунга

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета и

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета и

2 Кафедра гистологии и эмбриологии медицинского факультета Стамбульского университета, Стамбул 34116, Турция

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии, Медицинский факультет, Университет Крита, 71003 Ираклион

4 Общая химическая государственная лаборатория Греции, 11521 Афины

5 Лаборатория клинической вирусологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион, Греция

# Внесен равный вклад.

Для корреспонденции: профессору Букету Альпертунга, кафедра фармацевтической токсикологии, фармацевтический факультет, Стамбульский университет, Беязит, Стамбул 34116, Турция, электронная почта: [email protected]Профессору Аристидесу М. Цацакису, Лаборатория судебной медицины и токсикологии, Медицинская школа, Университет Крита, ПО Box 1393, 71003 Heraklion, Greece, E-mail: [email protected]

* Внесено поровну

Получено 28 февраля 2018 г .; Принято 11 апреля 2018 г.

Эту статью цитировали в других статьях в PMC.
Заявление о доступности данных

Наборы данных, использованные и / или проанализированные в ходе текущего исследования, доступны у соответствующего автора по разумному запросу.

Реферат

Анаболические вещества — это допинговые вещества, которые обычно используются в спорте. Станозолол, 17α-алкилированное производное тестостерона, широко используется спортсменами и бодибилдерами. Некоторые медицинские и поведенческие побочные эффекты связаны со злоупотреблением анаболическими андрогенными стероидами (ААС), в то время как печень остается наиболее узнаваемым органом-мишенью.В настоящем исследовании изучалось влияние на печень введения станозолола крысам в высоких дозах, напоминающих дозы, применяемые для допинга, в присутствии или отсутствии упражнений. Станозолол и его метаболиты, 16-β-гидроксистанозолол и 3′-гидроксистанозолол, были обнаружены в печени крыс с помощью жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Активность теломеразы, которая участвует в клеточном старении и онкогенезе, была обнаружена путем исследования уровней экспрессии обратной транскриптазы теломеразы (TERT) и фосфатазы и гомолога тензина (PTEN) в печени крыс, получавших станозолол.Станозолол индуцировал теломеразную активность на молекулярном уровне в ткани печени крыс, и упражнения обращали эту индукцию, отражая возможное преждевременное старение ткани печени. На экспрессию гена PTEN в печени крыс практически не влияли ни упражнения, ни введение станозолола.

Ключевые слова: станозолол, фосфатаза и гомолог тензина, теломеразная обратная транскриптаза, теломеразная активность, 16-β-гидроксистанозолол, 3′-гидроксистанозолол

Введение

Станозолол является анаболическим анаболическим анаболиком, повышающим эффективность (AAS).Среди всех ААС станозолол является одним из наиболее часто используемых стероидов профессиональными спортсменами и молодыми людьми для улучшения внешнего вида и работоспособности. Станозолол представляет собой 17α-алкилированное производное тестостерона с анаболическими и высокими андрогенными свойствами (1,2), и его использование в спорте запрещено Всемирным антидопинговым агентством (WADA) (3).

В прошлом ААС использовались только элитными спортсменами и бодибилдерами для целей допинга. Однако в настоящее время даже молодые люди злоупотребляют ААС в супрафизиологических дозах для улучшения внешнего вида (4,5).Сообщается, что станозолол является одним из наиболее часто используемых ААС (6), и он отвечает за несколько медицинских и поведенческих побочных эффектов, являясь признанным фактором риска заболеваний печени как у экспериментальных животных, так и у людей (7-13). . Станозолол широко биотрансформируется ферментативными путями в печени. Сообщалось, что основными метаболитами станозолола являются 3′-гидроксистанозолол, 4-β-гидроксистанозолол и 16-β-гидроксистанозолол (14,15). В целом, ААС проявляют свои эффекты посредством нескольких различных механизмов, таких как модуляция экспрессии рецепторов андрогенов (16).Побочные эффекты, связанные с печенью, чаще связаны с 17α-алкильными производными ААС и, как сообщается, не связаны с путем введения. Однако точные механизмы еще полностью не изучены (17).

Теломеры представляют собой гетерохроматиновые нуклеопротеидные комплексы на концах хромосом, участвующие в ряде основных биологических функций (). Известно, что теломеры играют ключевую роль в формировании и прогрессировании до 90% злокачественных новообразований. Теломеразная активность играет ключевую роль в клеточном старении и онкогенезе (18).Повышенная активность теломеразы обнаруживается в большинстве случаев рака человека (19). Теломераза — это рибонуклеопротеин, отвечающий за поддержание длины теломер. Ядро теломеразы состоит из двух компонентов: каталитической обратной транскриптазы теломеразы (TERT) и компонента теломеразной РНК (TERC) ().

Теломеры — это защитные колпачки хромосом (59) (адаптировано с разрешения Shutterstock).

Теломераза добавляет теломерные повторы (TTAGGG) к 3′-гидроксильному концу ведущей цепи теломеры.Компонент РНК служит шаблоном для добавления нуклеотидов. Это теломеразный комплекс, который состоит из компонента обратной транскриптазы (TERT), компонента РНК (TERC), белка дискерина и других связанных белков (NHP2, NOP10 и GAR1).

Уровень экспрессии мРНК TERT был изучен в качестве биомаркера, поскольку было продемонстрировано, что он является лимитирующим детерминантом активности теломеразы при различных злокачественных новообразованиях (20). Ген фосфатазы и белка-гомолога тензина (PTEN) кодирует белок-супрессор опухоли с фосфатазной активностью.Сообщается, что частота гетерозиготности PTEN при гепатоцеллюлярной карциноме человека (ГЦК) человека снижается до 33% (21). PTEN участвует в подавлении активности теломеразы посредством регуляции активности TERT (22). PTEN является белком-негативным регулятором сигнального пути фосфоинозитид-3-киназы / AKT механизма регуляции выживания клеток и индуцирует клеточный апоптоз (23). PTEN предотвращает активацию AKT посредством дефосфорилирования фосфатидилинозитол (3,4,5) -трисфосфата (PIP3) до фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфата (PIP2).Подавление PTEN связано с онкогенной активностью в клетке (24).

Целью этого исследования было изучить, по крайней мере, насколько нам известно, роль теломеразы в вызванной станозололом гепатотоксичности путем изучения корреляции между активностью теломеразы и уровнями экспрессии гена PTEN-TERT. Также исследовали биоаккумуляцию станозолола и двух его основных метаболитов (3′-гидроксистанозолол и 16-β-гидроксистанозолол) в ткани печени, а также его связь с активностью теломеразы.

Материалы и методы

Эксперименты на животных

Всего было получено 34 крысы-самца Sprague-Dawley в возрасте 8 недель и помещено в помещения для лабораторных животных Департамента лабораторных наук о животных Института экспериментальной медицины Стамбульского университета. (Стамбул, Турция) в соответствии с Комитетом по этике экспериментов на животных Стамбульского университета, HADYEK (номер утверждения 2013/100). Крысы были разделены на 5 групп следующим образом: i) контрольная (C) группа; ii) группу обработки пропилена (PG); iii) группу обработки станозололом (ST); iv) группа лечения и упражнений с пропиленом (PGE); и v) группа лечения станозололом и физических упражнений (STE).Животных размещали по 4 животных в одной металлической клетке и содержали в 12-часовом цикле темнота / свет при температуре 20–23 ° C. Количество крыс в экспериментальной группе, уход за крысами, обращение и используемые экспериментальные процедуры соответствовали руководящим принципам HADYEK. Вес крыс при покупке регистрировали и использовали для корректировки дозы (). Гуманными конечными точками, определенными в нашем исследовании, были боль, дистресс, неправильная осанка и судороги в соответствии с Руководящим документом ОЭСР (25). Ни у одного животного не было клинических признаков гуманных конечных точек, которые оправдывали бы их жертвоприношение до окончания эксперимента.Экспериментальный план исследования представлен в.

Таблица I

Вес крыс при покупке.

95 2700 95 2700 95 27 4 264
Количество крыс Вес крыс при покупке (г)
Контроль
1 259
2 268
268
268
4 264
5 282
Пропиленгликоль
1 255
2 276
276
261
5 272
Пропиленгликоль и упражнения
1 262
2 276
3
5 278
6 263 902 00
7 260
8 277
Стероидная группа
1 280
2 265
4 272
5 277
6 272
7 263
8 290
275
2 277
3 290
4 263
5 280
28 7
8 273

Таблица II

Experi мысленный дизайн исследования.

Группы Количество крыс Подкожные инъекции Упражнения
Контроль 5 Без инъекций Без упражнений
Обработка пропиленгликолем 5203 мл / кг пропиленгликоля в день Без упражнений
Лечение станозололом 8 5 мг / кг станозолола в день Без упражнений
Лечение пропиленгликолем и упражнения 8 1 мл / кг пропиленгликоля в день Плавание: 20 мин / день, 5 дней в неделю
Лечение станозололом и упражнения 8 5 мг / кг станозолола в день Плавание: 20 мин / день, 5 дней / неделя

Плавание было выбрано в качестве модели упражнения (26,27) и началось за 1 неделю до схемы лечения, чтобы мальчики адаптироваться.Крыс плавали в прямоугольном полиэтиленовом резервуаре (длина 120 см × глубина 50 см × ширина 43 см), наполненном водой при температуре 29 ± 1 ° C. Во время экспериментов в течение 20 минут в день, 5 дней в неделю крыс подвергали плаванию после периода адаптации в течение 1 недели. Животных адаптировали к процессу плаванием в воде в течение 5 минут в течение первых 2 дней, а затем время плавания постепенно увеличивали до 5 минут в день до конечной продолжительности 20 минут на 5 день.

Пропиленгликоль (PG ) (Tekkim, Стамбул, Турция) использовался в качестве носителя для станозолола (Sigma, Schnelldorf, Германия).Известно, что PG является хорошим проводником для экспериментальных исследований in vivo (28,29). Однако сообщалось, что высокие концентрации PG могут вызывать повреждение ДНК в эукариотических клетках и ооцитах мышей (30,31). Подкожное введение было выбрано, а дозы были выбраны в соответствии с предыдущими исследованиями (32–34). Группы, подвергшиеся воздействию, получали однократную дозу PG (1 мл / кг) и ST (5 мл / кг) подкожно в течение 5 дней в неделю.

После 28 дней лечения животным была проведена легкая анестезия с использованием процента 1.9% диэтиловый эфир в анестезиологической камере и эвтаназия путем шейного вывиха, проводимая обученным персоналом. Были собраны образцы ткани печени и разделены на 2 секции. Один срез немедленно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C, а другой фиксировали 10% забуференным формалином и залитым парафином для гистохимического анализа.

Анализ жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС)

Стандарты станозолола, 3′-гидроксистанозолола и 16-β-гидроксистанозолола в концентрациях 0,0.1, 0,25, 0,5 и 1 частей на миллион были приготовлены из стандартных исходных растворов 20 частей на миллион. Туринабол (LGC, Лидс, Великобритания) использовали в качестве внутреннего стандарта (IS) с целевыми ионами m / z 317,25 и m / z 335,25. Калибровочные кривые были получены путем измерения отношения площадей пиков целевых ионов к IS следующим образом: для станозолола m / z 370,4 , 352,3 и 329,35, для 3′-гидроксистанозолола m / z 386,4 , 345,35, для 16-β- гидроксистанозолол m / z 386,4 , 366,3 и 345,35 для IS туринабол () (ион m / z, используемый для количественной оценки, выделен жирным шрифтом).Образцы печени необработанных животных, которые дали отрицательные результаты (

Таблица III

Параметры анализа ЖХ-МС.

4 4 4 9
Агент Rt m / z target m / z m / z Mw
4α-гидроксистанозолол 386 345,35
4β-гидроксистанозолол 9,3 386,4 345,35
3-гидроксистанозол5 10200
16-β-гидроксистанозолол 10,45 386,4 366,3 345,35 344,49
Станозолол 12.95 370,4 352,3 329,35 328,49
Туринабол (IS) 13,9 317,25 335,25 334,9
механическая гомогенизация на высокой скорости в течение 2 мин с 1,0 мл воды. Гомогенаты сильно встряхивали, а затем инкубировали в ультразвуковой бане в течение 10 мин. Затем добавляли 1,5 мл этилацетата и проводили экстракцию аналитов в течение 10 мин.Образцы центрифугировали при 1820 × g в течение 2 мин при 4 ° C. Супернатанты переносили в пустую пробирку и упаривали досуха в атмосфере азота при 30 ° C. После выпаривания добавляли 100 мкл л ацетонитрила и сильно встряхивали. Супернатанты переносили во флаконы, и 10 мкл мкл из них вводили в систему ЖХ-МС для анализа.

Система ЖХ-МС состоит из бинарного насоса ЖХ (Shimadzu Prominence, Киото, Япония), вакуумного дегазатора, автоматического пробоотборника и термостата для колонок.В качестве подвижной фазы был выбран градиент 0,1% муравьиной кислоты в воде (растворитель A) и ацетонитриле (растворитель B). Разделение аналитов было достигнуто на колонке для ВЭЖХ Discovery C18 (250 × 4,6 мм, 5 мкм, м), термостатированной при 30 ° C. Масс-спектрометр (LCMS-2010 EV; Shimadzu Prominence) в сочетании с интерфейсом химической ионизации при атмосферном давлении (APCI) и одиночным квадрупольным масс-фильтром использовался в выбранном положительном режиме ионного мониторинга (SIM). Температура интерфейса, CDL и теплового блока составляла 400, 200 и 200 ° C соответственно.Напряжение детектора составляло 1,5 кВ, поток распыляющего газа составлял 2,5 л / мин, а осушающий газ составлял 0,02 МПа.

Анализ активности теломеразы

Определение активности теломеразы в образцах ткани печени крысы выполняли количественно с использованием набора teloTAGGG telomerase PCR ELISA PLUS (Roche Diagnostic GmbH, Mannheim, Germany). Протокол набора следовал для оценки активности теломеразы, как описано ранее (35,36).

Оценка экспрессии гена

Выделение РНК

проводили из залитых парафином срезов ткани печени крысы с использованием выделения РНК High Pure FFPET (Roche Diagnostic GmbH) в соответствии с инструкциями производителя.Для синтеза кДНК использовали фиксированное количество РНК из каждого образца. кДНК получали с использованием набора Transcriptor First Strand cDNA Synthesis (Roche Diagnostic GmbH) в соответствии с инструкциями производителя. Уровни экспрессии генов TERT и PTEN анализировали с помощью количественной (в реальном времени) полимеразной цепной реакции (кПЦР) с использованием аппарата Light Cycler 480 (Roche Diagnostic GmbH) с анализом каталога Real Time Ready (Roche Diagnostic GmbH) в соответствии с инструкциями производителя. Последовательности праймеров были следующими: PTEN прямой, 5′-AGAACAAGATGCTCAAAAAGGACAA-3 ‘и обратный, 5′-TGTCAGGGTGAGCACAAGAT-3′; TERT вперед, 5’-GACATGGAGAACAAGCTGTTTGC-3 ‘; и наоборот, 5’-ACAGGGAAGTTCACCACTGTC-3 ‘; и GAPDH прямой, 5’-TTCAACGGCACAGTCAAGG-3 ‘и обратный, 5′-CTCAGCACCAGCATCACC-3’.ПЦР-амплификации выполняли в соответствии с инструкциями производителя в трех экземплярах. Реакционную смесь без матрицы кДНК использовали в качестве отрицательного контроля. Уровни экспрессии (2 -ΔΔCt ) рассчитывали, как описано ранее (37,38).

Иммуногистохимический (ИГХ) анализ

ИГХ-анализы были выполнены с использованием наборов для определения Ultra Streptavidin HRP [BioLegend Sig-32248, набор для определения Ultra Streptavidin HRP (Multi-Specification, DAB)] и BioLegend Sig-32250, набор для определения Ultra Streptavidin HRP. (Multi-views, AEC) (BioLegend, San Diego, CA, USA) для уровней экспрессии PTEN и TERT соответственно.Залитые парафином срезы помещали на предметные стекла Superfrost (Menzel-Gläser, Брауншвейг, Германия). После сушки в течение ночи был проведен IHC-анализ PTEN и TERT с использованием метода меченой стрептавидин-биотин-пероксидазы. Слайды обрабатывали ксилолом и регидратировали в растворах этанола возрастающих классов. Извлечение антигена осуществляли путем кипячения предметных стекол в течение 5 мин / 3 раза в цитратном буфере (0,01 М). Для подавления активности эндогенной пероксидазы срезы ткани обрабатывали блокирующим реагентом 1 в течение 15 минут и промывали PBS.Все срезы инкубировали с блокирующим реагентом 2 в течение 5 минут при комнатной температуре, чтобы избежать неспецифического связывания. Инкубации поликлональных антител PTEN (251264) и TERT (250509) (оба от Abbiotec, Aachen, Germany) проводили в течение ночи при 4 ° C с разведениями 1/100. Слайды инкубировали со связывающим реагентом 4, а затем с реагентом для маркировки 5 в течение 20 минут при комнатной температуре. Слайды визуализировали хромогенами DAB и AEC, контрастировали гематоксилином Майера и, наконец, монтировали.Уровни экспрессии PTEN и TERT оценивали под световым микроскопом (Olympus BX40F4; Olympus, Токио, Япония). Анализы TERT и PTEN IHC были классифицированы невооруженным глазом на 4 категории на основе интенсивности окрашивания следующим образом: 0, нет окрашивания; +, слабое окрашивание; ++, умеренное окрашивание; и +++, сильное окрашивание). Анализ проводился с использованием считывающего устройства для одного слайда для минимизации вариабельности из-за субъективной оценки.

Статистический анализ

Средние значения ± стандартное отклонение и медиана были использованы для экспрессии уровней станозолола и его метаболитов, а также для PTEN, TERT и относительной теломеразной активности в процентах.Изменения между двумя значениями были выражены в виде относительных изменений в процентах или иным образом на основе следующей формулы: (фактическое изменение / контрольное значение) * 100%.

Тест Колмогорова-Смирнова с поправкой Лилиэфорса применялся для проверки нормальности непрерывных переменных. R Спирмена применяли для измерения двумерных корреляций между двумя непрерывными переменными (например, относительная активность теломеразы в процентах по сравнению с уровнями экспрессии гена 3′-гидроксистанозолола TERT). Непараметрический тест Краскела-Уоллиса и параметрический односторонний дисперсионный анализ ANOVA применялись для сравнения различий в уровнях станозолола и его метаболитов между исследуемыми группами (контрольная, станозолол, PG и группы упражнений).Непараметрические апостериорные сравнения оценивали с использованием тестов Данна (непараметрические) и HSD Тьюки для параметрических тестов. Для статистического анализа использовалось программное обеспечение IBM SPSS Statistics 21.0 (IBM Corp., Армонк, Нью-Йорк, США). Уровень 0,05 был установлен для принятия или отклонения нулевой гипотезы (статистическая значимость). Размеры выборок для отдельных анализов незначительно различались из-за того, что некоторые недостающие значения возникли из-за условий эксперимента.

Результаты

Тесты на нормальность

Тесты на нормальность показали, что только процентная относительная активность теломеразы сохранила нулевую гипотезу, предполагая нормальное распределение данных (P = 0.137). Все другие протестированные непрерывные переменные, такие как TERT, PTEN и 3′-гидроксистанозолол, не следовали нормальному распределению (P <0,01) (данные не показаны).

Биоаккумуляция станозолола и его метаболитов в тканях печени

Результаты обобщены в. Уровни станозолола и его метаболитов были незначительно выше в группе STE по сравнению с группой ST (P> 0,05).

Таблица IV

Уровни концентрации (нг / мг) станозолола и его метаболитов в группах станозолола (ST) и станозолола в сочетании с упражнениями (STE).

Агент Группа ST (среднее значение ± стандартное отклонение) Группа ST (среднее значение ± стандартное отклонение) Манна-Уитни (значение P) % относительное изменение
Станозолол (нг / мг ) 2,98 ± 1,01 3,89 ± 1,09 0,240 30,5
3′-гидроксистанозолол (нг / мг) 0,34 ± 0,06 0,44 ± 0,18 0,485 29,419 29,4 16-β-гидроксистанозолол (нг / мг) 0.25 ± 0,11 0,32 ± 0,15 0,485 28,0

Оценка активности теломеразы и экспрессии генов

Уровни экспрессии генов PTEN и TERT и относительная относительная активность теломеразы в исследуемых группах представлены в. Значительная разница наблюдалась для экспрессии гена TERT в различных группах (χ 2 = 17,585, df = 4, P <0,001). Основываясь на тесте Данна, упражнения снижали экспрессию TERT на (71,0%; P = 0,001), а введение ST увеличивало экспрессию TERT на (160%; P <0.001) по сравнению с группой PG. Следует отметить, что вызванное станозололом увеличение экспрессии TERT по сравнению с группой станозолола было ограничено (68,0%; P = 0,042) у животных, подвергшихся физической нагрузке. Аналогичная картина наблюдалась и для процентной активности теломеразы. На экспрессию гена PTEN практически не влияли ни упражнения, ни прием станозолола. Следует отметить, что не все значения, представленные выше, показаны в из-за большого количества попарных сравнений.

Таблица V

Уровни экспрессии генов PTEN и TERT (2 -ΔΔCt ) и% относительной активности теломеразы на группу.

9020
Параметры Группы N Среднее SD Сравнение групп
Экспрессия гена PTEN (2 −ΔΔCt ) 5 Контроль Kruskal-Wallis
Обработка пропиленгликолем 5 0,37 0,25 χ 2 = 3,643,
Обработка станозололом 6 0.40 0,42 df = 4, P = 0,456
Лечение пропиленгликолем и упражнения 5 0,98 1,62
Станозолол лечение и упражнения 6
Экспрессия гена TERT (2 −ΔΔCt ) Контроль 5 0,40 0,41 Краскал-Уоллис
Обработка пропиленгликолем 2 78 2,66 χ 2 = 17,585,
Обработка станозололом 6 7,25 1,40 df = 4, P = 0,001
Обработка пропиленгликолем и упражнения 5 0,81 0,96
Лечение станозололом и упражнения 6 2,29 0,97
% относительной активности теломеразы Контроль 5 .30 0,58 ANOVA:
Обработка пропиленгликолем 5 1,92 0,96 F = 3,015, df = 4,
Обработка станозололом 6 6 P = 0,040
Лечение пропиленгликолем и упражнения 5 0,76 0,61
Лечение станозололом и упражнения 6 1.33 0,96

Умеренная корреляция между процентной относительной активностью теломеразы и уровнями экспрессии гена TERT наблюдалась с использованием коэффициента корреляции Спирмена (r = 0,424, P = 0,028) (). Уровни 3′-гидроксистанозолола, измеренные в группах ST и STE, имели тенденцию отрицательно коррелировать с относительной процентной активностью теломеразы (r Спирмена r = -0,566, P = 0,055) (). Не наблюдалось корреляции между какими-либо параметрами, отслеживаемыми с помощью станозолола и 16-β-гидроксистанозолола (данные не показаны).

Диаграмма разброса экспрессии гена TERT и относительной активности теломеразы в процентах. TERT, обратная транскриптаза теломеразы.

Диаграмма рассеяния 3′-гидроксистанозолола и относительная активность теломеразы в процентах.

Анализы ИГХ

Изображения окрашивания ИГХ показаны в, а результаты суммированы в. Уровни экспрессии гена PTEN наблюдались вокруг центральной вены и паренхимы. В группе STE окрашивание гепатоцитов, окружающих эти области, было умеренным.Анализ TERT IHC выявил сильное окрашивание в группе ST вокруг портального поля, центральной вены и паренхимы, в то время как упражнения ослабляли увеличение экспрессии гена TERT (умеренное окрашивание в группе STE). Таким образом, наши результаты показали, что упражнения оказывают положительное влияние на экспрессию гена PTEN, как показано на рис.

Иммуногистохимическое окрашивание белков PTEN и TERT во всех экспериментальных группах (шкала, 50 мкм мкм). Группы крыс были следующими: i) контрольная (C) группа; ii) группу обработки пропилена (PG); iii) группу обработки станозололом (ST); iv) группа лечения и упражнений с пропиленом (PGE); и v) группа лечения станозололом и физических упражнений (STE).PTEN, белок-гомолог фосфатазы и тензина, TERT, обратная транскриптаза теломеразы.

Таблица VI

Результаты подсчета для иммуногистохимических анализов PTEN и TERT.

Обработка пропиленгликоль
Группы Оценка PTEN IHC a Оценка TERT IHC a
Контроль + +
+ ++ ++
Лечение станозололом + +++
Лечение пропиленгликолем и упражнения + +
Лечение станозололом и упражнения ++ Обсуждение

Станозолол — широко используемый и наиболее мощный ААС, ответственный за ряд побочных эффектов, включая сердечно-сосудистые, репродуктивные, поведенческие эффекты и гепатотоксичность (17).Насколько нам известно, это первое исследование, посвященное изучению вызванных станозололом молекулярных путей активности теломеразы в печени крыс и любых соответствующих эффектов физических упражнений. Станозолол вызывает внутрипеченочные структурные изменения с холестазом и увеличивает риск ГЦК (37). Кроме того, было обнаружено, что злоупотребление ААС в целом является причиной гепатоцеллюлярных аденом (12,39). Несмотря на то, что механизмы, ответственные за вызванную станозололом гепатотоксичность, еще четко не идентифицированы, пролиферативные эффекты на клетки печени могут играть центральную роль в наблюдаемой гепатотоксичности (12,40,41).В нашем предыдущем исследовании мы продемонстрировали, что станозолол оказывает повреждающее действие на ДНК в лимфоцитах периферической крови, что, вероятно, связано с изменениями активности теломеразы (35). Хотя известно, что различные факторы окружающей среды повышают и понижают активность теломеразы, влияние физических упражнений на активность теломеразы еще не было четко идентифицировано (42). Было показано, что на длину теломер и активность теломеразы влияет несколько факторов, включая окислительный стресс, психологический стресс и социально-экономический статус.Одним из возможных механизмов укорочения теломер является окислительный стресс из-за продуктов окисления оснований ДНК (8-OHdG) в гуаниновых или белковых аддуктах (43,44). Согласно недавним исследованиям, повышенная активность теломеразы обнаруживается почти в 90% случаев рака человека и в 80% случаев ГЦК. Кроме того, хорошо задокументировано, что большинство здоровых клеток не проявляют активности теломеразы (19,20,45). Результаты этого исследования продемонстрировали повышенные уровни относительной активности теломеразы в тканях печени в группе ST, в соответствии с нандролоном, другим хорошо известным ASS, который продемонстрировал аналогичные эффекты за счет увеличения активности теломеразы в зависимости от дозы как при ткань сердца и моноциты периферической крови (2,46).Это может представлять собой компенсирующий механизм восстановления на тканевом уровне, в то время как повышенные уровни циркулирующей активности теломеразы могут указывать на системное воспаление. Связь повышенной активности и экспрессии теломеразы с пролиферативными эффектами в этом исследовании вряд ли возникла из-за короткого времени воздействия (28 дней). В целом механизмы, лежащие в основе влияния ААС на активность теломеразы, не выяснены и остаются практически неизвестными.

TERT представляет собой каталитическую субъединицу теломеразы, которая играет роль в ее регуляции на уровне транскрипции.Сообщалось, что мутации TERT связаны с переходом от аденомы к карциноме в печени (47). Следовательно, изменения в регуляции и экспрессии TERT играют важную роль при ГЦК (48). Было показано, что ген-супрессор опухолей PTEN отрицательно коррелирует с белком TERT человека в тканях HCC (21). Следовательно, PTEN и TERT играют противоположные роли в канцерогенезе. Сообщалось, что PTEN косвенно регулирует активность TERT через путь PI3K-PKB / Akt при ГЦК человека (21).Согласно результатам настоящего исследования, не наблюдалось значительных изменений уровней экспрессии PTEN между группами. Однако экспрессия гена TERT была значительно увеличена при лечении ST. Упражнения обращали вспять увеличение экспрессии TERT, вызванное станозололом, особенно в паренхиме, где сообщается о метаболической зональности: высвобождение глюкозы из гликогена и посредством глюконеогенеза, утилизация аминокислот и детоксикация аммиака, защитный метаболизм, образование желчи и синтез определенных белков плазмы, такие как альбумин и фибриноген, происходят в основном в перивенальной зоне, тогда как утилизация глюкозы, метаболизм ксенобиотиков и образование других белков плазмы, таких как альфа-1-антитрипсин или альфа-фетопротеин, происходят преимущественно в перивенальной зоне (49,50).

В этом исследовании уровни 3′-гидроксистанозолола и 16-β-гидроксистанозолола, основных метаболитов станозолола, были определены в образцах ткани печени животных, получавших станозолол, и была определена доза-ответная связь между активностью теломеразы и TERT / PTEN. экспрессия генов была определена. Измеренные уровни 3′-гидроксистанозолола в группах ST и STE были связаны с процентной относительной теломеразной активностью, тогда как для уровней станозолола или 16-β-гидроксистанозолола никакой связи не наблюдалось.Это может быть связано с тем, что 3′-гидроксистанозолол является наиболее мощным метаболитом станозолола (2,51).

Несколько исследований показали, что физические упражнения увеличивают активность теломеразы в различных типах клеток (52,53). Однако, насколько нам известно, на сегодняшний день нет доступных исследований, изучающих влияние станозолола на активность теломеразы в присутствии / отсутствии упражнений, за исключением нашего предыдущего исследования, которое было сосредоточено на циркуляции активности теломеразы в мононуклеарных клетках периферической крови (PBMCs). ) (35).Наши результаты показали повышение активности теломеразы и экспрессии TERT в ткани печени, что может быть связано либо с повышенным риском пролиферации из-за лечения станозололом (10), что маловероятно для такого короткого периода воздействия, либо может представлять собой механизм противодействия ( 54). Упражнения обращают вспять вызванное станозололом повышение активности теломеразы. Ряд исследований подтвердил, что упражнения обладают гепатопротекторным действием. Huang и др. продемонстрировали, что 12-недельная программа упражнений по плаванию подавляла маркеры старения и подавляла регуляцию медиаторов воспаления в тканях печени у крыс, вызванных D-галактозой (55).Yi и др. продемонстрировали, что как острые, так и хронические упражнения оказывают профилактическое действие на печень крыс с диабетом 2 типа (56). С другой стороны, сообщалось, что физические упражнения увеличивают количество печеночных ферментов у людей (57), и существуют опасения относительно влияния физических упражнений на портальную гипертензию у пациентов с циррозом печени (58).

В заключение, станозолол индуцирует активность теломеразы на молекулярном уровне, и упражнения обращают эту индукцию, по крайней мере, в отношении экспрессии TERT.Это может отражать преждевременное старение тканей из-за снижения активности теломеразы. Необходимы дальнейшие исследования для изучения механизмов, с помощью которых упражнения могут быть использованы для предотвращения неблагоприятного воздействия станазолола на здоровье, и для выяснения молекулярных гепатоцеллюлярных механизмов побочных эффектов, вызванных станозололом.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить доктора Алегакиса Афанасиоса за его ценную помощь в статистических советах и ​​комментариях.

Аббревиатуры

WADA HCC 910 910 мононуклеарные клетки периферической крови 9022 Финансирование

Это исследование было поддержано Научно-исследовательскими проектами Стамбульского университета (грант №54169-24416).

Доступность данных и материалов

Наборы данных, использованные и / или проанализированные в ходе текущего исследования, доступны у соответствующего автора по разумному запросу.

Вклад авторов

EO, MK, AMT, BA и DAS разработали и разработали исследование, написали рукопись и внесли ценные предложения при ее подготовке. MK, TK, PF и MNT выполнили LC-MS анализ, оценку активности теломеразы и экспрессии генов; CT, PDS и DT выполнили статистический анализ и интерпретацию данных.EO, MK и BA внесли свой вклад в заявку на финансирование. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Одобрение этики и согласие на участие

Эксперименты на животных были одобрены Комитетом по этике экспериментов на животных Стамбульского университета, HADYEK (номер разрешения 2013/100).

Согласие на публикацию

Не применимо.

Конкурирующие интересы

DAS является главным редактором журнала, но не принимал личного участия в процессе рецензирования или какого-либо влияния с точки зрения вынесения окончательного решения по этой статье.

Ссылки

1. Balcells G, Matabosch X, Ventura R. Обнаружение метаболитов O- и N-сульфата станозолола и их оценка в качестве дополнительных маркеров в допинг-контроле. Анальный тест на наркотики. 2017; 9: 1001–1010. DOI: 10.1002 / dta.2107. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 2. Цицимпико Ц., Василаки Ф., Царухас К., Фрагкиадаки П., Царди М., Гутзурелас Н., Непка Ц., Калогераки А., Херетис I, Эпитропаки З. и др. Нефротоксичность у кроликов после длительного приема нандролона деканоата. Toxicol Lett.2016; 259: 21–27. DOI: 10.1016 / j.toxlet.2016.06.1122. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Всемирное антидопинговое агентство Список запрещенных веществ и методов за 2017 год. https://www.wada-ama.org/. По состоянию на 14 февраля 2018 г. 4. Kioukia-Fougia N, Georgiadis N, Tsarouhas K, Vasilaki F, Fragiadaki P, Meimeti E, Tsitsimpikou C. Синтетические и натуральные пищевые добавки: «союзники» здоровья или риски для общественного здоровья. Недавние открытия Pat Inflamm Allergy Drug. 2017; 10: 72–85. DOI: 10,2174 / 1872213X10666160

3700.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Цицимпику С., Хрисостому Н., Папалексис П., Царухас К., Цацакис А., Джамуртас А. Использование пищевых добавок спортсменами-любителями в Афинах, Греция. Int J Sport Nutr Exerc Exerc Metab. 2011; 21: 377–384. DOI: 10.1123 / ijsnem.21.5.377. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Саго Д., Мольде Х., Андреассен С.С., Торсхайм Т., Паллесен С. Глобальная эпидемиология использования анаболических андрогенных стероидов: метаанализ и мета-регрессионный анализ. Ann Epidemiol. 2014; 24: 383–398.DOI: 10.1016 / j.annepidem.2014.01.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Ампуэро Дж., Гарсия Э.С., Лоренцо М.М., Калле Р, Ферреро П., Гомес МР. Вызванный станозололом мягкий холестаз. Гастроэнтерол Гепатол. 2014; 37: 71–72. DOI: 10.1016 / j.gastrohep.2013.09.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Баусерман Л.Л., Сарителли А.Л., Герберт П.Н. Влияние кратковременного приема станозолола на липопротеины сыворотки крови при недостаточности печеночной липазы. Обмен веществ. 1997; 46: 992–996. DOI: 10.1016 / S0026-0495 (97)

AAS анаболический андрогенный стероид
TERT теломераза обратная транскриптаза
TERC теломераза РНК компонент
Агентство по борьбе с теломеразой
гепатоцеллюлярная карцинома
PG пропиленгликоль
IS внутренний стандарт
APCI химическая ионизация при атмосферном давлении 9015 9015
-5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9.Эль-Сераг HB, Крамер Дж., Дуан З., Канвал Ф. Расовые различия в прогрессировании цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы у ветеранов, инфицированных ВГС. Am J Gastroenterol. 2014; 109: 1427–1435. DOI: 10.1038 / ajg.2014.214. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Hansma P, Diaz FJ, Njiwaji C. Смертельный разрыв кисты печени из-за использования анаболических стероидов: презентация случая. Am J Forensic Med Pathol. 2016; 37: 21–22. DOI: 10.1097 / PAF.0000000000000218. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Харкин К.Р., Коуэн Л.А., Эндрюс Г.А., Басараба Р.Дж., Фишер Дж.Р., Дебоус Л.Дж., Руш Дж.К., Гульельмино М.Л., Кирк, Калифорния.Гепатотоксичность станозолола у кошек. J Am Vet Med Assoc. 2000. 217: 681–684. DOI: 10.2460 / javma.2000.217.681. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Сокас Л., Зумбадо М., Перес-Лусардо О., Рамос А., Перес С., Эрнандес Дж. Р., Боада Л. Д.. Гепатоцеллюлярные аденомы, связанные со злоупотреблением анаболическими андрогенными стероидами у бодибилдеров: отчет о двух случаях и обзор литературы. Br J Sports Med. 2005; 39: e27. DOI: 10.1136 / bjsm.2004.013599. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Стимак Д., Милич С., Динтиньяна Р.Д., Ковач Д., Ристич С.Андрогенный / анаболический стероид-индуцированный токсический гепатит. J Clin Gastroenterol. 2002. 35: 350–352. DOI: 10.1097 / 00004836-200210000-00013. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Дешмук Н.И., Захар Г., Петроци А., Секели А.Д., Баркер Дж., Нотон Д.П. Определение станозолола и 3′-гидроксистанозолола в шерсти, моче и сыворотке крыс с помощью тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией. Chem Cent J. 2012; 6: 162. DOI: 10.1186 / 1752-153X-6-162. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Mateus-Avois L, Mangin P, Saugy M.Использование ионной газовой хроматографии-множественной масс-спектрометрии для обнаружения и подтверждения следовых уровней 3′-гидроксистанозолола в моче для допинг-контроля. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2005; 816: 193–201. DOI: 10.1016 / j.jchromb.2004.11.033. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Бюттнер А., Тим Д. Побочные эффекты анаболических андрогенных стероидов: патологические данные и взаимосвязь между структурой и активностью. Handb Exp Pharmacol. 2010; 195: 459–484. DOI: 10.1007 / 978-3-540-79088-4_19.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Рентукас Э., Царухас К., Капланис I, Короу Э, Николау М., Марафонитис G, Коккиноу С., Халиассос А., Мамалаки А., Куретас Д. и др. Связь активности теломеразы в МКПК с маркерами воспаления и эндотелиальной дисфункции у пациентов с метаболическим синдромом. PLoS One. 2012; 7: e35739. DOI: 10.1371 / journal.pone.0035739. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Zhou X, Zhu H, Lu J. Экспрессия генов PTEN и hTERT и корреляция с гепатоцеллюлярной карциномой человека.Pathol Res Pract. 2015; 211: 316–319. DOI: 10.1016 / j.prp.2014.11.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Ян Ц., Ли С., Ван М., Чанг А.К., Лю И, Чжао Ф, Сяо Л., Хань Л., Ван Д., Ли С., Ву Х. PTEN подавляет онкогенную функцию AIB1 за счет снижения стабильности его белка с помощью механизма, включающего Fbw7 альфа. . Молочный рак. 2013; 12:21. DOI: 10.1186 / 1476-4598-12-21. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Jung S, Li C, Jeong D, Lee S, Ohk J, Park M, Han S, Duan J, Kim C, Yang Y и др.Онкогенная функция p34SEI-1 через NEDD4 1 опосредована убиквитинизацией / деградацией PTEN и активацией пути PI3K / AKT. Int J Oncol. 2013; 43: 1587–1595. DOI: 10.3892 / ijo.2013.2064. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. ОЭСР. Руководящий документ по распознаванию, оценке и использованию клинических признаков в качестве гуманных конечных точек для экспериментальных животных, используемых при оценке безопасности. ОЭСР; Париж: 2000. [Google Scholar] 26. Черичи Камарго IC, Баррейрос де Соуза Р., Фатима Паккола Мескита С., Чуффа Л.Г., Фрей Ф.Гистология яичников и оценка фолликулов у самок крыс, получавших деканоат нандролона и подвергавшихся физическим нагрузкам. Acta Biol Hung. 2009. 60: 253–261. DOI: 10.1556 / ABiol.60.2009.3.2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. де Алмейда Чуффа Л.Г., де Соуза Р.Б., Фрей Ф., де Фатима Паккола Мескита С., Камарго IC. Деканоат нандролона и физическое усилие: гистологическая и морфометрическая оценка в матке взрослой крысы. Анат Рек (Хобокен) 2011; 294: 335–341. DOI: 10.1002 / ar.21314. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28.Гопинатан С., О’Нил Э, Родригес Л.А., Чемпион Р., Филлипс М., Нуралдин А., Вендт М., Уилсон Эйдж, Крамер Дж. Токсикология наполнителей in vivo, обычно используемых при открытии лекарств на крысах. J Pharmacol Toxicol Methods. 2013; 68: 284–295. DOI: 10.1016 / j.vascn.2013.02.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Healing G, Sulemann T, Cotton P, Harris J, Hargreaves A, Finney R, Kirk S, Schramm C, Garner C, Pivette P, Burdett L.Данные о безопасности 19 транспортных средств для использования в доклинических исследованиях на грызунах в течение 1 месяца: Введение гидроксипропил-β-циклодекстрина вызывает почечную токсичность.J Appl Toxicol. 2016; 36: 140–150. DOI: 10.1002 / jat.3155. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Aye M, Di Giorgio C, De Mo M, Botta A, Perrin J, Courbiere B. Оценка генотоксичности трех криопротекторов, используемых для витрификации человеческих ооцитов: диметилсульфоксида, этиленгликоля и пропиленгликоля. Food Chem Toxicol. 2010; 48: 1905–1912. DOI: 10.1016 / j.fct.2010.04.032. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Бертло-Рику А., Перрин Дж, ди Джорджио С., де Мео М., Ботта А., Курбьер Б. Оценка генотоксичности 1,2-пропандиола (PrOH) на ооциты мышей с помощью анализа комет.Fertil Steril. 2011; 96: 1002–1007. DOI: 10.1016 / j.fertnstert.2011.07.1106. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Каннингем Р.Л., МакГиннис М.Ю. Физическая провокация самцов крыс, подвергшихся воздействию пубертатных анаболических андрогенных стероидов, вызывает агрессию по отношению к самкам. Horm Behav. 2006; 50: 410–416. DOI: 10.1016 / j.yhbeh.2006.05.002. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Matrisciano F, Modafferi AM, Togna GI, Barone Y, Pinna G, Nicoletti F, Scaccianoce S. Повторное лечение анаболическими андрогенными стероидами вызывает обратимые антидепрессантами изменения гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси, уровней BDNF и поведения.Нейрофармакология. 2010. 58: 1078–1084. DOI: 10.1016 / j.neuropharm.2010.01.015. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Tucci P, Morgese MG, Colaianna M, Zotti M, Schiavone S, Cuomo V, Trabace L. Нейрохимические последствия злоупотребления стероидами: моноаминергические изменения, вызванные станозололом. Стероиды. 2012; 77: 269–275. DOI: 10.1016 / j.steroids.2011.12.014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Кара М., Озкагли Е., Фрагкиадаки П., Котил Т., Стивактакис П. Д., Спандидос Д. А., Цацакис А. М., Альпертунга Б. Определение повреждения ДНК и активности теломеразы у крыс, получавших станозолол.Exp Ther Med. 2017; 13: 614–618. DOI: 10.3892 / etm.2016.3974. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Цицимпико Ц., Цацаракис М., Фрагкиадаки П., Коваци Л., Стивактакис П., Калогераки А., Куретас Д., Цацакис А. М.. Гистопатологические поражения, окислительный стресс и генотоксические эффекты в печени и почках после длительного воздействия диазинона и пропоксура на кроликов. Токсикология. 2013; 307: 109–114. DOI: 10.1016 / j.tox.2012.11.002. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Сольбах П., Поттхофф А., Раатшен Х.Дж., Суда Б., Леманн Ю., Шнайдер А., Гебель М.Дж., Маннс М.П., ​​Фогель А.Гепатоцеллюлярная карцинома с положительным тестостерон-рецептором у 29-летнего бодибилдера с историей злоупотребления анаболическими андрогенными стероидами: отчет о болезни. BMC Gastroenterol. 2015; 15:60. DOI: 10.1186 / s12876-015-0288-0. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Ливак К.Дж., Шмитген Т.Д. Анализ данных относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2 (-4Delta Delta C (T)). Методы. 2001; 25: 402–408. DOI: 10.1006 / meth.2001.1262. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39.Кеслер Т., Сандху Р.С., Кришнамурти С. Гепатология: гепатоцеллюлярная карцинома у молодого человека, вторичная по отношению к злоупотреблению андрогенными анаболическими стероидами. J Gastroenterol Hepatol. 2014; 29: 1852. DOI: 10.1111 / jgh.12809. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Боада Л.Д., Зумбадо М., Торрес С., Лопес А., Диас-Чико Б.Н., Кабрера Дж. Дж., Лусардо ОП. Оценка острых и хронических гепатотоксических эффектов анаболического андрогенного стероида станозолола у взрослых самцов крыс. Arch Toxicol. 1999. 73: 465–472. DOI: 10.1007 / s002040050636.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Канаяма Дж., Хадсон Дж. И., Поуп Х. Дж., Младший. Долгосрочные психиатрические и медицинские последствия злоупотребления анаболическими андрогенными стероидами: надвигающаяся проблема общественного здравоохранения? Зависимость от наркотиков и алкоголя. 2008; 98: 1–12. DOI: 10.1016 / j.drugalcdep.2008.05.004. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 42. Орниш Д., Лин Дж., Чан Дж. М., Эпель Э, Кемп С., Вайднер Дж., Марлин Р., Френда С. Дж., Магбануа М. Дж. М., Даубенмьер Дж. И др. Влияние всесторонних изменений образа жизни на активность теломеразы и длину теломер у мужчин с подтвержденным биопсией раком простаты низкого риска: 5-летнее наблюдение за описательным пилотным исследованием.Ланцет Онкол. 2013; 14: 1112–1120. DOI: 10.1016 / S1470-2045 (13) 70366-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 43. Мишра С., Кумар Р., Малхотра Н., Сингх Н., Дада Р. Мягкий окислительный стресс полезен для поддержания длины теломер сперматозоидов. World J Methodol. 2016; 6: 163–170. DOI: 10.5662 / wjm.v6.i2.163. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44. Zar T, Graeber C, Perazella MA. Распознавание, лечение и профилактика токсичности пропиленгликоля. Semin Dial. 2007. 20: 217–219. DOI: 10.1111 / j.1525-139X.2007.00280.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Djojosubroto MW, Chin AC, Go N, Schaetzlein S, Manns MP, Gryaznov S, Harley CB, Rudolph KL. Антагонисты теломеразы GRN163 и GRN163L подавляют рост опухоли и повышают химиочувствительность гепатомы человека. Гепатология. 2005; 42: 1127–1136. DOI: 10.1002 / hep.20822. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46. Василаки Ф., Цицимпико Ч., Цароухас К., Германакис I, Царди М., Каввалакис М., Озкагли Э., Куретас Д., Цацакис А. М.. Кардиотоксичность у кроликов после длительного приема нандролона деканоата.Toxicol Lett. 2016; 241: 143–151. DOI: 10.1016 / j.toxlet.2015.10.026. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 47. Пилати С., Летузе Э., Нолт Дж. К., Имбо С., Булай А., Кальдераро Дж., Пуссен К., Франкони А., Куши Дж., Моркретт Дж. И др. Геномное профилирование гепатоцеллюлярных аденом позволяет выявить повторяющиеся мутации, активирующие FRK, и механизмы злокачественной трансформации. Раковая клетка. 2014; 25: 428–441. DOI: 10.1016 / j.ccr.2014.03.005. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Юнгерманн К., Кицманн Т. Зонирование паренхиматозного и непаренхиматозного метаболизма в печени.Annu Rev Nutr. 1996. 16: 179–203. DOI: 10.1146 / annurev.nu.16.070196.001143. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Юнгерманн К. Метаболическое зонирование паренхимы печени. Semin Liver Dis. 1988. 8: 329–341. DOI: 10,1055 / с-2008-1040554. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 51. Сальвадор Дж. П., Санчес-Баеза Ф, Марко М. П.. Одновременное иммунохимическое определение станозолола и основного метаболита человека, 3′-гидроксистанозолола, в образцах мочи и сыворотки крови. Анальная биохимия. 2008; 376: 221–228. DOI: 10.1016 / j.ab.2008.02.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52. Чилтон В.Л., Маркес Ф.З., Вест Дж., Канноуракис Дж., Берзиньш С.П., О’Брайен Б.Дж., Чарчар Ф.Дж. Острая физическая нагрузка приводит к регуляции генов, связанных с теломерами, и экспрессии микроРНК в иммунных клетках. PLoS One. 2014; 9: e. DOI: 10.1371 / journal.pone.00. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53. Ludlow AT, Gratidão L, Ludlow LW, Spangenburg EE, Roth SM. Острая физическая нагрузка активирует p38 MAPK и увеличивает экспрессию генов, защищающих теломеры, в сердечной мышце.Exp Physiol. 2017; 102: 397–410. DOI: 10.1113 / EP086189. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Вардавас А.И., Стивактакис П.Д., Цацаракис М.Н., Фрагкиадаки П., Василаки Ф., Царди М., Дацери Г., Циаусис Дж., Алегакис А.К., Цицимпику С. и др. Длительное воздействие циперметрина и пиперонилбутоксида вызывает воспаление печени и почек и индуцирует генотоксичность у новозеландских белых кроликов-самцов. Food Chem Toxicol. 2016; 94: 250–259. DOI: 10.1016 / j.fct.2016.06.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 55.Хуан С.К., Чианг В.Д., Хуанг В.К., Хуанг С.Й., Сюй М.К., Лин В.Т. Гепатопротекторные эффекты упражнений по плаванию на крысиной модели индуцированного D-галактозой старения. Evid Based Complement Alternat Med. 2013; 2013: 275431. DOI: 10.1155 / 2013/275431. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 56. Yi X, Cao S, Chang B, Zhao D, Gao H, Wan Y, Shi J, Wei W., Guan Y. Влияние острых и хронических упражнений на сигнальный путь лептин-AMPK-ACC в печени у крыс с диабетом 2 типа . J Diabetes Res. 2013; 2013: 946432.DOI: 10.1155 / 2013/946432. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 57. Петтерссон Дж., Хиндорф Ю., Перссон П., Бенгтссон Т., Мальмквист Ю., Веркстрём В., Экелунд М. Мышечные упражнения могут вызывать крайне патологические тесты функции печени у здоровых мужчин. Br J Clin Pharmacol. 2008. 65: 253–259. DOI: 10.1111 / j.1365-2125.2007.03001.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 58. Brustia R, Savier E, Scatton O. Физические упражнения у пациентов с циррозом: к реабилитации в листе ожидания трансплантации печени.Систематический обзор и метаанализ. Клин Рес Гепатол Гастроэнтерол. 2017 ноябрь 18; Epub впереди печати. [PubMed] [Google Scholar]

Прием станозолола в сочетании с упражнениями приводит к снижению активности теломеразы, возможно, связанному со старением печени

Int J Mol Med. 2018 июл; 42 (1): 405–413.

, # 1, * , # 1, * , 2 , 3 , 3 , 4 , 3 , 3 , 5 , 3 и 1

Эрен Озкагли

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета

Мехтап Кара

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета

Тугба Котил

2 Кафедра гистологии и эмбриологии медицинского факультета Стамбульского университета, Стамбул 34116, Турция

Персефони Фрагкиадаки

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Манолис Н.Цацаракис

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Кристина Цицимпику

4 Государственная химическая лаборатория Греции, 11521 Афины

Polychronis D. Stivaktakis

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Димитриос Цукалас

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Деметриос А.Спандидос

5 Лаборатория клинической вирусологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион, Греция

Аристидес М. Цацакис

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Букет Альпертунга

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета и

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета и

2 Кафедра гистологии и эмбриологии медицинского факультета Стамбульского университета, Стамбул 34116, Турция

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии, Медицинский факультет, Университет Крита, 71003 Ираклион

4 Общая химическая государственная лаборатория Греции, 11521 Афины

5 Лаборатория клинической вирусологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион, Греция

# Внесен равный вклад.

Для корреспонденции: профессору Букету Альпертунга, кафедра фармацевтической токсикологии, фармацевтический факультет, Стамбульский университет, Беязит, Стамбул 34116, Турция, электронная почта: [email protected]Профессору Аристидесу М. Цацакису, Лаборатория судебной медицины и токсикологии, Медицинская школа, Университет Крита, ПО Box 1393, 71003 Heraklion, Greece, E-mail: [email protected]

* Внесено поровну

Получено 28 февраля 2018 г .; Принято 11 апреля 2018 г.

Эту статью цитировали в других статьях в PMC.
Заявление о доступности данных

Наборы данных, использованные и / или проанализированные в ходе текущего исследования, доступны у соответствующего автора по разумному запросу.

Реферат

Анаболические вещества — это допинговые вещества, которые обычно используются в спорте. Станозолол, 17α-алкилированное производное тестостерона, широко используется спортсменами и бодибилдерами. Некоторые медицинские и поведенческие побочные эффекты связаны со злоупотреблением анаболическими андрогенными стероидами (ААС), в то время как печень остается наиболее узнаваемым органом-мишенью.В настоящем исследовании изучалось влияние на печень введения станозолола крысам в высоких дозах, напоминающих дозы, применяемые для допинга, в присутствии или отсутствии упражнений. Станозолол и его метаболиты, 16-β-гидроксистанозолол и 3′-гидроксистанозолол, были обнаружены в печени крыс с помощью жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Активность теломеразы, которая участвует в клеточном старении и онкогенезе, была обнаружена путем исследования уровней экспрессии обратной транскриптазы теломеразы (TERT) и фосфатазы и гомолога тензина (PTEN) в печени крыс, получавших станозолол.Станозолол индуцировал теломеразную активность на молекулярном уровне в ткани печени крыс, и упражнения обращали эту индукцию, отражая возможное преждевременное старение ткани печени. На экспрессию гена PTEN в печени крыс практически не влияли ни упражнения, ни введение станозолола.

Ключевые слова: станозолол, фосфатаза и гомолог тензина, теломеразная обратная транскриптаза, теломеразная активность, 16-β-гидроксистанозолол, 3′-гидроксистанозолол

Введение

Станозолол является анаболическим анаболическим анаболиком, повышающим эффективность (AAS).Среди всех ААС станозолол является одним из наиболее часто используемых стероидов профессиональными спортсменами и молодыми людьми для улучшения внешнего вида и работоспособности. Станозолол представляет собой 17α-алкилированное производное тестостерона с анаболическими и высокими андрогенными свойствами (1,2), и его использование в спорте запрещено Всемирным антидопинговым агентством (WADA) (3).

В прошлом ААС использовались только элитными спортсменами и бодибилдерами для целей допинга. Однако в настоящее время даже молодые люди злоупотребляют ААС в супрафизиологических дозах для улучшения внешнего вида (4,5).Сообщается, что станозолол является одним из наиболее часто используемых ААС (6), и он отвечает за несколько медицинских и поведенческих побочных эффектов, являясь признанным фактором риска заболеваний печени как у экспериментальных животных, так и у людей (7-13). . Станозолол широко биотрансформируется ферментативными путями в печени. Сообщалось, что основными метаболитами станозолола являются 3′-гидроксистанозолол, 4-β-гидроксистанозолол и 16-β-гидроксистанозолол (14,15). В целом, ААС проявляют свои эффекты посредством нескольких различных механизмов, таких как модуляция экспрессии рецепторов андрогенов (16).Побочные эффекты, связанные с печенью, чаще связаны с 17α-алкильными производными ААС и, как сообщается, не связаны с путем введения. Однако точные механизмы еще полностью не изучены (17).

Теломеры представляют собой гетерохроматиновые нуклеопротеидные комплексы на концах хромосом, участвующие в ряде основных биологических функций (). Известно, что теломеры играют ключевую роль в формировании и прогрессировании до 90% злокачественных новообразований. Теломеразная активность играет ключевую роль в клеточном старении и онкогенезе (18).Повышенная активность теломеразы обнаруживается в большинстве случаев рака человека (19). Теломераза — это рибонуклеопротеин, отвечающий за поддержание длины теломер. Ядро теломеразы состоит из двух компонентов: каталитической обратной транскриптазы теломеразы (TERT) и компонента теломеразной РНК (TERC) ().

Теломеры — это защитные колпачки хромосом (59) (адаптировано с разрешения Shutterstock).

Теломераза добавляет теломерные повторы (TTAGGG) к 3′-гидроксильному концу ведущей цепи теломеры.Компонент РНК служит шаблоном для добавления нуклеотидов. Это теломеразный комплекс, который состоит из компонента обратной транскриптазы (TERT), компонента РНК (TERC), белка дискерина и других связанных белков (NHP2, NOP10 и GAR1).

Уровень экспрессии мРНК TERT был изучен в качестве биомаркера, поскольку было продемонстрировано, что он является лимитирующим детерминантом активности теломеразы при различных злокачественных новообразованиях (20). Ген фосфатазы и белка-гомолога тензина (PTEN) кодирует белок-супрессор опухоли с фосфатазной активностью.Сообщается, что частота гетерозиготности PTEN при гепатоцеллюлярной карциноме человека (ГЦК) человека снижается до 33% (21). PTEN участвует в подавлении активности теломеразы посредством регуляции активности TERT (22). PTEN является белком-негативным регулятором сигнального пути фосфоинозитид-3-киназы / AKT механизма регуляции выживания клеток и индуцирует клеточный апоптоз (23). PTEN предотвращает активацию AKT посредством дефосфорилирования фосфатидилинозитол (3,4,5) -трисфосфата (PIP3) до фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфата (PIP2).Подавление PTEN связано с онкогенной активностью в клетке (24).

Целью этого исследования было изучить, по крайней мере, насколько нам известно, роль теломеразы в вызванной станозололом гепатотоксичности путем изучения корреляции между активностью теломеразы и уровнями экспрессии гена PTEN-TERT. Также исследовали биоаккумуляцию станозолола и двух его основных метаболитов (3′-гидроксистанозолол и 16-β-гидроксистанозолол) в ткани печени, а также его связь с активностью теломеразы.

Материалы и методы

Эксперименты на животных

Всего было получено 34 крысы-самца Sprague-Dawley в возрасте 8 недель и помещено в помещения для лабораторных животных Департамента лабораторных наук о животных Института экспериментальной медицины Стамбульского университета. (Стамбул, Турция) в соответствии с Комитетом по этике экспериментов на животных Стамбульского университета, HADYEK (номер утверждения 2013/100). Крысы были разделены на 5 групп следующим образом: i) контрольная (C) группа; ii) группу обработки пропилена (PG); iii) группу обработки станозололом (ST); iv) группа лечения и упражнений с пропиленом (PGE); и v) группа лечения станозололом и физических упражнений (STE).Животных размещали по 4 животных в одной металлической клетке и содержали в 12-часовом цикле темнота / свет при температуре 20–23 ° C. Количество крыс в экспериментальной группе, уход за крысами, обращение и используемые экспериментальные процедуры соответствовали руководящим принципам HADYEK. Вес крыс при покупке регистрировали и использовали для корректировки дозы (). Гуманными конечными точками, определенными в нашем исследовании, были боль, дистресс, неправильная осанка и судороги в соответствии с Руководящим документом ОЭСР (25). Ни у одного животного не было клинических признаков гуманных конечных точек, которые оправдывали бы их жертвоприношение до окончания эксперимента.Экспериментальный план исследования представлен в.

Таблица I

Вес крыс при покупке.

95 2700 95 2700 95 27 4 264
Количество крыс Вес крыс при покупке (г)
Контроль
1 259
2 268
268
268
4 264
5 282
Пропиленгликоль
1 255
2 276
276
261
5 272
Пропиленгликоль и упражнения
1 262
2 276
3
5 278
6 263 902 00
7 260
8 277
Стероидная группа
1 280
2 265
4 272
5 277
6 272
7 263
8 290
275
2 277
3 290
4 263
5 280
28 7
8 273

Таблица II

Experi мысленный дизайн исследования.

Группы Количество крыс Подкожные инъекции Упражнения
Контроль 5 Без инъекций Без упражнений
Обработка пропиленгликолем 5203 мл / кг пропиленгликоля в день Без упражнений
Лечение станозололом 8 5 мг / кг станозолола в день Без упражнений
Лечение пропиленгликолем и упражнения 8 1 мл / кг пропиленгликоля в день Плавание: 20 мин / день, 5 дней в неделю
Лечение станозололом и упражнения 8 5 мг / кг станозолола в день Плавание: 20 мин / день, 5 дней / неделя

Плавание было выбрано в качестве модели упражнения (26,27) и началось за 1 неделю до схемы лечения, чтобы мальчики адаптироваться.Крыс плавали в прямоугольном полиэтиленовом резервуаре (длина 120 см × глубина 50 см × ширина 43 см), наполненном водой при температуре 29 ± 1 ° C. Во время экспериментов в течение 20 минут в день, 5 дней в неделю крыс подвергали плаванию после периода адаптации в течение 1 недели. Животных адаптировали к процессу плаванием в воде в течение 5 минут в течение первых 2 дней, а затем время плавания постепенно увеличивали до 5 минут в день до конечной продолжительности 20 минут на 5 день.

Пропиленгликоль (PG ) (Tekkim, Стамбул, Турция) использовался в качестве носителя для станозолола (Sigma, Schnelldorf, Германия).Известно, что PG является хорошим проводником для экспериментальных исследований in vivo (28,29). Однако сообщалось, что высокие концентрации PG могут вызывать повреждение ДНК в эукариотических клетках и ооцитах мышей (30,31). Подкожное введение было выбрано, а дозы были выбраны в соответствии с предыдущими исследованиями (32–34). Группы, подвергшиеся воздействию, получали однократную дозу PG (1 мл / кг) и ST (5 мл / кг) подкожно в течение 5 дней в неделю.

После 28 дней лечения животным была проведена легкая анестезия с использованием процента 1.9% диэтиловый эфир в анестезиологической камере и эвтаназия путем шейного вывиха, проводимая обученным персоналом. Были собраны образцы ткани печени и разделены на 2 секции. Один срез немедленно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C, а другой фиксировали 10% забуференным формалином и залитым парафином для гистохимического анализа.

Анализ жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС)

Стандарты станозолола, 3′-гидроксистанозолола и 16-β-гидроксистанозолола в концентрациях 0,0.1, 0,25, 0,5 и 1 частей на миллион были приготовлены из стандартных исходных растворов 20 частей на миллион. Туринабол (LGC, Лидс, Великобритания) использовали в качестве внутреннего стандарта (IS) с целевыми ионами m / z 317,25 и m / z 335,25. Калибровочные кривые были получены путем измерения отношения площадей пиков целевых ионов к IS следующим образом: для станозолола m / z 370,4 , 352,3 и 329,35, для 3′-гидроксистанозолола m / z 386,4 , 345,35, для 16-β- гидроксистанозолол m / z 386,4 , 366,3 и 345,35 для IS туринабол () (ион m / z, используемый для количественной оценки, выделен жирным шрифтом).Образцы печени необработанных животных, которые дали отрицательные результаты (

Таблица III

Параметры анализа ЖХ-МС.

4 4 4 9
Агент Rt m / z target m / z m / z Mw
4α-гидроксистанозолол 386 345,35
4β-гидроксистанозолол 9,3 386,4 345,35
3-гидроксистанозол5 10200
16-β-гидроксистанозолол 10,45 386,4 366,3 345,35 344,49
Станозолол 12.95 370,4 352,3 329,35 328,49
Туринабол (IS) 13,9 317,25 335,25 334,9
механическая гомогенизация на высокой скорости в течение 2 мин с 1,0 мл воды. Гомогенаты сильно встряхивали, а затем инкубировали в ультразвуковой бане в течение 10 мин. Затем добавляли 1,5 мл этилацетата и проводили экстракцию аналитов в течение 10 мин.Образцы центрифугировали при 1820 × g в течение 2 мин при 4 ° C. Супернатанты переносили в пустую пробирку и упаривали досуха в атмосфере азота при 30 ° C. После выпаривания добавляли 100 мкл л ацетонитрила и сильно встряхивали. Супернатанты переносили во флаконы, и 10 мкл мкл из них вводили в систему ЖХ-МС для анализа.

Система ЖХ-МС состоит из бинарного насоса ЖХ (Shimadzu Prominence, Киото, Япония), вакуумного дегазатора, автоматического пробоотборника и термостата для колонок.В качестве подвижной фазы был выбран градиент 0,1% муравьиной кислоты в воде (растворитель A) и ацетонитриле (растворитель B). Разделение аналитов было достигнуто на колонке для ВЭЖХ Discovery C18 (250 × 4,6 мм, 5 мкм, м), термостатированной при 30 ° C. Масс-спектрометр (LCMS-2010 EV; Shimadzu Prominence) в сочетании с интерфейсом химической ионизации при атмосферном давлении (APCI) и одиночным квадрупольным масс-фильтром использовался в выбранном положительном режиме ионного мониторинга (SIM). Температура интерфейса, CDL и теплового блока составляла 400, 200 и 200 ° C соответственно.Напряжение детектора составляло 1,5 кВ, поток распыляющего газа составлял 2,5 л / мин, а осушающий газ составлял 0,02 МПа.

Анализ активности теломеразы

Определение активности теломеразы в образцах ткани печени крысы выполняли количественно с использованием набора teloTAGGG telomerase PCR ELISA PLUS (Roche Diagnostic GmbH, Mannheim, Germany). Протокол набора следовал для оценки активности теломеразы, как описано ранее (35,36).

Оценка экспрессии гена

Выделение РНК

проводили из залитых парафином срезов ткани печени крысы с использованием выделения РНК High Pure FFPET (Roche Diagnostic GmbH) в соответствии с инструкциями производителя.Для синтеза кДНК использовали фиксированное количество РНК из каждого образца. кДНК получали с использованием набора Transcriptor First Strand cDNA Synthesis (Roche Diagnostic GmbH) в соответствии с инструкциями производителя. Уровни экспрессии генов TERT и PTEN анализировали с помощью количественной (в реальном времени) полимеразной цепной реакции (кПЦР) с использованием аппарата Light Cycler 480 (Roche Diagnostic GmbH) с анализом каталога Real Time Ready (Roche Diagnostic GmbH) в соответствии с инструкциями производителя. Последовательности праймеров были следующими: PTEN прямой, 5′-AGAACAAGATGCTCAAAAAGGACAA-3 ‘и обратный, 5′-TGTCAGGGTGAGCACAAGAT-3′; TERT вперед, 5’-GACATGGAGAACAAGCTGTTTGC-3 ‘; и наоборот, 5’-ACAGGGAAGTTCACCACTGTC-3 ‘; и GAPDH прямой, 5’-TTCAACGGCACAGTCAAGG-3 ‘и обратный, 5′-CTCAGCACCAGCATCACC-3’.ПЦР-амплификации выполняли в соответствии с инструкциями производителя в трех экземплярах. Реакционную смесь без матрицы кДНК использовали в качестве отрицательного контроля. Уровни экспрессии (2 -ΔΔCt ) рассчитывали, как описано ранее (37,38).

Иммуногистохимический (ИГХ) анализ

ИГХ-анализы были выполнены с использованием наборов для определения Ultra Streptavidin HRP [BioLegend Sig-32248, набор для определения Ultra Streptavidin HRP (Multi-Specification, DAB)] и BioLegend Sig-32250, набор для определения Ultra Streptavidin HRP. (Multi-views, AEC) (BioLegend, San Diego, CA, USA) для уровней экспрессии PTEN и TERT соответственно.Залитые парафином срезы помещали на предметные стекла Superfrost (Menzel-Gläser, Брауншвейг, Германия). После сушки в течение ночи был проведен IHC-анализ PTEN и TERT с использованием метода меченой стрептавидин-биотин-пероксидазы. Слайды обрабатывали ксилолом и регидратировали в растворах этанола возрастающих классов. Извлечение антигена осуществляли путем кипячения предметных стекол в течение 5 мин / 3 раза в цитратном буфере (0,01 М). Для подавления активности эндогенной пероксидазы срезы ткани обрабатывали блокирующим реагентом 1 в течение 15 минут и промывали PBS.Все срезы инкубировали с блокирующим реагентом 2 в течение 5 минут при комнатной температуре, чтобы избежать неспецифического связывания. Инкубации поликлональных антител PTEN (251264) и TERT (250509) (оба от Abbiotec, Aachen, Germany) проводили в течение ночи при 4 ° C с разведениями 1/100. Слайды инкубировали со связывающим реагентом 4, а затем с реагентом для маркировки 5 в течение 20 минут при комнатной температуре. Слайды визуализировали хромогенами DAB и AEC, контрастировали гематоксилином Майера и, наконец, монтировали.Уровни экспрессии PTEN и TERT оценивали под световым микроскопом (Olympus BX40F4; Olympus, Токио, Япония). Анализы TERT и PTEN IHC были классифицированы невооруженным глазом на 4 категории на основе интенсивности окрашивания следующим образом: 0, нет окрашивания; +, слабое окрашивание; ++, умеренное окрашивание; и +++, сильное окрашивание). Анализ проводился с использованием считывающего устройства для одного слайда для минимизации вариабельности из-за субъективной оценки.

Статистический анализ

Средние значения ± стандартное отклонение и медиана были использованы для экспрессии уровней станозолола и его метаболитов, а также для PTEN, TERT и относительной теломеразной активности в процентах.Изменения между двумя значениями были выражены в виде относительных изменений в процентах или иным образом на основе следующей формулы: (фактическое изменение / контрольное значение) * 100%.

Тест Колмогорова-Смирнова с поправкой Лилиэфорса применялся для проверки нормальности непрерывных переменных. R Спирмена применяли для измерения двумерных корреляций между двумя непрерывными переменными (например, относительная активность теломеразы в процентах по сравнению с уровнями экспрессии гена 3′-гидроксистанозолола TERT). Непараметрический тест Краскела-Уоллиса и параметрический односторонний дисперсионный анализ ANOVA применялись для сравнения различий в уровнях станозолола и его метаболитов между исследуемыми группами (контрольная, станозолол, PG и группы упражнений).Непараметрические апостериорные сравнения оценивали с использованием тестов Данна (непараметрические) и HSD Тьюки для параметрических тестов. Для статистического анализа использовалось программное обеспечение IBM SPSS Statistics 21.0 (IBM Corp., Армонк, Нью-Йорк, США). Уровень 0,05 был установлен для принятия или отклонения нулевой гипотезы (статистическая значимость). Размеры выборок для отдельных анализов незначительно различались из-за того, что некоторые недостающие значения возникли из-за условий эксперимента.

Результаты

Тесты на нормальность

Тесты на нормальность показали, что только процентная относительная активность теломеразы сохранила нулевую гипотезу, предполагая нормальное распределение данных (P = 0.137). Все другие протестированные непрерывные переменные, такие как TERT, PTEN и 3′-гидроксистанозолол, не следовали нормальному распределению (P <0,01) (данные не показаны).

Биоаккумуляция станозолола и его метаболитов в тканях печени

Результаты обобщены в. Уровни станозолола и его метаболитов были незначительно выше в группе STE по сравнению с группой ST (P> 0,05).

Таблица IV

Уровни концентрации (нг / мг) станозолола и его метаболитов в группах станозолола (ST) и станозолола в сочетании с упражнениями (STE).

Агент Группа ST (среднее значение ± стандартное отклонение) Группа ST (среднее значение ± стандартное отклонение) Манна-Уитни (значение P) % относительное изменение
Станозолол (нг / мг ) 2,98 ± 1,01 3,89 ± 1,09 0,240 30,5
3′-гидроксистанозолол (нг / мг) 0,34 ± 0,06 0,44 ± 0,18 0,485 29,419 29,4 16-β-гидроксистанозолол (нг / мг) 0.25 ± 0,11 0,32 ± 0,15 0,485 28,0

Оценка активности теломеразы и экспрессии генов

Уровни экспрессии генов PTEN и TERT и относительная относительная активность теломеразы в исследуемых группах представлены в. Значительная разница наблюдалась для экспрессии гена TERT в различных группах (χ 2 = 17,585, df = 4, P <0,001). Основываясь на тесте Данна, упражнения снижали экспрессию TERT на (71,0%; P = 0,001), а введение ST увеличивало экспрессию TERT на (160%; P <0.001) по сравнению с группой PG. Следует отметить, что вызванное станозололом увеличение экспрессии TERT по сравнению с группой станозолола было ограничено (68,0%; P = 0,042) у животных, подвергшихся физической нагрузке. Аналогичная картина наблюдалась и для процентной активности теломеразы. На экспрессию гена PTEN практически не влияли ни упражнения, ни прием станозолола. Следует отметить, что не все значения, представленные выше, показаны в из-за большого количества попарных сравнений.

Таблица V

Уровни экспрессии генов PTEN и TERT (2 -ΔΔCt ) и% относительной активности теломеразы на группу.

9020
Параметры Группы N Среднее SD Сравнение групп
Экспрессия гена PTEN (2 −ΔΔCt ) 5 Контроль Kruskal-Wallis
Обработка пропиленгликолем 5 0,37 0,25 χ 2 = 3,643,
Обработка станозололом 6 0.40 0,42 df = 4, P = 0,456
Лечение пропиленгликолем и упражнения 5 0,98 1,62
Станозолол лечение и упражнения 6
Экспрессия гена TERT (2 −ΔΔCt ) Контроль 5 0,40 0,41 Краскал-Уоллис
Обработка пропиленгликолем 2 78 2,66 χ 2 = 17,585,
Обработка станозололом 6 7,25 1,40 df = 4, P = 0,001
Обработка пропиленгликолем и упражнения 5 0,81 0,96
Лечение станозололом и упражнения 6 2,29 0,97
% относительной активности теломеразы Контроль 5 .30 0,58 ANOVA:
Обработка пропиленгликолем 5 1,92 0,96 F = 3,015, df = 4,
Обработка станозололом 6 6 P = 0,040
Лечение пропиленгликолем и упражнения 5 0,76 0,61
Лечение станозололом и упражнения 6 1.33 0,96

Умеренная корреляция между процентной относительной активностью теломеразы и уровнями экспрессии гена TERT наблюдалась с использованием коэффициента корреляции Спирмена (r = 0,424, P = 0,028) (). Уровни 3′-гидроксистанозолола, измеренные в группах ST и STE, имели тенденцию отрицательно коррелировать с относительной процентной активностью теломеразы (r Спирмена r = -0,566, P = 0,055) (). Не наблюдалось корреляции между какими-либо параметрами, отслеживаемыми с помощью станозолола и 16-β-гидроксистанозолола (данные не показаны).

Диаграмма разброса экспрессии гена TERT и относительной активности теломеразы в процентах. TERT, обратная транскриптаза теломеразы.

Диаграмма рассеяния 3′-гидроксистанозолола и относительная активность теломеразы в процентах.

Анализы ИГХ

Изображения окрашивания ИГХ показаны в, а результаты суммированы в. Уровни экспрессии гена PTEN наблюдались вокруг центральной вены и паренхимы. В группе STE окрашивание гепатоцитов, окружающих эти области, было умеренным.Анализ TERT IHC выявил сильное окрашивание в группе ST вокруг портального поля, центральной вены и паренхимы, в то время как упражнения ослабляли увеличение экспрессии гена TERT (умеренное окрашивание в группе STE). Таким образом, наши результаты показали, что упражнения оказывают положительное влияние на экспрессию гена PTEN, как показано на рис.

Иммуногистохимическое окрашивание белков PTEN и TERT во всех экспериментальных группах (шкала, 50 мкм мкм). Группы крыс были следующими: i) контрольная (C) группа; ii) группу обработки пропилена (PG); iii) группу обработки станозололом (ST); iv) группа лечения и упражнений с пропиленом (PGE); и v) группа лечения станозололом и физических упражнений (STE).PTEN, белок-гомолог фосфатазы и тензина, TERT, обратная транскриптаза теломеразы.

Таблица VI

Результаты подсчета для иммуногистохимических анализов PTEN и TERT.

Обработка пропиленгликоль
Группы Оценка PTEN IHC a Оценка TERT IHC a
Контроль + +
+ ++ ++
Лечение станозололом + +++
Лечение пропиленгликолем и упражнения + +
Лечение станозололом и упражнения ++ Обсуждение

Станозолол — широко используемый и наиболее мощный ААС, ответственный за ряд побочных эффектов, включая сердечно-сосудистые, репродуктивные, поведенческие эффекты и гепатотоксичность (17).Насколько нам известно, это первое исследование, посвященное изучению вызванных станозололом молекулярных путей активности теломеразы в печени крыс и любых соответствующих эффектов физических упражнений. Станозолол вызывает внутрипеченочные структурные изменения с холестазом и увеличивает риск ГЦК (37). Кроме того, было обнаружено, что злоупотребление ААС в целом является причиной гепатоцеллюлярных аденом (12,39). Несмотря на то, что механизмы, ответственные за вызванную станозололом гепатотоксичность, еще четко не идентифицированы, пролиферативные эффекты на клетки печени могут играть центральную роль в наблюдаемой гепатотоксичности (12,40,41).В нашем предыдущем исследовании мы продемонстрировали, что станозолол оказывает повреждающее действие на ДНК в лимфоцитах периферической крови, что, вероятно, связано с изменениями активности теломеразы (35). Хотя известно, что различные факторы окружающей среды повышают и понижают активность теломеразы, влияние физических упражнений на активность теломеразы еще не было четко идентифицировано (42). Было показано, что на длину теломер и активность теломеразы влияет несколько факторов, включая окислительный стресс, психологический стресс и социально-экономический статус.Одним из возможных механизмов укорочения теломер является окислительный стресс из-за продуктов окисления оснований ДНК (8-OHdG) в гуаниновых или белковых аддуктах (43,44). Согласно недавним исследованиям, повышенная активность теломеразы обнаруживается почти в 90% случаев рака человека и в 80% случаев ГЦК. Кроме того, хорошо задокументировано, что большинство здоровых клеток не проявляют активности теломеразы (19,20,45). Результаты этого исследования продемонстрировали повышенные уровни относительной активности теломеразы в тканях печени в группе ST, в соответствии с нандролоном, другим хорошо известным ASS, который продемонстрировал аналогичные эффекты за счет увеличения активности теломеразы в зависимости от дозы как при ткань сердца и моноциты периферической крови (2,46).Это может представлять собой компенсирующий механизм восстановления на тканевом уровне, в то время как повышенные уровни циркулирующей активности теломеразы могут указывать на системное воспаление. Связь повышенной активности и экспрессии теломеразы с пролиферативными эффектами в этом исследовании вряд ли возникла из-за короткого времени воздействия (28 дней). В целом механизмы, лежащие в основе влияния ААС на активность теломеразы, не выяснены и остаются практически неизвестными.

TERT представляет собой каталитическую субъединицу теломеразы, которая играет роль в ее регуляции на уровне транскрипции.Сообщалось, что мутации TERT связаны с переходом от аденомы к карциноме в печени (47). Следовательно, изменения в регуляции и экспрессии TERT играют важную роль при ГЦК (48). Было показано, что ген-супрессор опухолей PTEN отрицательно коррелирует с белком TERT человека в тканях HCC (21). Следовательно, PTEN и TERT играют противоположные роли в канцерогенезе. Сообщалось, что PTEN косвенно регулирует активность TERT через путь PI3K-PKB / Akt при ГЦК человека (21).Согласно результатам настоящего исследования, не наблюдалось значительных изменений уровней экспрессии PTEN между группами. Однако экспрессия гена TERT была значительно увеличена при лечении ST. Упражнения обращали вспять увеличение экспрессии TERT, вызванное станозололом, особенно в паренхиме, где сообщается о метаболической зональности: высвобождение глюкозы из гликогена и посредством глюконеогенеза, утилизация аминокислот и детоксикация аммиака, защитный метаболизм, образование желчи и синтез определенных белков плазмы, такие как альбумин и фибриноген, происходят в основном в перивенальной зоне, тогда как утилизация глюкозы, метаболизм ксенобиотиков и образование других белков плазмы, таких как альфа-1-антитрипсин или альфа-фетопротеин, происходят преимущественно в перивенальной зоне (49,50).

В этом исследовании уровни 3′-гидроксистанозолола и 16-β-гидроксистанозолола, основных метаболитов станозолола, были определены в образцах ткани печени животных, получавших станозолол, и была определена доза-ответная связь между активностью теломеразы и TERT / PTEN. экспрессия генов была определена. Измеренные уровни 3′-гидроксистанозолола в группах ST и STE были связаны с процентной относительной теломеразной активностью, тогда как для уровней станозолола или 16-β-гидроксистанозолола никакой связи не наблюдалось.Это может быть связано с тем, что 3′-гидроксистанозолол является наиболее мощным метаболитом станозолола (2,51).

Несколько исследований показали, что физические упражнения увеличивают активность теломеразы в различных типах клеток (52,53). Однако, насколько нам известно, на сегодняшний день нет доступных исследований, изучающих влияние станозолола на активность теломеразы в присутствии / отсутствии упражнений, за исключением нашего предыдущего исследования, которое было сосредоточено на циркуляции активности теломеразы в мононуклеарных клетках периферической крови (PBMCs). ) (35).Наши результаты показали повышение активности теломеразы и экспрессии TERT в ткани печени, что может быть связано либо с повышенным риском пролиферации из-за лечения станозололом (10), что маловероятно для такого короткого периода воздействия, либо может представлять собой механизм противодействия ( 54). Упражнения обращают вспять вызванное станозололом повышение активности теломеразы. Ряд исследований подтвердил, что упражнения обладают гепатопротекторным действием. Huang и др. продемонстрировали, что 12-недельная программа упражнений по плаванию подавляла маркеры старения и подавляла регуляцию медиаторов воспаления в тканях печени у крыс, вызванных D-галактозой (55).Yi и др. продемонстрировали, что как острые, так и хронические упражнения оказывают профилактическое действие на печень крыс с диабетом 2 типа (56). С другой стороны, сообщалось, что физические упражнения увеличивают количество печеночных ферментов у людей (57), и существуют опасения относительно влияния физических упражнений на портальную гипертензию у пациентов с циррозом печени (58).

В заключение, станозолол индуцирует активность теломеразы на молекулярном уровне, и упражнения обращают эту индукцию, по крайней мере, в отношении экспрессии TERT.Это может отражать преждевременное старение тканей из-за снижения активности теломеразы. Необходимы дальнейшие исследования для изучения механизмов, с помощью которых упражнения могут быть использованы для предотвращения неблагоприятного воздействия станазолола на здоровье, и для выяснения молекулярных гепатоцеллюлярных механизмов побочных эффектов, вызванных станозололом.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить доктора Алегакиса Афанасиоса за его ценную помощь в статистических советах и ​​комментариях.

Аббревиатуры

WADA HCC 910 910 мононуклеарные клетки периферической крови 9022 Финансирование

Это исследование было поддержано Научно-исследовательскими проектами Стамбульского университета (грант №54169-24416).

Доступность данных и материалов

Наборы данных, использованные и / или проанализированные в ходе текущего исследования, доступны у соответствующего автора по разумному запросу.

Вклад авторов

EO, MK, AMT, BA и DAS разработали и разработали исследование, написали рукопись и внесли ценные предложения при ее подготовке. MK, TK, PF и MNT выполнили LC-MS анализ, оценку активности теломеразы и экспрессии генов; CT, PDS и DT выполнили статистический анализ и интерпретацию данных.EO, MK и BA внесли свой вклад в заявку на финансирование. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Одобрение этики и согласие на участие

Эксперименты на животных были одобрены Комитетом по этике экспериментов на животных Стамбульского университета, HADYEK (номер разрешения 2013/100).

Согласие на публикацию

Не применимо.

Конкурирующие интересы

DAS является главным редактором журнала, но не принимал личного участия в процессе рецензирования или какого-либо влияния с точки зрения вынесения окончательного решения по этой статье.

Ссылки

1. Balcells G, Matabosch X, Ventura R. Обнаружение метаболитов O- и N-сульфата станозолола и их оценка в качестве дополнительных маркеров в допинг-контроле. Анальный тест на наркотики. 2017; 9: 1001–1010. DOI: 10.1002 / dta.2107. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 2. Цицимпико Ц., Василаки Ф., Царухас К., Фрагкиадаки П., Царди М., Гутзурелас Н., Непка Ц., Калогераки А., Херетис I, Эпитропаки З. и др. Нефротоксичность у кроликов после длительного приема нандролона деканоата. Toxicol Lett.2016; 259: 21–27. DOI: 10.1016 / j.toxlet.2016.06.1122. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Всемирное антидопинговое агентство Список запрещенных веществ и методов за 2017 год. https://www.wada-ama.org/. По состоянию на 14 февраля 2018 г. 4. Kioukia-Fougia N, Georgiadis N, Tsarouhas K, Vasilaki F, Fragiadaki P, Meimeti E, Tsitsimpikou C. Синтетические и натуральные пищевые добавки: «союзники» здоровья или риски для общественного здоровья. Недавние открытия Pat Inflamm Allergy Drug. 2017; 10: 72–85. DOI: 10,2174 / 1872213X10666160

3700.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Цицимпику С., Хрисостому Н., Папалексис П., Царухас К., Цацакис А., Джамуртас А. Использование пищевых добавок спортсменами-любителями в Афинах, Греция. Int J Sport Nutr Exerc Exerc Metab. 2011; 21: 377–384. DOI: 10.1123 / ijsnem.21.5.377. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Саго Д., Мольде Х., Андреассен С.С., Торсхайм Т., Паллесен С. Глобальная эпидемиология использования анаболических андрогенных стероидов: метаанализ и мета-регрессионный анализ. Ann Epidemiol. 2014; 24: 383–398.DOI: 10.1016 / j.annepidem.2014.01.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Ампуэро Дж., Гарсия Э.С., Лоренцо М.М., Калле Р, Ферреро П., Гомес МР. Вызванный станозололом мягкий холестаз. Гастроэнтерол Гепатол. 2014; 37: 71–72. DOI: 10.1016 / j.gastrohep.2013.09.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Баусерман Л.Л., Сарителли А.Л., Герберт П.Н. Влияние кратковременного приема станозолола на липопротеины сыворотки крови при недостаточности печеночной липазы. Обмен веществ. 1997; 46: 992–996. DOI: 10.1016 / S0026-0495 (97)

AAS анаболический андрогенный стероид
TERT теломераза обратная транскриптаза
TERC теломераза РНК компонент
Агентство по борьбе с теломеразой
гепатоцеллюлярная карцинома
PG пропиленгликоль
IS внутренний стандарт
APCI химическая ионизация при атмосферном давлении 9015 9015
-5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9.Эль-Сераг HB, Крамер Дж., Дуан З., Канвал Ф. Расовые различия в прогрессировании цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы у ветеранов, инфицированных ВГС. Am J Gastroenterol. 2014; 109: 1427–1435. DOI: 10.1038 / ajg.2014.214. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Hansma P, Diaz FJ, Njiwaji C. Смертельный разрыв кисты печени из-за использования анаболических стероидов: презентация случая. Am J Forensic Med Pathol. 2016; 37: 21–22. DOI: 10.1097 / PAF.0000000000000218. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Харкин К.Р., Коуэн Л.А., Эндрюс Г.А., Басараба Р.Дж., Фишер Дж.Р., Дебоус Л.Дж., Руш Дж.К., Гульельмино М.Л., Кирк, Калифорния.Гепатотоксичность станозолола у кошек. J Am Vet Med Assoc. 2000. 217: 681–684. DOI: 10.2460 / javma.2000.217.681. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Сокас Л., Зумбадо М., Перес-Лусардо О., Рамос А., Перес С., Эрнандес Дж. Р., Боада Л. Д.. Гепатоцеллюлярные аденомы, связанные со злоупотреблением анаболическими андрогенными стероидами у бодибилдеров: отчет о двух случаях и обзор литературы. Br J Sports Med. 2005; 39: e27. DOI: 10.1136 / bjsm.2004.013599. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Стимак Д., Милич С., Динтиньяна Р.Д., Ковач Д., Ристич С.Андрогенный / анаболический стероид-индуцированный токсический гепатит. J Clin Gastroenterol. 2002. 35: 350–352. DOI: 10.1097 / 00004836-200210000-00013. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Дешмук Н.И., Захар Г., Петроци А., Секели А.Д., Баркер Дж., Нотон Д.П. Определение станозолола и 3′-гидроксистанозолола в шерсти, моче и сыворотке крыс с помощью тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией. Chem Cent J. 2012; 6: 162. DOI: 10.1186 / 1752-153X-6-162. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Mateus-Avois L, Mangin P, Saugy M.Использование ионной газовой хроматографии-множественной масс-спектрометрии для обнаружения и подтверждения следовых уровней 3′-гидроксистанозолола в моче для допинг-контроля. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2005; 816: 193–201. DOI: 10.1016 / j.jchromb.2004.11.033. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Бюттнер А., Тим Д. Побочные эффекты анаболических андрогенных стероидов: патологические данные и взаимосвязь между структурой и активностью. Handb Exp Pharmacol. 2010; 195: 459–484. DOI: 10.1007 / 978-3-540-79088-4_19.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Рентукас Э., Царухас К., Капланис I, Короу Э, Николау М., Марафонитис G, Коккиноу С., Халиассос А., Мамалаки А., Куретас Д. и др. Связь активности теломеразы в МКПК с маркерами воспаления и эндотелиальной дисфункции у пациентов с метаболическим синдромом. PLoS One. 2012; 7: e35739. DOI: 10.1371 / journal.pone.0035739. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Zhou X, Zhu H, Lu J. Экспрессия генов PTEN и hTERT и корреляция с гепатоцеллюлярной карциномой человека.Pathol Res Pract. 2015; 211: 316–319. DOI: 10.1016 / j.prp.2014.11.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Ян Ц., Ли С., Ван М., Чанг А.К., Лю И, Чжао Ф, Сяо Л., Хань Л., Ван Д., Ли С., Ву Х. PTEN подавляет онкогенную функцию AIB1 за счет снижения стабильности его белка с помощью механизма, включающего Fbw7 альфа. . Молочный рак. 2013; 12:21. DOI: 10.1186 / 1476-4598-12-21. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Jung S, Li C, Jeong D, Lee S, Ohk J, Park M, Han S, Duan J, Kim C, Yang Y и др.Онкогенная функция p34SEI-1 через NEDD4 1 опосредована убиквитинизацией / деградацией PTEN и активацией пути PI3K / AKT. Int J Oncol. 2013; 43: 1587–1595. DOI: 10.3892 / ijo.2013.2064. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. ОЭСР. Руководящий документ по распознаванию, оценке и использованию клинических признаков в качестве гуманных конечных точек для экспериментальных животных, используемых при оценке безопасности. ОЭСР; Париж: 2000. [Google Scholar] 26. Черичи Камарго IC, Баррейрос де Соуза Р., Фатима Паккола Мескита С., Чуффа Л.Г., Фрей Ф.Гистология яичников и оценка фолликулов у самок крыс, получавших деканоат нандролона и подвергавшихся физическим нагрузкам. Acta Biol Hung. 2009. 60: 253–261. DOI: 10.1556 / ABiol.60.2009.3.2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. де Алмейда Чуффа Л.Г., де Соуза Р.Б., Фрей Ф., де Фатима Паккола Мескита С., Камарго IC. Деканоат нандролона и физическое усилие: гистологическая и морфометрическая оценка в матке взрослой крысы. Анат Рек (Хобокен) 2011; 294: 335–341. DOI: 10.1002 / ar.21314. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28.Гопинатан С., О’Нил Э, Родригес Л.А., Чемпион Р., Филлипс М., Нуралдин А., Вендт М., Уилсон Эйдж, Крамер Дж. Токсикология наполнителей in vivo, обычно используемых при открытии лекарств на крысах. J Pharmacol Toxicol Methods. 2013; 68: 284–295. DOI: 10.1016 / j.vascn.2013.02.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Healing G, Sulemann T, Cotton P, Harris J, Hargreaves A, Finney R, Kirk S, Schramm C, Garner C, Pivette P, Burdett L.Данные о безопасности 19 транспортных средств для использования в доклинических исследованиях на грызунах в течение 1 месяца: Введение гидроксипропил-β-циклодекстрина вызывает почечную токсичность.J Appl Toxicol. 2016; 36: 140–150. DOI: 10.1002 / jat.3155. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Aye M, Di Giorgio C, De Mo M, Botta A, Perrin J, Courbiere B. Оценка генотоксичности трех криопротекторов, используемых для витрификации человеческих ооцитов: диметилсульфоксида, этиленгликоля и пропиленгликоля. Food Chem Toxicol. 2010; 48: 1905–1912. DOI: 10.1016 / j.fct.2010.04.032. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Бертло-Рику А., Перрин Дж, ди Джорджио С., де Мео М., Ботта А., Курбьер Б. Оценка генотоксичности 1,2-пропандиола (PrOH) на ооциты мышей с помощью анализа комет.Fertil Steril. 2011; 96: 1002–1007. DOI: 10.1016 / j.fertnstert.2011.07.1106. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Каннингем Р.Л., МакГиннис М.Ю. Физическая провокация самцов крыс, подвергшихся воздействию пубертатных анаболических андрогенных стероидов, вызывает агрессию по отношению к самкам. Horm Behav. 2006; 50: 410–416. DOI: 10.1016 / j.yhbeh.2006.05.002. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Matrisciano F, Modafferi AM, Togna GI, Barone Y, Pinna G, Nicoletti F, Scaccianoce S. Повторное лечение анаболическими андрогенными стероидами вызывает обратимые антидепрессантами изменения гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси, уровней BDNF и поведения.Нейрофармакология. 2010. 58: 1078–1084. DOI: 10.1016 / j.neuropharm.2010.01.015. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Tucci P, Morgese MG, Colaianna M, Zotti M, Schiavone S, Cuomo V, Trabace L. Нейрохимические последствия злоупотребления стероидами: моноаминергические изменения, вызванные станозололом. Стероиды. 2012; 77: 269–275. DOI: 10.1016 / j.steroids.2011.12.014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Кара М., Озкагли Е., Фрагкиадаки П., Котил Т., Стивактакис П. Д., Спандидос Д. А., Цацакис А. М., Альпертунга Б. Определение повреждения ДНК и активности теломеразы у крыс, получавших станозолол.Exp Ther Med. 2017; 13: 614–618. DOI: 10.3892 / etm.2016.3974. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Цицимпико Ц., Цацаракис М., Фрагкиадаки П., Коваци Л., Стивактакис П., Калогераки А., Куретас Д., Цацакис А. М.. Гистопатологические поражения, окислительный стресс и генотоксические эффекты в печени и почках после длительного воздействия диазинона и пропоксура на кроликов. Токсикология. 2013; 307: 109–114. DOI: 10.1016 / j.tox.2012.11.002. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Сольбах П., Поттхофф А., Раатшен Х.Дж., Суда Б., Леманн Ю., Шнайдер А., Гебель М.Дж., Маннс М.П., ​​Фогель А.Гепатоцеллюлярная карцинома с положительным тестостерон-рецептором у 29-летнего бодибилдера с историей злоупотребления анаболическими андрогенными стероидами: отчет о болезни. BMC Gastroenterol. 2015; 15:60. DOI: 10.1186 / s12876-015-0288-0. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Ливак К.Дж., Шмитген Т.Д. Анализ данных относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2 (-4Delta Delta C (T)). Методы. 2001; 25: 402–408. DOI: 10.1006 / meth.2001.1262. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39.Кеслер Т., Сандху Р.С., Кришнамурти С. Гепатология: гепатоцеллюлярная карцинома у молодого человека, вторичная по отношению к злоупотреблению андрогенными анаболическими стероидами. J Gastroenterol Hepatol. 2014; 29: 1852. DOI: 10.1111 / jgh.12809. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Боада Л.Д., Зумбадо М., Торрес С., Лопес А., Диас-Чико Б.Н., Кабрера Дж. Дж., Лусардо ОП. Оценка острых и хронических гепатотоксических эффектов анаболического андрогенного стероида станозолола у взрослых самцов крыс. Arch Toxicol. 1999. 73: 465–472. DOI: 10.1007 / s002040050636.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Канаяма Дж., Хадсон Дж. И., Поуп Х. Дж., Младший. Долгосрочные психиатрические и медицинские последствия злоупотребления анаболическими андрогенными стероидами: надвигающаяся проблема общественного здравоохранения? Зависимость от наркотиков и алкоголя. 2008; 98: 1–12. DOI: 10.1016 / j.drugalcdep.2008.05.004. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 42. Орниш Д., Лин Дж., Чан Дж. М., Эпель Э, Кемп С., Вайднер Дж., Марлин Р., Френда С. Дж., Магбануа М. Дж. М., Даубенмьер Дж. И др. Влияние всесторонних изменений образа жизни на активность теломеразы и длину теломер у мужчин с подтвержденным биопсией раком простаты низкого риска: 5-летнее наблюдение за описательным пилотным исследованием.Ланцет Онкол. 2013; 14: 1112–1120. DOI: 10.1016 / S1470-2045 (13) 70366-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 43. Мишра С., Кумар Р., Малхотра Н., Сингх Н., Дада Р. Мягкий окислительный стресс полезен для поддержания длины теломер сперматозоидов. World J Methodol. 2016; 6: 163–170. DOI: 10.5662 / wjm.v6.i2.163. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44. Zar T, Graeber C, Perazella MA. Распознавание, лечение и профилактика токсичности пропиленгликоля. Semin Dial. 2007. 20: 217–219. DOI: 10.1111 / j.1525-139X.2007.00280.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Djojosubroto MW, Chin AC, Go N, Schaetzlein S, Manns MP, Gryaznov S, Harley CB, Rudolph KL. Антагонисты теломеразы GRN163 и GRN163L подавляют рост опухоли и повышают химиочувствительность гепатомы человека. Гепатология. 2005; 42: 1127–1136. DOI: 10.1002 / hep.20822. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46. Василаки Ф., Цицимпико Ч., Цароухас К., Германакис I, Царди М., Каввалакис М., Озкагли Э., Куретас Д., Цацакис А. М.. Кардиотоксичность у кроликов после длительного приема нандролона деканоата.Toxicol Lett. 2016; 241: 143–151. DOI: 10.1016 / j.toxlet.2015.10.026. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 47. Пилати С., Летузе Э., Нолт Дж. К., Имбо С., Булай А., Кальдераро Дж., Пуссен К., Франкони А., Куши Дж., Моркретт Дж. И др. Геномное профилирование гепатоцеллюлярных аденом позволяет выявить повторяющиеся мутации, активирующие FRK, и механизмы злокачественной трансформации. Раковая клетка. 2014; 25: 428–441. DOI: 10.1016 / j.ccr.2014.03.005. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Юнгерманн К., Кицманн Т. Зонирование паренхиматозного и непаренхиматозного метаболизма в печени.Annu Rev Nutr. 1996. 16: 179–203. DOI: 10.1146 / annurev.nu.16.070196.001143. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Юнгерманн К. Метаболическое зонирование паренхимы печени. Semin Liver Dis. 1988. 8: 329–341. DOI: 10,1055 / с-2008-1040554. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 51. Сальвадор Дж. П., Санчес-Баеза Ф, Марко М. П.. Одновременное иммунохимическое определение станозолола и основного метаболита человека, 3′-гидроксистанозолола, в образцах мочи и сыворотки крови. Анальная биохимия. 2008; 376: 221–228. DOI: 10.1016 / j.ab.2008.02.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52. Чилтон В.Л., Маркес Ф.З., Вест Дж., Канноуракис Дж., Берзиньш С.П., О’Брайен Б.Дж., Чарчар Ф.Дж. Острая физическая нагрузка приводит к регуляции генов, связанных с теломерами, и экспрессии микроРНК в иммунных клетках. PLoS One. 2014; 9: e. DOI: 10.1371 / journal.pone.00. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53. Ludlow AT, Gratidão L, Ludlow LW, Spangenburg EE, Roth SM. Острая физическая нагрузка активирует p38 MAPK и увеличивает экспрессию генов, защищающих теломеры, в сердечной мышце.Exp Physiol. 2017; 102: 397–410. DOI: 10.1113 / EP086189. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Вардавас А.И., Стивактакис П.Д., Цацаракис М.Н., Фрагкиадаки П., Василаки Ф., Царди М., Дацери Г., Циаусис Дж., Алегакис А.К., Цицимпику С. и др. Длительное воздействие циперметрина и пиперонилбутоксида вызывает воспаление печени и почек и индуцирует генотоксичность у новозеландских белых кроликов-самцов. Food Chem Toxicol. 2016; 94: 250–259. DOI: 10.1016 / j.fct.2016.06.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 55.Хуан С.К., Чианг В.Д., Хуанг В.К., Хуанг С.Й., Сюй М.К., Лин В.Т. Гепатопротекторные эффекты упражнений по плаванию на крысиной модели индуцированного D-галактозой старения. Evid Based Complement Alternat Med. 2013; 2013: 275431. DOI: 10.1155 / 2013/275431. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 56. Yi X, Cao S, Chang B, Zhao D, Gao H, Wan Y, Shi J, Wei W., Guan Y. Влияние острых и хронических упражнений на сигнальный путь лептин-AMPK-ACC в печени у крыс с диабетом 2 типа . J Diabetes Res. 2013; 2013: 946432.DOI: 10.1155 / 2013/946432. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 57. Петтерссон Дж., Хиндорф Ю., Перссон П., Бенгтссон Т., Мальмквист Ю., Веркстрём В., Экелунд М. Мышечные упражнения могут вызывать крайне патологические тесты функции печени у здоровых мужчин. Br J Clin Pharmacol. 2008. 65: 253–259. DOI: 10.1111 / j.1365-2125.2007.03001.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 58. Brustia R, Savier E, Scatton O. Физические упражнения у пациентов с циррозом: к реабилитации в листе ожидания трансплантации печени.Систематический обзор и метаанализ. Клин Рес Гепатол Гастроэнтерол. 2017 ноябрь 18; Epub впереди печати. [PubMed] [Google Scholar]

Прием станозолола в сочетании с упражнениями приводит к снижению активности теломеразы, возможно, связанному со старением печени

Int J Mol Med. 2018 июл; 42 (1): 405–413.

, # 1, * , # 1, * , 2 , 3 , 3 , 4 , 3 , 3 , 5 , 3 и 1

Эрен Озкагли

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета

Мехтап Кара

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета

Тугба Котил

2 Кафедра гистологии и эмбриологии медицинского факультета Стамбульского университета, Стамбул 34116, Турция

Персефони Фрагкиадаки

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Манолис Н.Цацаракис

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Кристина Цицимпику

4 Государственная химическая лаборатория Греции, 11521 Афины

Polychronis D. Stivaktakis

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Димитриос Цукалас

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Деметриос А.Спандидос

5 Лаборатория клинической вирусологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион, Греция

Аристидес М. Цацакис

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион

Букет Альпертунга

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета и

1 Кафедра фармацевтической токсикологии фармацевтического факультета и

2 Кафедра гистологии и эмбриологии медицинского факультета Стамбульского университета, Стамбул 34116, Турция

3 Лаборатория судебной медицины и токсикологии, Медицинский факультет, Университет Крита, 71003 Ираклион

4 Общая химическая государственная лаборатория Греции, 11521 Афины

5 Лаборатория клинической вирусологии Медицинского факультета Критского университета, 71003 Ираклион, Греция

# Внесен равный вклад.

Для корреспонденции: профессору Букету Альпертунга, кафедра фармацевтической токсикологии, фармацевтический факультет, Стамбульский университет, Беязит, Стамбул 34116, Турция, электронная почта: [email protected]Профессору Аристидесу М. Цацакису, Лаборатория судебной медицины и токсикологии, Медицинская школа, Университет Крита, ПО Box 1393, 71003 Heraklion, Greece, E-mail: [email protected]

* Внесено поровну

Получено 28 февраля 2018 г .; Принято 11 апреля 2018 г.

Эту статью цитировали в других статьях в PMC.
Заявление о доступности данных

Наборы данных, использованные и / или проанализированные в ходе текущего исследования, доступны у соответствующего автора по разумному запросу.

Реферат

Анаболические вещества — это допинговые вещества, которые обычно используются в спорте. Станозолол, 17α-алкилированное производное тестостерона, широко используется спортсменами и бодибилдерами. Некоторые медицинские и поведенческие побочные эффекты связаны со злоупотреблением анаболическими андрогенными стероидами (ААС), в то время как печень остается наиболее узнаваемым органом-мишенью.В настоящем исследовании изучалось влияние на печень введения станозолола крысам в высоких дозах, напоминающих дозы, применяемые для допинга, в присутствии или отсутствии упражнений. Станозолол и его метаболиты, 16-β-гидроксистанозолол и 3′-гидроксистанозолол, были обнаружены в печени крыс с помощью жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС). Активность теломеразы, которая участвует в клеточном старении и онкогенезе, была обнаружена путем исследования уровней экспрессии обратной транскриптазы теломеразы (TERT) и фосфатазы и гомолога тензина (PTEN) в печени крыс, получавших станозолол.Станозолол индуцировал теломеразную активность на молекулярном уровне в ткани печени крыс, и упражнения обращали эту индукцию, отражая возможное преждевременное старение ткани печени. На экспрессию гена PTEN в печени крыс практически не влияли ни упражнения, ни введение станозолола.

Ключевые слова: станозолол, фосфатаза и гомолог тензина, теломеразная обратная транскриптаза, теломеразная активность, 16-β-гидроксистанозолол, 3′-гидроксистанозолол

Введение

Станозолол является анаболическим анаболическим анаболиком, повышающим эффективность (AAS).Среди всех ААС станозолол является одним из наиболее часто используемых стероидов профессиональными спортсменами и молодыми людьми для улучшения внешнего вида и работоспособности. Станозолол представляет собой 17α-алкилированное производное тестостерона с анаболическими и высокими андрогенными свойствами (1,2), и его использование в спорте запрещено Всемирным антидопинговым агентством (WADA) (3).

В прошлом ААС использовались только элитными спортсменами и бодибилдерами для целей допинга. Однако в настоящее время даже молодые люди злоупотребляют ААС в супрафизиологических дозах для улучшения внешнего вида (4,5).Сообщается, что станозолол является одним из наиболее часто используемых ААС (6), и он отвечает за несколько медицинских и поведенческих побочных эффектов, являясь признанным фактором риска заболеваний печени как у экспериментальных животных, так и у людей (7-13). . Станозолол широко биотрансформируется ферментативными путями в печени. Сообщалось, что основными метаболитами станозолола являются 3′-гидроксистанозолол, 4-β-гидроксистанозолол и 16-β-гидроксистанозолол (14,15). В целом, ААС проявляют свои эффекты посредством нескольких различных механизмов, таких как модуляция экспрессии рецепторов андрогенов (16).Побочные эффекты, связанные с печенью, чаще связаны с 17α-алкильными производными ААС и, как сообщается, не связаны с путем введения. Однако точные механизмы еще полностью не изучены (17).

Теломеры представляют собой гетерохроматиновые нуклеопротеидные комплексы на концах хромосом, участвующие в ряде основных биологических функций (). Известно, что теломеры играют ключевую роль в формировании и прогрессировании до 90% злокачественных новообразований. Теломеразная активность играет ключевую роль в клеточном старении и онкогенезе (18).Повышенная активность теломеразы обнаруживается в большинстве случаев рака человека (19). Теломераза — это рибонуклеопротеин, отвечающий за поддержание длины теломер. Ядро теломеразы состоит из двух компонентов: каталитической обратной транскриптазы теломеразы (TERT) и компонента теломеразной РНК (TERC) ().

Теломеры — это защитные колпачки хромосом (59) (адаптировано с разрешения Shutterstock).

Теломераза добавляет теломерные повторы (TTAGGG) к 3′-гидроксильному концу ведущей цепи теломеры.Компонент РНК служит шаблоном для добавления нуклеотидов. Это теломеразный комплекс, который состоит из компонента обратной транскриптазы (TERT), компонента РНК (TERC), белка дискерина и других связанных белков (NHP2, NOP10 и GAR1).

Уровень экспрессии мРНК TERT был изучен в качестве биомаркера, поскольку было продемонстрировано, что он является лимитирующим детерминантом активности теломеразы при различных злокачественных новообразованиях (20). Ген фосфатазы и белка-гомолога тензина (PTEN) кодирует белок-супрессор опухоли с фосфатазной активностью.Сообщается, что частота гетерозиготности PTEN при гепатоцеллюлярной карциноме человека (ГЦК) человека снижается до 33% (21). PTEN участвует в подавлении активности теломеразы посредством регуляции активности TERT (22). PTEN является белком-негативным регулятором сигнального пути фосфоинозитид-3-киназы / AKT механизма регуляции выживания клеток и индуцирует клеточный апоптоз (23). PTEN предотвращает активацию AKT посредством дефосфорилирования фосфатидилинозитол (3,4,5) -трисфосфата (PIP3) до фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфата (PIP2).Подавление PTEN связано с онкогенной активностью в клетке (24).

Целью этого исследования было изучить, по крайней мере, насколько нам известно, роль теломеразы в вызванной станозололом гепатотоксичности путем изучения корреляции между активностью теломеразы и уровнями экспрессии гена PTEN-TERT. Также исследовали биоаккумуляцию станозолола и двух его основных метаболитов (3′-гидроксистанозолол и 16-β-гидроксистанозолол) в ткани печени, а также его связь с активностью теломеразы.

Материалы и методы

Эксперименты на животных

Всего было получено 34 крысы-самца Sprague-Dawley в возрасте 8 недель и помещено в помещения для лабораторных животных Департамента лабораторных наук о животных Института экспериментальной медицины Стамбульского университета. (Стамбул, Турция) в соответствии с Комитетом по этике экспериментов на животных Стамбульского университета, HADYEK (номер утверждения 2013/100). Крысы были разделены на 5 групп следующим образом: i) контрольная (C) группа; ii) группу обработки пропилена (PG); iii) группу обработки станозололом (ST); iv) группа лечения и упражнений с пропиленом (PGE); и v) группа лечения станозололом и физических упражнений (STE).Животных размещали по 4 животных в одной металлической клетке и содержали в 12-часовом цикле темнота / свет при температуре 20–23 ° C. Количество крыс в экспериментальной группе, уход за крысами, обращение и используемые экспериментальные процедуры соответствовали руководящим принципам HADYEK. Вес крыс при покупке регистрировали и использовали для корректировки дозы (). Гуманными конечными точками, определенными в нашем исследовании, были боль, дистресс, неправильная осанка и судороги в соответствии с Руководящим документом ОЭСР (25). Ни у одного животного не было клинических признаков гуманных конечных точек, которые оправдывали бы их жертвоприношение до окончания эксперимента.Экспериментальный план исследования представлен в.

Таблица I

Вес крыс при покупке.

95 2700 95 2700 95 27 4 264
Количество крыс Вес крыс при покупке (г)
Контроль
1 259
2 268
268
268
4 264
5 282
Пропиленгликоль
1 255
2 276
276
261
5 272
Пропиленгликоль и упражнения
1 262
2 276
3
5 278
6 263 902 00
7 260
8 277
Стероидная группа
1 280
2 265
4 272
5 277
6 272
7 263
8 290
275
2 277
3 290
4 263
5 280
28 7
8 273

Таблица II

Experi мысленный дизайн исследования.

Группы Количество крыс Подкожные инъекции Упражнения
Контроль 5 Без инъекций Без упражнений
Обработка пропиленгликолем 5203 мл / кг пропиленгликоля в день Без упражнений
Лечение станозололом 8 5 мг / кг станозолола в день Без упражнений
Лечение пропиленгликолем и упражнения 8 1 мл / кг пропиленгликоля в день Плавание: 20 мин / день, 5 дней в неделю
Лечение станозололом и упражнения 8 5 мг / кг станозолола в день Плавание: 20 мин / день, 5 дней / неделя

Плавание было выбрано в качестве модели упражнения (26,27) и началось за 1 неделю до схемы лечения, чтобы мальчики адаптироваться.Крыс плавали в прямоугольном полиэтиленовом резервуаре (длина 120 см × глубина 50 см × ширина 43 см), наполненном водой при температуре 29 ± 1 ° C. Во время экспериментов в течение 20 минут в день, 5 дней в неделю крыс подвергали плаванию после периода адаптации в течение 1 недели. Животных адаптировали к процессу плаванием в воде в течение 5 минут в течение первых 2 дней, а затем время плавания постепенно увеличивали до 5 минут в день до конечной продолжительности 20 минут на 5 день.

Пропиленгликоль (PG ) (Tekkim, Стамбул, Турция) использовался в качестве носителя для станозолола (Sigma, Schnelldorf, Германия).Известно, что PG является хорошим проводником для экспериментальных исследований in vivo (28,29). Однако сообщалось, что высокие концентрации PG могут вызывать повреждение ДНК в эукариотических клетках и ооцитах мышей (30,31). Подкожное введение было выбрано, а дозы были выбраны в соответствии с предыдущими исследованиями (32–34). Группы, подвергшиеся воздействию, получали однократную дозу PG (1 мл / кг) и ST (5 мл / кг) подкожно в течение 5 дней в неделю.

После 28 дней лечения животным была проведена легкая анестезия с использованием процента 1.9% диэтиловый эфир в анестезиологической камере и эвтаназия путем шейного вывиха, проводимая обученным персоналом. Были собраны образцы ткани печени и разделены на 2 секции. Один срез немедленно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C, а другой фиксировали 10% забуференным формалином и залитым парафином для гистохимического анализа.

Анализ жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС)

Стандарты станозолола, 3′-гидроксистанозолола и 16-β-гидроксистанозолола в концентрациях 0,0.1, 0,25, 0,5 и 1 частей на миллион были приготовлены из стандартных исходных растворов 20 частей на миллион. Туринабол (LGC, Лидс, Великобритания) использовали в качестве внутреннего стандарта (IS) с целевыми ионами m / z 317,25 и m / z 335,25. Калибровочные кривые были получены путем измерения отношения площадей пиков целевых ионов к IS следующим образом: для станозолола m / z 370,4 , 352,3 и 329,35, для 3′-гидроксистанозолола m / z 386,4 , 345,35, для 16-β- гидроксистанозолол m / z 386,4 , 366,3 и 345,35 для IS туринабол () (ион m / z, используемый для количественной оценки, выделен жирным шрифтом).Образцы печени необработанных животных, которые дали отрицательные результаты (

Таблица III

Параметры анализа ЖХ-МС.

4 4 4 9
Агент Rt m / z target m / z m / z Mw
4α-гидроксистанозолол 386 345,35
4β-гидроксистанозолол 9,3 386,4 345,35
3-гидроксистанозол5 10200
16-β-гидроксистанозолол 10,45 386,4 366,3 345,35 344,49
Станозолол 12.95 370,4 352,3 329,35 328,49
Туринабол (IS) 13,9 317,25 335,25 334,9
механическая гомогенизация на высокой скорости в течение 2 мин с 1,0 мл воды. Гомогенаты сильно встряхивали, а затем инкубировали в ультразвуковой бане в течение 10 мин. Затем добавляли 1,5 мл этилацетата и проводили экстракцию аналитов в течение 10 мин.Образцы центрифугировали при 1820 × g в течение 2 мин при 4 ° C. Супернатанты переносили в пустую пробирку и упаривали досуха в атмосфере азота при 30 ° C. После выпаривания добавляли 100 мкл л ацетонитрила и сильно встряхивали. Супернатанты переносили во флаконы, и 10 мкл мкл из них вводили в систему ЖХ-МС для анализа.

Система ЖХ-МС состоит из бинарного насоса ЖХ (Shimadzu Prominence, Киото, Япония), вакуумного дегазатора, автоматического пробоотборника и термостата для колонок.В качестве подвижной фазы был выбран градиент 0,1% муравьиной кислоты в воде (растворитель A) и ацетонитриле (растворитель B). Разделение аналитов было достигнуто на колонке для ВЭЖХ Discovery C18 (250 × 4,6 мм, 5 мкм, м), термостатированной при 30 ° C. Масс-спектрометр (LCMS-2010 EV; Shimadzu Prominence) в сочетании с интерфейсом химической ионизации при атмосферном давлении (APCI) и одиночным квадрупольным масс-фильтром использовался в выбранном положительном режиме ионного мониторинга (SIM). Температура интерфейса, CDL и теплового блока составляла 400, 200 и 200 ° C соответственно.Напряжение детектора составляло 1,5 кВ, поток распыляющего газа составлял 2,5 л / мин, а осушающий газ составлял 0,02 МПа.

Анализ активности теломеразы

Определение активности теломеразы в образцах ткани печени крысы выполняли количественно с использованием набора teloTAGGG telomerase PCR ELISA PLUS (Roche Diagnostic GmbH, Mannheim, Germany). Протокол набора следовал для оценки активности теломеразы, как описано ранее (35,36).

Оценка экспрессии гена

Выделение РНК

проводили из залитых парафином срезов ткани печени крысы с использованием выделения РНК High Pure FFPET (Roche Diagnostic GmbH) в соответствии с инструкциями производителя.Для синтеза кДНК использовали фиксированное количество РНК из каждого образца. кДНК получали с использованием набора Transcriptor First Strand cDNA Synthesis (Roche Diagnostic GmbH) в соответствии с инструкциями производителя. Уровни экспрессии генов TERT и PTEN анализировали с помощью количественной (в реальном времени) полимеразной цепной реакции (кПЦР) с использованием аппарата Light Cycler 480 (Roche Diagnostic GmbH) с анализом каталога Real Time Ready (Roche Diagnostic GmbH) в соответствии с инструкциями производителя. Последовательности праймеров были следующими: PTEN прямой, 5′-AGAACAAGATGCTCAAAAAGGACAA-3 ‘и обратный, 5′-TGTCAGGGTGAGCACAAGAT-3′; TERT вперед, 5’-GACATGGAGAACAAGCTGTTTGC-3 ‘; и наоборот, 5’-ACAGGGAAGTTCACCACTGTC-3 ‘; и GAPDH прямой, 5’-TTCAACGGCACAGTCAAGG-3 ‘и обратный, 5′-CTCAGCACCAGCATCACC-3’.ПЦР-амплификации выполняли в соответствии с инструкциями производителя в трех экземплярах. Реакционную смесь без матрицы кДНК использовали в качестве отрицательного контроля. Уровни экспрессии (2 -ΔΔCt ) рассчитывали, как описано ранее (37,38).

Иммуногистохимический (ИГХ) анализ

ИГХ-анализы были выполнены с использованием наборов для определения Ultra Streptavidin HRP [BioLegend Sig-32248, набор для определения Ultra Streptavidin HRP (Multi-Specification, DAB)] и BioLegend Sig-32250, набор для определения Ultra Streptavidin HRP. (Multi-views, AEC) (BioLegend, San Diego, CA, USA) для уровней экспрессии PTEN и TERT соответственно.Залитые парафином срезы помещали на предметные стекла Superfrost (Menzel-Gläser, Брауншвейг, Германия). После сушки в течение ночи был проведен IHC-анализ PTEN и TERT с использованием метода меченой стрептавидин-биотин-пероксидазы. Слайды обрабатывали ксилолом и регидратировали в растворах этанола возрастающих классов. Извлечение антигена осуществляли путем кипячения предметных стекол в течение 5 мин / 3 раза в цитратном буфере (0,01 М). Для подавления активности эндогенной пероксидазы срезы ткани обрабатывали блокирующим реагентом 1 в течение 15 минут и промывали PBS.Все срезы инкубировали с блокирующим реагентом 2 в течение 5 минут при комнатной температуре, чтобы избежать неспецифического связывания. Инкубации поликлональных антител PTEN (251264) и TERT (250509) (оба от Abbiotec, Aachen, Germany) проводили в течение ночи при 4 ° C с разведениями 1/100. Слайды инкубировали со связывающим реагентом 4, а затем с реагентом для маркировки 5 в течение 20 минут при комнатной температуре. Слайды визуализировали хромогенами DAB и AEC, контрастировали гематоксилином Майера и, наконец, монтировали.Уровни экспрессии PTEN и TERT оценивали под световым микроскопом (Olympus BX40F4; Olympus, Токио, Япония). Анализы TERT и PTEN IHC были классифицированы невооруженным глазом на 4 категории на основе интенсивности окрашивания следующим образом: 0, нет окрашивания; +, слабое окрашивание; ++, умеренное окрашивание; и +++, сильное окрашивание). Анализ проводился с использованием считывающего устройства для одного слайда для минимизации вариабельности из-за субъективной оценки.

Статистический анализ

Средние значения ± стандартное отклонение и медиана были использованы для экспрессии уровней станозолола и его метаболитов, а также для PTEN, TERT и относительной теломеразной активности в процентах.Изменения между двумя значениями были выражены в виде относительных изменений в процентах или иным образом на основе следующей формулы: (фактическое изменение / контрольное значение) * 100%.

Тест Колмогорова-Смирнова с поправкой Лилиэфорса применялся для проверки нормальности непрерывных переменных. R Спирмена применяли для измерения двумерных корреляций между двумя непрерывными переменными (например, относительная активность теломеразы в процентах по сравнению с уровнями экспрессии гена 3′-гидроксистанозолола TERT). Непараметрический тест Краскела-Уоллиса и параметрический односторонний дисперсионный анализ ANOVA применялись для сравнения различий в уровнях станозолола и его метаболитов между исследуемыми группами (контрольная, станозолол, PG и группы упражнений).Непараметрические апостериорные сравнения оценивали с использованием тестов Данна (непараметрические) и HSD Тьюки для параметрических тестов. Для статистического анализа использовалось программное обеспечение IBM SPSS Statistics 21.0 (IBM Corp., Армонк, Нью-Йорк, США). Уровень 0,05 был установлен для принятия или отклонения нулевой гипотезы (статистическая значимость). Размеры выборок для отдельных анализов незначительно различались из-за того, что некоторые недостающие значения возникли из-за условий эксперимента.

Результаты

Тесты на нормальность

Тесты на нормальность показали, что только процентная относительная активность теломеразы сохранила нулевую гипотезу, предполагая нормальное распределение данных (P = 0.137). Все другие протестированные непрерывные переменные, такие как TERT, PTEN и 3′-гидроксистанозолол, не следовали нормальному распределению (P <0,01) (данные не показаны).

Биоаккумуляция станозолола и его метаболитов в тканях печени

Результаты обобщены в. Уровни станозолола и его метаболитов были незначительно выше в группе STE по сравнению с группой ST (P> 0,05).

Таблица IV

Уровни концентрации (нг / мг) станозолола и его метаболитов в группах станозолола (ST) и станозолола в сочетании с упражнениями (STE).

Агент Группа ST (среднее значение ± стандартное отклонение) Группа ST (среднее значение ± стандартное отклонение) Манна-Уитни (значение P) % относительное изменение
Станозолол (нг / мг ) 2,98 ± 1,01 3,89 ± 1,09 0,240 30,5
3′-гидроксистанозолол (нг / мг) 0,34 ± 0,06 0,44 ± 0,18 0,485 29,419 29,4 16-β-гидроксистанозолол (нг / мг) 0.25 ± 0,11 0,32 ± 0,15 0,485 28,0

Оценка активности теломеразы и экспрессии генов

Уровни экспрессии генов PTEN и TERT и относительная относительная активность теломеразы в исследуемых группах представлены в. Значительная разница наблюдалась для экспрессии гена TERT в различных группах (χ 2 = 17,585, df = 4, P <0,001). Основываясь на тесте Данна, упражнения снижали экспрессию TERT на (71,0%; P = 0,001), а введение ST увеличивало экспрессию TERT на (160%; P <0.001) по сравнению с группой PG. Следует отметить, что вызванное станозололом увеличение экспрессии TERT по сравнению с группой станозолола было ограничено (68,0%; P = 0,042) у животных, подвергшихся физической нагрузке. Аналогичная картина наблюдалась и для процентной активности теломеразы. На экспрессию гена PTEN практически не влияли ни упражнения, ни прием станозолола. Следует отметить, что не все значения, представленные выше, показаны в из-за большого количества попарных сравнений.

Таблица V

Уровни экспрессии генов PTEN и TERT (2 -ΔΔCt ) и% относительной активности теломеразы на группу.

9020
Параметры Группы N Среднее SD Сравнение групп
Экспрессия гена PTEN (2 −ΔΔCt ) 5 Контроль Kruskal-Wallis
Обработка пропиленгликолем 5 0,37 0,25 χ 2 = 3,643,
Обработка станозололом 6 0.40 0,42 df = 4, P = 0,456
Лечение пропиленгликолем и упражнения 5 0,98 1,62
Станозолол лечение и упражнения 6
Экспрессия гена TERT (2 −ΔΔCt ) Контроль 5 0,40 0,41 Краскал-Уоллис
Обработка пропиленгликолем 2 78 2,66 χ 2 = 17,585,
Обработка станозололом 6 7,25 1,40 df = 4, P = 0,001
Обработка пропиленгликолем и упражнения 5 0,81 0,96
Лечение станозололом и упражнения 6 2,29 0,97
% относительной активности теломеразы Контроль 5 .30 0,58 ANOVA:
Обработка пропиленгликолем 5 1,92 0,96 F = 3,015, df = 4,
Обработка станозололом 6 6 P = 0,040
Лечение пропиленгликолем и упражнения 5 0,76 0,61
Лечение станозололом и упражнения 6 1.33 0,96

Умеренная корреляция между процентной относительной активностью теломеразы и уровнями экспрессии гена TERT наблюдалась с использованием коэффициента корреляции Спирмена (r = 0,424, P = 0,028) (). Уровни 3′-гидроксистанозолола, измеренные в группах ST и STE, имели тенденцию отрицательно коррелировать с относительной процентной активностью теломеразы (r Спирмена r = -0,566, P = 0,055) (). Не наблюдалось корреляции между какими-либо параметрами, отслеживаемыми с помощью станозолола и 16-β-гидроксистанозолола (данные не показаны).

Диаграмма разброса экспрессии гена TERT и относительной активности теломеразы в процентах. TERT, обратная транскриптаза теломеразы.

Диаграмма рассеяния 3′-гидроксистанозолола и относительная активность теломеразы в процентах.

Анализы ИГХ

Изображения окрашивания ИГХ показаны в, а результаты суммированы в. Уровни экспрессии гена PTEN наблюдались вокруг центральной вены и паренхимы. В группе STE окрашивание гепатоцитов, окружающих эти области, было умеренным.Анализ TERT IHC выявил сильное окрашивание в группе ST вокруг портального поля, центральной вены и паренхимы, в то время как упражнения ослабляли увеличение экспрессии гена TERT (умеренное окрашивание в группе STE). Таким образом, наши результаты показали, что упражнения оказывают положительное влияние на экспрессию гена PTEN, как показано на рис.

Иммуногистохимическое окрашивание белков PTEN и TERT во всех экспериментальных группах (шкала, 50 мкм мкм). Группы крыс были следующими: i) контрольная (C) группа; ii) группу обработки пропилена (PG); iii) группу обработки станозололом (ST); iv) группа лечения и упражнений с пропиленом (PGE); и v) группа лечения станозололом и физических упражнений (STE).PTEN, белок-гомолог фосфатазы и тензина, TERT, обратная транскриптаза теломеразы.

Таблица VI

Результаты подсчета для иммуногистохимических анализов PTEN и TERT.

Обработка пропиленгликоль
Группы Оценка PTEN IHC a Оценка TERT IHC a
Контроль + +
+ ++ ++
Лечение станозололом + +++
Лечение пропиленгликолем и упражнения + +
Лечение станозололом и упражнения ++ Обсуждение

Станозолол — широко используемый и наиболее мощный ААС, ответственный за ряд побочных эффектов, включая сердечно-сосудистые, репродуктивные, поведенческие эффекты и гепатотоксичность (17).Насколько нам известно, это первое исследование, посвященное изучению вызванных станозололом молекулярных путей активности теломеразы в печени крыс и любых соответствующих эффектов физических упражнений. Станозолол вызывает внутрипеченочные структурные изменения с холестазом и увеличивает риск ГЦК (37). Кроме того, было обнаружено, что злоупотребление ААС в целом является причиной гепатоцеллюлярных аденом (12,39). Несмотря на то, что механизмы, ответственные за вызванную станозололом гепатотоксичность, еще четко не идентифицированы, пролиферативные эффекты на клетки печени могут играть центральную роль в наблюдаемой гепатотоксичности (12,40,41).В нашем предыдущем исследовании мы продемонстрировали, что станозолол оказывает повреждающее действие на ДНК в лимфоцитах периферической крови, что, вероятно, связано с изменениями активности теломеразы (35). Хотя известно, что различные факторы окружающей среды повышают и понижают активность теломеразы, влияние физических упражнений на активность теломеразы еще не было четко идентифицировано (42). Было показано, что на длину теломер и активность теломеразы влияет несколько факторов, включая окислительный стресс, психологический стресс и социально-экономический статус.Одним из возможных механизмов укорочения теломер является окислительный стресс из-за продуктов окисления оснований ДНК (8-OHdG) в гуаниновых или белковых аддуктах (43,44). Согласно недавним исследованиям, повышенная активность теломеразы обнаруживается почти в 90% случаев рака человека и в 80% случаев ГЦК. Кроме того, хорошо задокументировано, что большинство здоровых клеток не проявляют активности теломеразы (19,20,45). Результаты этого исследования продемонстрировали повышенные уровни относительной активности теломеразы в тканях печени в группе ST, в соответствии с нандролоном, другим хорошо известным ASS, который продемонстрировал аналогичные эффекты за счет увеличения активности теломеразы в зависимости от дозы как при ткань сердца и моноциты периферической крови (2,46).Это может представлять собой компенсирующий механизм восстановления на тканевом уровне, в то время как повышенные уровни циркулирующей активности теломеразы могут указывать на системное воспаление. Связь повышенной активности и экспрессии теломеразы с пролиферативными эффектами в этом исследовании вряд ли возникла из-за короткого времени воздействия (28 дней). В целом механизмы, лежащие в основе влияния ААС на активность теломеразы, не выяснены и остаются практически неизвестными.

TERT представляет собой каталитическую субъединицу теломеразы, которая играет роль в ее регуляции на уровне транскрипции.Сообщалось, что мутации TERT связаны с переходом от аденомы к карциноме в печени (47). Следовательно, изменения в регуляции и экспрессии TERT играют важную роль при ГЦК (48). Было показано, что ген-супрессор опухолей PTEN отрицательно коррелирует с белком TERT человека в тканях HCC (21). Следовательно, PTEN и TERT играют противоположные роли в канцерогенезе. Сообщалось, что PTEN косвенно регулирует активность TERT через путь PI3K-PKB / Akt при ГЦК человека (21).Согласно результатам настоящего исследования, не наблюдалось значительных изменений уровней экспрессии PTEN между группами. Однако экспрессия гена TERT была значительно увеличена при лечении ST. Упражнения обращали вспять увеличение экспрессии TERT, вызванное станозололом, особенно в паренхиме, где сообщается о метаболической зональности: высвобождение глюкозы из гликогена и посредством глюконеогенеза, утилизация аминокислот и детоксикация аммиака, защитный метаболизм, образование желчи и синтез определенных белков плазмы, такие как альбумин и фибриноген, происходят в основном в перивенальной зоне, тогда как утилизация глюкозы, метаболизм ксенобиотиков и образование других белков плазмы, таких как альфа-1-антитрипсин или альфа-фетопротеин, происходят преимущественно в перивенальной зоне (49,50).

В этом исследовании уровни 3′-гидроксистанозолола и 16-β-гидроксистанозолола, основных метаболитов станозолола, были определены в образцах ткани печени животных, получавших станозолол, и была определена доза-ответная связь между активностью теломеразы и TERT / PTEN. экспрессия генов была определена. Измеренные уровни 3′-гидроксистанозолола в группах ST и STE были связаны с процентной относительной теломеразной активностью, тогда как для уровней станозолола или 16-β-гидроксистанозолола никакой связи не наблюдалось.Это может быть связано с тем, что 3′-гидроксистанозолол является наиболее мощным метаболитом станозолола (2,51).

Несколько исследований показали, что физические упражнения увеличивают активность теломеразы в различных типах клеток (52,53). Однако, насколько нам известно, на сегодняшний день нет доступных исследований, изучающих влияние станозолола на активность теломеразы в присутствии / отсутствии упражнений, за исключением нашего предыдущего исследования, которое было сосредоточено на циркуляции активности теломеразы в мононуклеарных клетках периферической крови (PBMCs). ) (35).Наши результаты показали повышение активности теломеразы и экспрессии TERT в ткани печени, что может быть связано либо с повышенным риском пролиферации из-за лечения станозололом (10), что маловероятно для такого короткого периода воздействия, либо может представлять собой механизм противодействия ( 54). Упражнения обращают вспять вызванное станозололом повышение активности теломеразы. Ряд исследований подтвердил, что упражнения обладают гепатопротекторным действием. Huang и др. продемонстрировали, что 12-недельная программа упражнений по плаванию подавляла маркеры старения и подавляла регуляцию медиаторов воспаления в тканях печени у крыс, вызванных D-галактозой (55).Yi и др. продемонстрировали, что как острые, так и хронические упражнения оказывают профилактическое действие на печень крыс с диабетом 2 типа (56). С другой стороны, сообщалось, что физические упражнения увеличивают количество печеночных ферментов у людей (57), и существуют опасения относительно влияния физических упражнений на портальную гипертензию у пациентов с циррозом печени (58).

В заключение, станозолол индуцирует активность теломеразы на молекулярном уровне, и упражнения обращают эту индукцию, по крайней мере, в отношении экспрессии TERT.Это может отражать преждевременное старение тканей из-за снижения активности теломеразы. Необходимы дальнейшие исследования для изучения механизмов, с помощью которых упражнения могут быть использованы для предотвращения неблагоприятного воздействия станазолола на здоровье, и для выяснения молекулярных гепатоцеллюлярных механизмов побочных эффектов, вызванных станозололом.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить доктора Алегакиса Афанасиоса за его ценную помощь в статистических советах и ​​комментариях.

Аббревиатуры

WADA HCC 910 910 мононуклеарные клетки периферической крови 9022 Финансирование

Это исследование было поддержано Научно-исследовательскими проектами Стамбульского университета (грант №54169-24416).

Доступность данных и материалов

Наборы данных, использованные и / или проанализированные в ходе текущего исследования, доступны у соответствующего автора по разумному запросу.

Вклад авторов

EO, MK, AMT, BA и DAS разработали и разработали исследование, написали рукопись и внесли ценные предложения при ее подготовке. MK, TK, PF и MNT выполнили LC-MS анализ, оценку активности теломеразы и экспрессии генов; CT, PDS и DT выполнили статистический анализ и интерпретацию данных.EO, MK и BA внесли свой вклад в заявку на финансирование. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Одобрение этики и согласие на участие

Эксперименты на животных были одобрены Комитетом по этике экспериментов на животных Стамбульского университета, HADYEK (номер разрешения 2013/100).

Согласие на публикацию

Не применимо.

Конкурирующие интересы

DAS является главным редактором журнала, но не принимал личного участия в процессе рецензирования или какого-либо влияния с точки зрения вынесения окончательного решения по этой статье.

Ссылки

1. Balcells G, Matabosch X, Ventura R. Обнаружение метаболитов O- и N-сульфата станозолола и их оценка в качестве дополнительных маркеров в допинг-контроле. Анальный тест на наркотики. 2017; 9: 1001–1010. DOI: 10.1002 / dta.2107. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 2. Цицимпико Ц., Василаки Ф., Царухас К., Фрагкиадаки П., Царди М., Гутзурелас Н., Непка Ц., Калогераки А., Херетис I, Эпитропаки З. и др. Нефротоксичность у кроликов после длительного приема нандролона деканоата. Toxicol Lett.2016; 259: 21–27. DOI: 10.1016 / j.toxlet.2016.06.1122. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Всемирное антидопинговое агентство Список запрещенных веществ и методов за 2017 год. https://www.wada-ama.org/. По состоянию на 14 февраля 2018 г. 4. Kioukia-Fougia N, Georgiadis N, Tsarouhas K, Vasilaki F, Fragiadaki P, Meimeti E, Tsitsimpikou C. Синтетические и натуральные пищевые добавки: «союзники» здоровья или риски для общественного здоровья. Недавние открытия Pat Inflamm Allergy Drug. 2017; 10: 72–85. DOI: 10,2174 / 1872213X10666160

3700.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Цицимпику С., Хрисостому Н., Папалексис П., Царухас К., Цацакис А., Джамуртас А. Использование пищевых добавок спортсменами-любителями в Афинах, Греция. Int J Sport Nutr Exerc Exerc Metab. 2011; 21: 377–384. DOI: 10.1123 / ijsnem.21.5.377. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Саго Д., Мольде Х., Андреассен С.С., Торсхайм Т., Паллесен С. Глобальная эпидемиология использования анаболических андрогенных стероидов: метаанализ и мета-регрессионный анализ. Ann Epidemiol. 2014; 24: 383–398.DOI: 10.1016 / j.annepidem.2014.01.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7. Ампуэро Дж., Гарсия Э.С., Лоренцо М.М., Калле Р, Ферреро П., Гомес МР. Вызванный станозололом мягкий холестаз. Гастроэнтерол Гепатол. 2014; 37: 71–72. DOI: 10.1016 / j.gastrohep.2013.09.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Баусерман Л.Л., Сарителли А.Л., Герберт П.Н. Влияние кратковременного приема станозолола на липопротеины сыворотки крови при недостаточности печеночной липазы. Обмен веществ. 1997; 46: 992–996. DOI: 10.1016 / S0026-0495 (97)

AAS анаболический андрогенный стероид
TERT теломераза обратная транскриптаза
TERC теломераза РНК компонент
Агентство по борьбе с теломеразой
гепатоцеллюлярная карцинома
PG пропиленгликоль
IS внутренний стандарт
APCI химическая ионизация при атмосферном давлении 9015 9015
-5. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9.Эль-Сераг HB, Крамер Дж., Дуан З., Канвал Ф. Расовые различия в прогрессировании цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы у ветеранов, инфицированных ВГС. Am J Gastroenterol. 2014; 109: 1427–1435. DOI: 10.1038 / ajg.2014.214. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Hansma P, Diaz FJ, Njiwaji C. Смертельный разрыв кисты печени из-за использования анаболических стероидов: презентация случая. Am J Forensic Med Pathol. 2016; 37: 21–22. DOI: 10.1097 / PAF.0000000000000218. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Харкин К.Р., Коуэн Л.А., Эндрюс Г.А., Басараба Р.Дж., Фишер Дж.Р., Дебоус Л.Дж., Руш Дж.К., Гульельмино М.Л., Кирк, Калифорния.Гепатотоксичность станозолола у кошек. J Am Vet Med Assoc. 2000. 217: 681–684. DOI: 10.2460 / javma.2000.217.681. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Сокас Л., Зумбадо М., Перес-Лусардо О., Рамос А., Перес С., Эрнандес Дж. Р., Боада Л. Д.. Гепатоцеллюлярные аденомы, связанные со злоупотреблением анаболическими андрогенными стероидами у бодибилдеров: отчет о двух случаях и обзор литературы. Br J Sports Med. 2005; 39: e27. DOI: 10.1136 / bjsm.2004.013599. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Стимак Д., Милич С., Динтиньяна Р.Д., Ковач Д., Ристич С.Андрогенный / анаболический стероид-индуцированный токсический гепатит. J Clin Gastroenterol. 2002. 35: 350–352. DOI: 10.1097 / 00004836-200210000-00013. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Дешмук Н.И., Захар Г., Петроци А., Секели А.Д., Баркер Дж., Нотон Д.П. Определение станозолола и 3′-гидроксистанозолола в шерсти, моче и сыворотке крыс с помощью тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией. Chem Cent J. 2012; 6: 162. DOI: 10.1186 / 1752-153X-6-162. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Mateus-Avois L, Mangin P, Saugy M.Использование ионной газовой хроматографии-множественной масс-спектрометрии для обнаружения и подтверждения следовых уровней 3′-гидроксистанозолола в моче для допинг-контроля. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2005; 816: 193–201. DOI: 10.1016 / j.jchromb.2004.11.033. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Бюттнер А., Тим Д. Побочные эффекты анаболических андрогенных стероидов: патологические данные и взаимосвязь между структурой и активностью. Handb Exp Pharmacol. 2010; 195: 459–484. DOI: 10.1007 / 978-3-540-79088-4_19.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Рентукас Э., Царухас К., Капланис I, Короу Э, Николау М., Марафонитис G, Коккиноу С., Халиассос А., Мамалаки А., Куретас Д. и др. Связь активности теломеразы в МКПК с маркерами воспаления и эндотелиальной дисфункции у пациентов с метаболическим синдромом. PLoS One. 2012; 7: e35739. DOI: 10.1371 / journal.pone.0035739. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Zhou X, Zhu H, Lu J. Экспрессия генов PTEN и hTERT и корреляция с гепатоцеллюлярной карциномой человека.Pathol Res Pract. 2015; 211: 316–319. DOI: 10.1016 / j.prp.2014.11.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Ян Ц., Ли С., Ван М., Чанг А.К., Лю И, Чжао Ф, Сяо Л., Хань Л., Ван Д., Ли С., Ву Х. PTEN подавляет онкогенную функцию AIB1 за счет снижения стабильности его белка с помощью механизма, включающего Fbw7 альфа. . Молочный рак. 2013; 12:21. DOI: 10.1186 / 1476-4598-12-21. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Jung S, Li C, Jeong D, Lee S, Ohk J, Park M, Han S, Duan J, Kim C, Yang Y и др.Онкогенная функция p34SEI-1 через NEDD4 1 опосредована убиквитинизацией / деградацией PTEN и активацией пути PI3K / AKT. Int J Oncol. 2013; 43: 1587–1595. DOI: 10.3892 / ijo.2013.2064. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. ОЭСР. Руководящий документ по распознаванию, оценке и использованию клинических признаков в качестве гуманных конечных точек для экспериментальных животных, используемых при оценке безопасности. ОЭСР; Париж: 2000. [Google Scholar] 26. Черичи Камарго IC, Баррейрос де Соуза Р., Фатима Паккола Мескита С., Чуффа Л.Г., Фрей Ф.Гистология яичников и оценка фолликулов у самок крыс, получавших деканоат нандролона и подвергавшихся физическим нагрузкам. Acta Biol Hung. 2009. 60: 253–261. DOI: 10.1556 / ABiol.60.2009.3.2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. де Алмейда Чуффа Л.Г., де Соуза Р.Б., Фрей Ф., де Фатима Паккола Мескита С., Камарго IC. Деканоат нандролона и физическое усилие: гистологическая и морфометрическая оценка в матке взрослой крысы. Анат Рек (Хобокен) 2011; 294: 335–341. DOI: 10.1002 / ar.21314. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28.Гопинатан С., О’Нил Э, Родригес Л.А., Чемпион Р., Филлипс М., Нуралдин А., Вендт М., Уилсон Эйдж, Крамер Дж. Токсикология наполнителей in vivo, обычно используемых при открытии лекарств на крысах. J Pharmacol Toxicol Methods. 2013; 68: 284–295. DOI: 10.1016 / j.vascn.2013.02.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Healing G, Sulemann T, Cotton P, Harris J, Hargreaves A, Finney R, Kirk S, Schramm C, Garner C, Pivette P, Burdett L.Данные о безопасности 19 транспортных средств для использования в доклинических исследованиях на грызунах в течение 1 месяца: Введение гидроксипропил-β-циклодекстрина вызывает почечную токсичность.J Appl Toxicol. 2016; 36: 140–150. DOI: 10.1002 / jat.3155. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Aye M, Di Giorgio C, De Mo M, Botta A, Perrin J, Courbiere B. Оценка генотоксичности трех криопротекторов, используемых для витрификации человеческих ооцитов: диметилсульфоксида, этиленгликоля и пропиленгликоля. Food Chem Toxicol. 2010; 48: 1905–1912. DOI: 10.1016 / j.fct.2010.04.032. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Бертло-Рику А., Перрин Дж, ди Джорджио С., де Мео М., Ботта А., Курбьер Б. Оценка генотоксичности 1,2-пропандиола (PrOH) на ооциты мышей с помощью анализа комет.Fertil Steril. 2011; 96: 1002–1007. DOI: 10.1016 / j.fertnstert.2011.07.1106. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Каннингем Р.Л., МакГиннис М.Ю. Физическая провокация самцов крыс, подвергшихся воздействию пубертатных анаболических андрогенных стероидов, вызывает агрессию по отношению к самкам. Horm Behav. 2006; 50: 410–416. DOI: 10.1016 / j.yhbeh.2006.05.002. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Matrisciano F, Modafferi AM, Togna GI, Barone Y, Pinna G, Nicoletti F, Scaccianoce S. Повторное лечение анаболическими андрогенными стероидами вызывает обратимые антидепрессантами изменения гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси, уровней BDNF и поведения.Нейрофармакология. 2010. 58: 1078–1084. DOI: 10.1016 / j.neuropharm.2010.01.015. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Tucci P, Morgese MG, Colaianna M, Zotti M, Schiavone S, Cuomo V, Trabace L. Нейрохимические последствия злоупотребления стероидами: моноаминергические изменения, вызванные станозололом. Стероиды. 2012; 77: 269–275. DOI: 10.1016 / j.steroids.2011.12.014. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Кара М., Озкагли Е., Фрагкиадаки П., Котил Т., Стивактакис П. Д., Спандидос Д. А., Цацакис А. М., Альпертунга Б. Определение повреждения ДНК и активности теломеразы у крыс, получавших станозолол.Exp Ther Med. 2017; 13: 614–618. DOI: 10.3892 / etm.2016.3974. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 36. Цицимпико Ц., Цацаракис М., Фрагкиадаки П., Коваци Л., Стивактакис П., Калогераки А., Куретас Д., Цацакис А. М.. Гистопатологические поражения, окислительный стресс и генотоксические эффекты в печени и почках после длительного воздействия диазинона и пропоксура на кроликов. Токсикология. 2013; 307: 109–114. DOI: 10.1016 / j.tox.2012.11.002. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. Сольбах П., Поттхофф А., Раатшен Х.Дж., Суда Б., Леманн Ю., Шнайдер А., Гебель М.Дж., Маннс М.П., ​​Фогель А.Гепатоцеллюлярная карцинома с положительным тестостерон-рецептором у 29-летнего бодибилдера с историей злоупотребления анаболическими андрогенными стероидами: отчет о болезни. BMC Gastroenterol. 2015; 15:60. DOI: 10.1186 / s12876-015-0288-0. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Ливак К.Дж., Шмитген Т.Д. Анализ данных относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2 (-4Delta Delta C (T)). Методы. 2001; 25: 402–408. DOI: 10.1006 / meth.2001.1262. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39.Кеслер Т., Сандху Р.С., Кришнамурти С. Гепатология: гепатоцеллюлярная карцинома у молодого человека, вторичная по отношению к злоупотреблению андрогенными анаболическими стероидами. J Gastroenterol Hepatol. 2014; 29: 1852. DOI: 10.1111 / jgh.12809. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Боада Л.Д., Зумбадо М., Торрес С., Лопес А., Диас-Чико Б.Н., Кабрера Дж. Дж., Лусардо ОП. Оценка острых и хронических гепатотоксических эффектов анаболического андрогенного стероида станозолола у взрослых самцов крыс. Arch Toxicol. 1999. 73: 465–472. DOI: 10.1007 / s002040050636.[PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Канаяма Дж., Хадсон Дж. И., Поуп Х. Дж., Младший. Долгосрочные психиатрические и медицинские последствия злоупотребления анаболическими андрогенными стероидами: надвигающаяся проблема общественного здравоохранения? Зависимость от наркотиков и алкоголя. 2008; 98: 1–12. DOI: 10.1016 / j.drugalcdep.2008.05.004. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 42. Орниш Д., Лин Дж., Чан Дж. М., Эпель Э, Кемп С., Вайднер Дж., Марлин Р., Френда С. Дж., Магбануа М. Дж. М., Даубенмьер Дж. И др. Влияние всесторонних изменений образа жизни на активность теломеразы и длину теломер у мужчин с подтвержденным биопсией раком простаты низкого риска: 5-летнее наблюдение за описательным пилотным исследованием.Ланцет Онкол. 2013; 14: 1112–1120. DOI: 10.1016 / S1470-2045 (13) 70366-8. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 43. Мишра С., Кумар Р., Малхотра Н., Сингх Н., Дада Р. Мягкий окислительный стресс полезен для поддержания длины теломер сперматозоидов. World J Methodol. 2016; 6: 163–170. DOI: 10.5662 / wjm.v6.i2.163. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44. Zar T, Graeber C, Perazella MA. Распознавание, лечение и профилактика токсичности пропиленгликоля. Semin Dial. 2007. 20: 217–219. DOI: 10.1111 / j.1525-139X.2007.00280.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Djojosubroto MW, Chin AC, Go N, Schaetzlein S, Manns MP, Gryaznov S, Harley CB, Rudolph KL. Антагонисты теломеразы GRN163 и GRN163L подавляют рост опухоли и повышают химиочувствительность гепатомы человека. Гепатология. 2005; 42: 1127–1136. DOI: 10.1002 / hep.20822. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 46. Василаки Ф., Цицимпико Ч., Цароухас К., Германакис I, Царди М., Каввалакис М., Озкагли Э., Куретас Д., Цацакис А. М.. Кардиотоксичность у кроликов после длительного приема нандролона деканоата.Toxicol Lett. 2016; 241: 143–151. DOI: 10.1016 / j.toxlet.2015.10.026. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 47. Пилати С., Летузе Э., Нолт Дж. К., Имбо С., Булай А., Кальдераро Дж., Пуссен К., Франкони А., Куши Дж., Моркретт Дж. И др. Геномное профилирование гепатоцеллюлярных аденом позволяет выявить повторяющиеся мутации, активирующие FRK, и механизмы злокачественной трансформации. Раковая клетка. 2014; 25: 428–441. DOI: 10.1016 / j.ccr.2014.03.005. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Юнгерманн К., Кицманн Т. Зонирование паренхиматозного и непаренхиматозного метаболизма в печени.Annu Rev Nutr. 1996. 16: 179–203. DOI: 10.1146 / annurev.nu.16.070196.001143. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Юнгерманн К. Метаболическое зонирование паренхимы печени. Semin Liver Dis. 1988. 8: 329–341. DOI: 10,1055 / с-2008-1040554. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 51. Сальвадор Дж. П., Санчес-Баеза Ф, Марко М. П.. Одновременное иммунохимическое определение станозолола и основного метаболита человека, 3′-гидроксистанозолола, в образцах мочи и сыворотки крови. Анальная биохимия. 2008; 376: 221–228. DOI: 10.1016 / j.ab.2008.02.009. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 52. Чилтон В.Л., Маркес Ф.З., Вест Дж., Канноуракис Дж., Берзиньш С.П., О’Брайен Б.Дж., Чарчар Ф.Дж. Острая физическая нагрузка приводит к регуляции генов, связанных с теломерами, и экспрессии микроРНК в иммунных клетках. PLoS One. 2014; 9: e. DOI: 10.1371 / journal.pone.00. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53. Ludlow AT, Gratidão L, Ludlow LW, Spangenburg EE, Roth SM. Острая физическая нагрузка активирует p38 MAPK и увеличивает экспрессию генов, защищающих теломеры, в сердечной мышце.Exp Physiol. 2017; 102: 397–410. DOI: 10.1113 / EP086189. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Вардавас А.И., Стивактакис П.Д., Цацаракис М.Н., Фрагкиадаки П., Василаки Ф., Царди М., Дацери Г., Циаусис Дж., Алегакис А.К., Цицимпику С. и др. Длительное воздействие циперметрина и пиперонилбутоксида вызывает воспаление печени и почек и индуцирует генотоксичность у новозеландских белых кроликов-самцов. Food Chem Toxicol. 2016; 94: 250–259. DOI: 10.1016 / j.fct.2016.06.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 55.Хуан С.К., Чианг В.Д., Хуанг В.К., Хуанг С.Й., Сюй М.К., Лин В.Т. Гепатопротекторные эффекты упражнений по плаванию на крысиной модели индуцированного D-галактозой старения. Evid Based Complement Alternat Med. 2013; 2013: 275431. DOI: 10.1155 / 2013/275431. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 56. Yi X, Cao S, Chang B, Zhao D, Gao H, Wan Y, Shi J, Wei W., Guan Y. Влияние острых и хронических упражнений на сигнальный путь лептин-AMPK-ACC в печени у крыс с диабетом 2 типа . J Diabetes Res. 2013; 2013: 946432.DOI: 10.1155 / 2013/946432. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 57. Петтерссон Дж., Хиндорф Ю., Перссон П., Бенгтссон Т., Мальмквист Ю., Веркстрём В., Экелунд М. Мышечные упражнения могут вызывать крайне патологические тесты функции печени у здоровых мужчин. Br J Clin Pharmacol. 2008. 65: 253–259. DOI: 10.1111 / j.1365-2125.2007.03001.x. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 58. Brustia R, Savier E, Scatton O. Физические упражнения у пациентов с циррозом: к реабилитации в листе ожидания трансплантации печени.Систематический обзор и метаанализ. Клин Рес Гепатол Гастроэнтерол. 2017 ноябрь 18; Epub впереди печати. [PubMed] [Google Scholar]

Станозолол против анавара, станозолол против оксандролона — Профиль — Форум

Станозолол против анавара, станозолол против оксандролона — Купить легальные анаболические стероиды







аарм может наращивать мышцы, сокращать жир и улучшать плотность костей. Хорошая доза позволит нарастить действительно сильные, сухие мышцы за короткий промежуток времени, я говорю около 12 недель.Вторая причина — это аплодировать сармам, как правило, как очень впечатляющей биохакерской фармацевтике (я использую сармы, они работают), но в то же время сказать большинству товарищей в этом subr, что они ищут волшебную таблетку (чтобы заменить хорошую питание, тренировки и сон), которого просто не существует. Mk-677, cardarine, yk-11 и sr-9009 не являются sarms. Mk-677 — секретный прибор GH. Yk-11 — стероидный ингибитор миостатина. Cardarine и sr-9009 на обоих модуляторах ppar. Несмотря на то, что оба они попадают в сармы, технически они не являются сармами по своей химической структуре или механизму действия.Однако они очень хорошо сочетаются с сармами. Вы не должны попасть в ловушку, полагая, что заблуждение состоит в том, что все, что вам нужно сделать, это принять курс сармса, и мышцы будут волноваться, а жир исчезнет. Ключ к любому циклу sarms — убедиться, что ваша диета правильная, ваш режим упражнений является регулярным и развивающимся, и что вы спите по восемь часов в сутки. При покупке сармов проявляйте должную осмотрительность, потому что многие прогормоны продаются в виде сармов. Если вам нужны доступные, законные, проверенные в лаборатории сторонние сармы (а также аримидекс), используйте ссылки в этом посте (личные источники, которые я использую лично).И помните, сармы не сделают за вас всю работу, так что ешьте хорошо и тренируйтесь усердно. Несмотря на то, что все сармы классифицируются в одну четко определенную категорию, способ работы каждого из них может быть совершенно разным. Например, сармы имеют разную потенцию, дозировка варьируется, как и курс, некоторые более эффективны при некоторых состояниях здоровья, а некоторые имеют особый способ связывания с разными рецепторами. Потенциальное клиническое применение сармов довольно ясно показывает, для чего они разрабатываются.Есть надежда, что новые молекулы сарма смогут стимулировать рост мышц, уменьшать жировые отложения при одновременном увеличении безжировой массы тела, улучшать плотность костей, повышать уровень тестостерона и повышать либидо. По сравнению со стероидами он не превращается в эстроген. Не блокирует гпта — пкт нам не нужен. Увеличивает синтез коллагена — регенерацию кожи и суставов. Период полувыведения и пероральная форма упрощают использование. Сарм — первые композиционные испытания! сарм — введение. Капсульный сарм: обычно они выпускаются в бутылках по 50–100 капсул, в каждой из которых содержится от 5 до 10 мг сармов.Обычно их употребляют внутрь с добавлением воды. Жидкие сармы: обычно помещаются во флакон с 15, 30 или 60 мл жидкости внутри. 1 мл обычно соответствует от 10 до 20 мг продукта. Всего по одной бутылке каждого из них хватит на все 4 недели для вашей послекурсовой терапии сармс, а если вы заплатите биткойнами, вы также получите невероятную скидку. В дополнение к этому, если вы используете код «nanotech» при покупке sarms pct онлайн, вы получите скидку 11% как на ваш процент, так и на все остальное.Я только начал брать стопку сармов в одной бутылке из местного магазина пищевых добавок. Бутылка имеет форму таблеток и производится SP Products, и каждая дневная порция содержит 30 мг sr 9009, 30 мг mk 2866 и 50 мг s4. Я также принимаю жидкую форму кардарина от той же компании. Каждая порция содержит 30 мг. Идеальными для исцеления являются mk-2866, mk-677 и sr-9009. Вам понадобится 20 мг мк-2866 и по 10 мг каждого из двух других сармов. Выполняйте три процедуры в течение восьми недель и следуйте циклу с восьминедельным перерывом, добавляя во время перерыва добавку pct.
Не позволяйте вашей коже, на которую наносился гель или раствор, касаться любой детской или женской кожи, станозолола против анавара.
Станозолол против оксандролона
Винстрол, или «винни», является одним из стероидов, наиболее часто рекомендуемых для женщин (наряду с анаваром и примоболаном). Винстрол выпускается как в пероральной, так и в инъекционной форме на водной основе. Хотя я обнаружил его в инъекциях на масляной основе, которые предпочтительнее инъекций на водной основе, которые необходимо вводить чаще, чем инъекции на масляной основе. Цикл анавар-винстрол — один из самых мягких стероидных циклов в отрасли. Цикл анавара идеально подходит для мужчин и женщин, которые хотят порвать.Циклы Анавар-Клен часто используются многими спортсменами, использующими препараты для повышения производительности и анаболические стероиды. Точнее, станозолол — это гормон dht, который претерпел 2 структурных изменения, в результате которых он получил соединение винстрола. Это структурное изменение происходит в позиции углерода 17, который официально обеспечивает станозолол в качестве анаболического стероида c17-альфа (c17-aa). Станозолол 10 мг имеет множество положительных стероидных эффектов. Например, цикл анавара и станозолола предлагает феноменальные результаты, и бодибилдеры могут принимать меньше обоих компонентов для их достижения.Винстрол и анавар — два наиболее распространенных пероральных анаболических андрогенных стероида (ААС), используемых сегодня. Они настолько похожи, что многим бодибилдерам сложно выбрать одно из них. Чтобы сделать лучший выбор, мы рассмотрим профили этих стероидов и посмотрим, какие преимущества каждый из них может дать пользователю. В то же время низкий андрогенный рейтинг означает, что задержка воды очень незначительна. Как и анавар, винстрол сделает вас сухими и жесткими. Следовательно, препарат, готовый к конкуренции.В общем, станозолол — очень универсальный стероид, который может найти место в любом спортивном или соревновательном цикле повышения производительности. Андрогенный рейтинг Анавара составляет 24, что значительно ниже, чем у другого варианта. С другой стороны, известно, что использование анавара связано с меньшими рисками. Вирилизация вызывает меньшее беспокойство, когда человек обращается к анавару вместо винстрола. Вы, наверное, слышали, как люди сравнивают туринабол и анавар. Оба считаются мягкими пероральными стероидами, что в определенной степени верно.То, что стероид слабый, не означает, что с ним не стоит проводить исследования. Anavar — отличный стероид для использования перед соревнованиями. Анавар против винстрола. Анавар, также известный как оксандролон, является наиболее часто используемым стероидом в мире во время фазы резания. Одна из причин его популярности заключается в том, насколько мягкая инъекция действует на ваше тело, особенно на печень, по сравнению с другими стероидами. Хотя спортсменки обычно считают станозолол очень переносимым, инъекции обычно запрещены. Они рискуют вызвать андрогенное накопление, поскольку обычная инъекция 50 мг обеспечит слишком высокую дозировку.Укладка винстрола для женщин. Для сокращения и похудания предлагаемый комплекс включает кленбутерол, винстрол и анавар. Винстрол обычно называют станозололом, потому что он связан с гормоном станозолола. Для тех, кто знаком со скандалами, которые происходили на протяжении многих лет, вы знаете, что те, кого поймали на анаболических стероидах, были пойманы на винстроле. Станозолол — это анаболический стероид, производный от DHT, который одновременно является анаболическим и андрогенным. Анавар — что лучше? Винстрол и анавар используются как часть цикла резки, чтобы уменьшить жировые отложения и общий вес.С учетом сказанного, между ними есть некоторые тонкие различия. Анавар лучше, чем винстрол, для увеличения силы, в то время как винстрол лучше для наращивания мышечной массы. Уровни гормонов, как правило, высоки в подростковом возрасте, во время нормального роста и развития вторичных мужских характеристик, таких как более глубокий голос, оволосение на теле, рост роста и мускулатуры, например а также либидо, станозолол против анавара.
Станозолол против анавара, станозолол против оксандролона Лекарства на основе тестостерона также будут иметь сильное влияние на гипоталамическую регуляцию естественных стероидных гормонов.Без вмешательства веществ, стимулирующих тестостерон, уровень тестостерона должен вернуться к норме в течение 1-4 месяцев после того, как препарат полностью выйдет из организма, станозолол против анавара. Обратите внимание, что длительный гипогонадотропный гипогонадизм может развиться вторично по отношению к злоупотреблению стероидами, что потребует медицинского вмешательства. Сармс до и после скинни, сармс до станозолола в дозе 50 мг / день с 6 по 12 неделю; еще один набирающий популярность комплекс включает тестостерон, винстрол и дека дураболин. Дека ослабит «скрипучие суставы», которые вызывает винстрол у некоторых пользователей.Слишком тесная битва, чтобы получить какой-либо окончательный ответ. Это более субъективно, чем что-либо другое. Цикл анавар-винстрол — один из самых мягких стероидных циклов в отрасли. Цикл анавара идеально подходит для мужчин и женщин, которые хотят порвать. Циклы Анавар-Клен часто используются многими спортсменами, использующими препараты для повышения производительности и анаболические стероиды. Винстрол, или «винни», — один из стероидов, наиболее часто рекомендуемых женщинам (наряду с анаваром и примоболаном). Винстрол выпускается как в пероральной, так и в инъекционной форме на водной основе.Хотя я обнаружил его в инъекциях на масляной основе, которые предпочтительнее инъекций на водной основе, которые необходимо вводить чаще, чем инъекции на масляной основе. Это зависит от того, чего вы пытаетесь достичь, и от вашего уровня терпимости к побочным эффектам. Если вы смотрите на минимальные стороны, некоторое укрепление мышц и некоторую васкуляризацию, то анавар с тестом будет для вас хорошим стеком. Анавар против винстрола Анавар имеет хорошую репутацию одного из самых безопасных и мягких анаболических стероидов, доступных на рынке.Он значительно менее агрессивен для вашей печени, чем другие пероральные стероиды (и даже имеет преимущество перед винстролом / станозололом в этой области). Винстрол и анавар — два наиболее распространенных пероральных анаболических андрогенных стероида (ААС), используемых сегодня. Они настолько похожи, что многим бодибилдерам сложно выбрать одно из них. Чтобы сделать лучший выбор, мы рассмотрим профили этих стероидов и посмотрим, какие преимущества каждый из них может дать пользователю. Винстрол против анавара против туринабола лично я никогда не запускал цикл без того, чтобы один из этих мальчиков был уверен, что все они имеют свои плюсы и минусы и на самом деле не так похожи по своим действиям, но все же их можно было бы в некотором роде считать сопоставимыми.Станозолол — это материнское название винстрола, и в некоторых стероидных кругах его также называют винни. Он имеет аналогичный уровень популярности с анаваром из-за его свойств, которые помогают в циклах сокращения и наращивания мышц. Однако по сравнению с другими препаратами с аналогичной химической структурой, Винни имеет меньше побочных эффектов, чем большинство. Я разрезаю их пополам, чтобы получить 25-30 мг. Это было для 50 таблеток анавара и 50 таблеток винстрола. Очевидно, они недешевы, так что имейте это в виду прямо сейчас. Винстрол (станзолол): моя дневная доза винни составляла около 30 мг.Также в день (6 дней в неделю), так же, как и анавар. Хотя спортсменки обычно считают станозолол очень переносимым, инъекции обычно запрещены. Они рискуют вызвать андрогенное накопление, поскольку обычная инъекция 50 мг обеспечит слишком высокую дозировку. Укладка винстрола для женщин. Для сокращения и похудания предлагаемый комплекс включает кленбутерол, винстрол и анавар. Когда Бен Джонсон в мгновение ока вальсировал мимо Карла Льюиса во время Олимпийских игр 1987 года, он запустил вспышку, установил новый мировой рекорд и принес ему первое олимпийское золото.Но мало кто знал, что эта гонка навсегда подорвет его карьеру и вместо этого поставит станозолол или винстрол в центр внимания Популярные продукты:
Метенолон энантат 100 мг / мл 10 мл Флакон
Провирон 25 мг (50 таблеток)
Testoheal 40 мг (30 таблетки)
1-Test Cyp 100 Dragon Pharma
Sun Pharma
Maha Pharma
Болденон 10 мл — 300 мг
Anavar 10 Maha Pharma
Сустанон 250 10 мл флакон / 250 мг на 1 мл
Tren Acetate 70 мг
Эквипойзин, мл
Para Pharma
Что делает каждый сарм, станозолол против туринабола
Станозолол против анавара, купите законный анаболический стероид, чтобы увеличить мышечную массу.Также наблюдалось резкое увеличение чувствительности к инсулину, о чем свидетельствует увеличение поглощения глюкозы тканями на 32% в ответ на инсулин и аналогичное увеличение экспрессии основных генов, которые опосредуют передачу сигналов инсулина. Уровень глюкозы натощак также значительно снизился — на 12 миллиграммов на децилитр. Уровень гемоглобина A1C (HbA1c) пациентов не снизился — это необходимый показатель того, что тестостерон может помочь контролировать диабет, станозолол по сравнению с анаваром. Декадуро — стероид, декадуро — стероид. Коллаген — строительный материал на основе белка для соединительных тканей по всему телу (связок, сухожилий, хрящей, суставов и костей), станозолол против анавара.Станозолол против анавара, заказ стероидов онлайн с доставкой по всему миру. У женщин, получающих тестостерон, могут развиться мужские характеристики, которые могут стать необратимыми, если лечение будет продолжено, вместо станозолола и оксандролона.
https://www.123-4green-business.com/community/profile/sarms35229217/
Mk-677, cardarine, yk-11 и sr-9009 не являются сармами. Mk-677 — секретный прибор GH. Yk-11 — стероидный ингибитор миостатина. Cardarine и sr-9009 на обоих модуляторах ppar. Несмотря на то, что оба они попадают в сармы, технически они не являются сармами по своей химической структуре или механизму действия.Однако они очень хорошо сочетаются с сармами. Самое важное, что вы можете сделать при использовании сармов, — это осознавать свое тело и то, как оно реагирует. Хотя у каждого сарма есть общие преимущества, каждый реагирует и реагирует по-разному. Прежде чем вы найдете идеальный сарм или стек сармов, вам, возможно, придется попробовать несколько. Это совершенно нормально и даже поощряется. Каждый сарм нацелен на разные группы рецепторов андрогенов, что усиливает естественную реакцию тканей на любой тип физической нагрузки, а исследования показывают убедительные результаты.Купите сейчас, что это значит для тела? Вторая причина — это аплодировать сармам, как правило, как очень впечатляющей биохакерской фармацевтике (я использую сармы, они работают), но в то же время сказать большинству товарищей в этом subr, что они ищут волшебную таблетку (чтобы заменить хорошую питание, тренировки и сон), которого просто не существует. Как сармы могут вызвать выпадение волос. Вот почему сармы могут предотвратить выпадение волос, но как они все это вызывают? ну, все сармы могут вызвать выпадение волос при приеме сверх рекомендуемых доз в течение очень длинных циклов (более 10 недель), потому что наши гормоны находятся на очень нездоровом уровне, если мы принимаем нерекомендуемые дозы так долго, а в некоторых случаях это может , приводит к выпадению волос.Сармы не обладают токсичностью, в некоторых случаях вызывают только минимальное подавление, что позволяет быстро выздороветь, в отличие от стероидов, которые могут вызывать долгосрочные проблемы из-за высоких показателей подавления и обеспечивать чувство благополучия каждый день, которое многие стероиды не могут вызвать. . Gw-501516 (кардарин), mk-677 (ибутаморен) и sr-9009 (стенаболик) не относятся к семейству сармов. Это может немного сбивать с толку, но это связано с тем, как поставщики продают продукты. Часто можно увидеть, что продавцы перечисляют их как сармы, потому что это удобно.Gw-501516 (кардарин) — это то, что они называют агонистом ppar. Капсульный сарм: обычно они выпускаются в бутылках по 50–100 капсул, в каждой из которых содержится от 5 до 10 мг сармов. Обычно их употребляют внутрь с добавлением воды. Жидкие сармы: обычно помещаются во флакон с 15, 30 или 60 мл жидкости внутри. 1 мл обычно соответствует от 10 до 20 мг продукта. Несмотря на то, что все сармы классифицируются в одну четко определенную категорию, способ работы каждого из них может быть совершенно разным.Например, сармы имеют разную потенцию, дозировка варьируется, как и курс, некоторые более эффективны при некоторых состояниях здоровья, а некоторые имеют особый способ связывания с разными рецепторами. Попробуйте принимать вышеупомянутые 10 мг кардарина и 20 мг остарина в день с 50 мг андарина. 6-8-недельного цикла будет более чем достаточно. Дальнейшее действие может стать немного подавляющим, и эффективность каждого сарма начнет ослабевать. Эти три сарма являются одними из самых хорошо исследованных и хорошо задокументированных.Мы не рекомендуем принимать лигандрол ни по какой причине. Лигандрол (lgd 4033) побочные эффекты и безопасность. Lgd 4033 — это популярный и относительно новый пероральный селективный модулятор андрогенных рецепторов (sarm). Некоторые бодибилдеры считают, что сармы являются более безопасной альтернативой стероидам, но нет данных, позволяющих предположить, что несанкционированные сармы вообще безопасны.
Инъекции тестостерона должны выполняться только профессионалом в области здравоохранения. Тестостерон может вызвать серьезные проблемы с сердцем, мозгом, печенью, эндокринной системой и психическим здоровьем.Прекращение приема тестостерона также может привести к неприятным симптомам отмены, что и делает каждый сарм. Инъекции тестостерона также были связаны с состоянием, называемым легочной масляной микроэмболией (POME), или сгустком крови в легких, который может быть фатальным. http://gamerwellness.org/community/profile/sarms21

3/ Таким образом, вы начинаете сжигать жир быстрее и сразу видите результаты, станозолол против мастерона. SARM и анаболические стероиды наполняют ваши мышцы и укрепляют мышцы вашей мечты. Побочные эффекты, о которых чаще всего сообщают, включают: тромбоз глубоких вен.См. Ниже полный список побочных эффектов, станозолол против анавара. Лучшие пероральные стероиды: анаболические стероиды обычно бывают в инъекционной и пероральной форме, и существует 7 наиболее часто используемых пероральных форм, станозолол и туринабол. Из 7 форм, две идеально подходят для набора массы, одна — это стероид, повышающий максимальную силу, но при этом обладает отличными характеристиками для срезания, а остальные четыре — это сильные стероиды и стероиды. Это также означает, что прирост мышц не будет включать вес воды, и у вас не будет такого вздутия, которое сопровождает многие другие стероиды, станозолол против анавара.Мое заключение и рекомендация. Стероид разработан для повышения энергии и силы за счет стимуляции фосфокреатина в глубоких тканях мышц, станозолол по сравнению с туринаболом. Он лучше всего подходит для циклов стрижки и приведет к более быстрой потере жира, что в конечном итоге даст пользователям очень стройные мышцы. Настоящая анаболическая диета, станозолол против туринабола. Рано или поздно каждый, кто занимается бодибилдингом, решает избавиться от жира и «посмотреть, что там под ним». Поскольку он обладает антиэстрогенными свойствами, он не ароматизируется, поэтому он не превращается в эстроген и не превращает тестостерон в эстроген.Это означает, что у него гораздо меньше побочных эффектов, чем у других стероидов, хотя он по-прежнему очень опасен, станозолол по сравнению с оксандролоном. Итак, хотя это может быть причиной волосатости, потливости и запаха у мужчин, это также важно для нормальной, здоровой жизни, станозолол против оксандролона. Заслуживает ли тестостерон плохой репутации? Производство карается тюремным заключением на срок до одного года, в то время как торговля людьми наказывается тюремным заключением на срок до трех лет, в зависимости от того, как рассматривается дело, станозолол или мастерон.Стероиды Канадского закона об импорте. Заместительная терапия тестостероном — распространенный метод лечения мужчин с низким уровнем тестостерона. А тестостерон, чтобы быть ясным, является формой анаболического стероида — как известно, спортсмены того же типа используют нелегально, станозолол против туринабола.
Быстрая доставка: Нью-Йорк, Лос-Анджелес, Чикаго, Хьюстон, Феникс, Филадельфия, Сан-Антонио, Сан-Диего, Даллас, Детройт, Сан-Хосе, Индианаполис, Джексонвилл, Сан-Франциско, Хемпстед, Колумбус, Остин, Мемфис, Балтимор, Шарлотта, Форт-Уэрт, Милуоки, Бостон, Эль-Пасо, Вашингтон, Нэшвилл-Дэвидсон, Сиэтл, Денвер, Лас-Вегас, Портленд, Оклахома-Сити, Тусон, Альбукерке, Атланта, Лонг-Бич, Брукхейвен, Фресно, Новый Орлеан, Сакраменто, Кливленд, Меса, Канзас-Сити, Вирджиния-Бич, Омаха, Окленд, Майами, Талса, Гонолулу, Миннеаполис, Колорадо-Спрингс.Аризона, Калифорния, Колорадо, Округ Колумбия, Флорида, Джорджия, Гавайи, Иллинойс, Индиана, Луизиана, Мэриленд, Массачусетс, Мичиган, Миннесота, Миссури, Небраска, Невада, Нью-Мексико, Нью-Йорк, Северная Каролина, Огайо, Оклахома, Орегон, Пенсильвания, Теннесси, Техас, Вирджиния, Вашингтон, Висконсин, Алабама, Алабама, Аляска, AK, Аризона, Аризона, Арканзас, АР, Калифорния, Калифорния, Колорадо, Колорадо, Коннектикут, Коннектикут, Коннектикут, Коннектикут, Делавэр, Делавэр, Округ Колумбия, Округ Колумбия, Флорида, Флорида, Джорджия, Джорджия, Гавайи, Гавайи, Айдахо, Айдахо, Иллинойс, Иллинойс, Индиана, Индиана, Айова, Айова, Канзас, Канзас, Кентукки, Кентукки, Луизиана, Лос-Анджелес, Мэн, Мэн, Мэриленд, Мэриленд, Массачусетс, Массачусетс, Мичиган, Мичиган, Миннесота, Миннесота, Миссисипи, МС, Миссури, Миссури, Монтана, MT, Небраска, NE, Невада, Невада, Невада, Нью-Гэмпшир, Нью-Джерси, Нью-Джерси, Нью-Джерси, Нью-Мексико, Нью-Мексико, Нью-Йорк, Нью-Йорк, Северная Каролина, Северная Каролина, Северная Дакота, Северная Дакота, Огайо, Огайо, Оклахома, Оклахома, Орегон, ИЛИ, Пенсильвания, Пенсильвания, Род-Айленд, Род-Айленд, Южная Каролина, Южная Каролина, Южная Дакота, Южная Дакота, Теннесси, Теннесси, Теннесси, Техас, Техас, Юта , Юта, Вермонт, Вирджиния, Вирджиния, Вашингтон, WA, Западная Вирджиния, WV, Висконсин, WI, Вайоминг, WY

Доставка по всему миру: США, США, Италия, Великобритания, Германия, Австралия, Испания, Франция, Нидерланды, Ирландия, Швейцария, Япония, Дания, Швеция, Австрия, Норвегия, Новая Зеландия, Греция, Бельгия blabla

Станозолол: строитель мышц, ускоритель восстановления, но риск обнаружения высок — MLB

Обновлено: 5 августа 2005 г., 2:24 по восточному времени

Ассошиэйтед Пресс

НЬЮ-ЙОРК — Станозолол соблазнит любого спортсмена желая набраться сил и избежать длительных травм без дополнительная масса, которую приносят многие анаболические стероиды.

Но для спортсмена, желающего избежать обнаружения, эксперты говорят, что это не самый умный выбор.

«Ни один проверенный спортсмен в здравом уме не должен использовать это наркотиков «, — сказал Чарльз Есалис из Университета штата Пенсильвания, который сказал, что был «шокирован», когда услышал сообщения о том, что Рафаэль Палмейро оказался положительным тестом.

Не существует известного маскирующего агента, который может скрыть использование станозолола. по проверке на наркотики, сказал доктор Гэри Уодлер из Нью-Йоркского университета, эксперт по употреблению наркотиков спортсменами.При приеме таблеток он может задерживаться в тело и быть обнаруженным в течение нескольких недель до месяца, в то время как По его словам, инъекцию можно определить на срок до нескольких месяцев.

Палмейро начал отбывать 10-дневную дисквалификацию в понедельник за провал испытание на наркотики, которое состоялось через некоторое время после его показаний на Капитолии Хилла в марте, что он никогда не принимал стероиды. Реформа правительства Дома Председатель комитета Том Дэвис, республика Вирджиния, заявил в среду в телефонное интервью с AP, которое группа рассмотрит совершил ли Палмейро лжесвидетельство.

Высшая лига бейсбола не уточнила, на какой наркотик проводится тест. найден, но человек, знающий о тестировании на наркотики в этом виде спорта Программа сообщила Associated Press на условиях анонимности, что был станозолол.

Палмейро сказал, что никогда намеренно не принимал стероиды и что он не знает, что вызвало результат теста.

Станозолол, анаболический стероид, также известный под торговой маркой Винстрол, может помочь спортсмену стать сильнее, нарастить мышечную массу, ускорить ускорение, быстрее восстанавливаться после тренировок и других физических подчеркивает и становится более напористым, сказал Вадлер.Он сказал, что есть нет точных данных о том, насколько хорошо станозолол работает по сравнению с другими анаболические стероиды при злоупотреблении спортсменами.

Есалис сказал, что станозолол умеренно эффективен при наращивает мышечную массу, но не так мощно, как некоторые альтернативы.

Вадлер сказал, что есть некоторые признаки того, что станозолол меньше ассоциируется с очень объемными мышцами культуристического типа, чем другие анаболические стероиды.

Он также сказал, что станозолол может помочь игроку избежать серьезных травм. потому что помогает организму оправиться от физических нагрузок.Пальмейро сформированные потенциальные карьерные показатели Зала славы, основанные в основном на долголетие — за 20 лет он ни разу не попал в список инвалидов, и присоединился к Хэнку Аарону, Уилли Мэйсу и Эдди Мюррею как единственные игроки с 3000 просмотров и 500 хомеров, несмотря на то, что никогда не заканчивал выше, чем пятое место в голосовании MVP.

Бейсболисты высшей лиги дали положительный результат на станозолол в прошлом. Среди 1133 тестов на наркотики, проведенных В спорте в 2004 году в 11 из 12 положительных результатов выявлен станозолол. Вадлер сказал, что не уверен, почему именно этот стероид был таким популярны, но предположили, что одной из причин может быть отсутствие экстремальное наращивание мышц.

Он также сказал, что спортсменам, вероятно, нравится этот препарат. потому что он так долго был на арене соревнований — по крайней мере с 1988 года, когда олимпийский спринтер Бен Джонсон дал положительный результат на препарат и был лишен золотой медали и мирового рекорда в 100 метров.

Спортсмены должны использовать его не менее шести-восьми недель, чтобы получить выгода, сказал Есалис. Они могут принять это либо как таблетку, либо как инъекции, хотя Вадлер сказал, что пероральные анаболические стероиды упали в немилость, потому что они несут риск проблем с печенью.

Ветеринары использовали инъекционную форму препарата, но он больше не продается в США и поэтому в настоящее время в этой стране не используется в повседневной практике, согласно Американская ветеринарная медицинская ассоциация. Он использовался в основном в лошади, а также другие животные, такие как собаки и кошки, для ускорения выздоровления у животных, ослабленных хирургическим вмешательством или болезнью.

Таблетки станозолола использовались для лечения редкого генетического заболевания называется наследственным ангионевротическим отеком, но врачи в США говорят они перешли на альтернативы в последние годы из-за отсутствия поставлять.Ovation Pharmaceuticals Inc. из Дирфилда, штат Иллинойс, утверждает, что это прекратил производство препарата около двух лет назад.

Энтони Кастальдо, президент Соединенных Штатов по наследству Ассоциация ангионевротического отека, заявила, что «аптеки-рецепторы», которые производят индивидуальные лекарства для отдельных пациентов, производим таблетки в Соединенных Штатах для использования по рецепту людьми с болезнь.

«То, где мистер Палмейро взял свои вещи, для меня новость», Кастальдо сказал.

Палмейро стал седьмым игроком, попавшим под новые правила бейсбола более жесткая стероидная политика; Правша Сиэтл Маринерс Райан Франклин стал восьмым, когда его также отстранили на 10 дней на нарушение вторник.

Дело Палмейро побудило бейсбольного комиссара Бада Селига повторить свое желание в четверг еще более строгих испытаний и более суровые наказания для потребителей стероидов, включая 50 игр дисквалификация за первое нарушение, 100 игр за второе и пожизненный бан на треть. Он также призвал к независимой полномочия по управлению программой тестирования на наркотики в бейсболе.

«Я опечален недавними сообщениями о нарушениях программа по борьбе с наркотиками в бейсболе », — говорится в заявлении Селига в четверг.»В государственном секторе существуют некоторые сомнения в нашей искренности в исключении стероидов из игры. Это не правильно. Мы должны повсюду создавать понимание, что, когда мы говорим, что нам нужно избавиться игра в стероиды, мы имеем в виду это ».


Copyright 2005 Associated Press

Эта история взята из автоматизированной новостной ленты ESPN.com. Индекс проводов

Купить Винстрол в США КАК Быстро увеличить МАССУ ТЕЛА станозолола Уловки, чтобы получить Винстрол в США

Было проведено несколько исследований, которые показали, что анаболическая активность таблеток Винстрола увеличивается при приеме Клен Станозолола.Однако нет никаких данных, подтверждающих такую ​​анаболическую активность при использовании людьми. Фактически, в этом отношении его бесполезность в отношении людей обычно доказана.

  1. Анадрол обладает активным периодом полураспада около 16 часов, что соответствует ежедневному введению гормона.
  2. Он также помогает снизить вес воды, благодаря чему вы будете выглядеть стройнее в таблетках Винстрола.
  3. MoneyGram разработан для того, чтобы люди могли отправлять деньги семье и друзьям. Станозолол нельзя использовать в деловых целях; Если они заподозрят, что это бизнес-транзакция, они остановят.
  4. 6-12 неделя: Анавар 60 мг в день.
Новички переносят только тестовый цикл лучше, чем анадрол. Оба стероида вызывают эстрогенные, андрогенные и сердечно-сосудистые побочные эффекты.

Может ли воображение заменить физическое. Купить Винстрол в США?

Билл Маллиган. Элизабет Робинсон, EdM.

Подтвержденная покупка орального желе. Самые продвинутые маги-бардоны и авторы написали свой лучший «Купите винстрол в США», чтобы помочь читателям продвинуться по пути Франца Бардона.

Opgedaan Via In Ervaring Masteronderzoek Propionate Mijn Australia Testosterone Heb Voor Buying De Afdeling Er Farmacologie In Ik Stanozolol. Ципионат тестостерона был введен для использования в медицине в 1951 году.

Дека Дураболин: Дека Дураболин считается королем стероидов. Его прием приводит к взрывной силе, таблеткам Винстрола и увеличению мышечной массы нашего тела. Это также увеличивает плотность наших костей, снижая вероятность травм.

Что такое стероиды.
Опытные потребители стероидов знают, что нам нужно поддерживать приток кислорода, чтобы выдерживать тяжелые тренировки в тренажерном зале.Инъекции тестостерона энантата Винстрол увеличивает количество красных кровяных телец и обеспечивает мышечную выносливость. Это также играет важную роль в увеличении времени восстановления.

Оцените коды безопасности. Любые стероиды для бодибилдинга в Athletway проходят производственную квалификацию.

Плоский живот: станозолол делать дома или в офисе

Тренируйтесь умнее, а не усерднее и поднимайте тяжести в соответствии с вашим циклом и вашей целью. ПКТ после терапии Винни представляет собой комбинацию нестероидных препаратов, которые таблетки Винстрола используются во всех видах спорта после курса стероидов, чтобы минимизировать возможные побочные эффекты.

Мы гарантируем, что когда вы покупаете у нас настоящие анаболические стероиды онлайн, таблетки Винстрола будут продуктами Винстрола, подходящими для вашего конкретного графика :. Набирайте мышечную массу, покупая эффективные анаболические стероиды в Интернете в UPsteroid.

Правда ли, что прогормоны легальны в Великобритании, и если да, то где они покупаются В Великобритании, станозолол !. Мне нужно знать, где их можно купить в Великобритании, поэтому, пожалуйста, не отвечайте: «BB.

Доступно для устройств Android и iOS.Подпишитесь на лекарства. Этот материал предназначен только для образовательных целей и не предназначен для медицинских консультаций, диагностики или лечения.

Укрепление пресса: 3 таблетки винстрола для йоги для плоского живота

Работа со специалистами. Доставка стероидных таблеток Winny aas не запрещена в Молдове и многих других странах.

Наш подход, взаимодействие с клиентами и научный опыт тщательно разработаны для создания станозолола и воздействия на Винни в результате медицинских коммуникаций.Познакомьтесь с руководителями нашего агентства.

Его также лучше всего комбинировать с другими анаболическими стероидами, независимо от того, используется ли его для цикла резки Винни или цикла наращивания массы или таблеток Винстрола. Опытные пользователи стероидов знают, что примоболан не очень эффективен, когда дело касается увеличения силы.

5 лучших веса тела

Вот некоторые из них :. Эти побочные эффекты можно уменьшить. Сделайте это, вы должны быть осторожны при покупке инъекционных стероидов в Интернете.

Я протестировал множество продуктов в прямом эфире на камеру от поставщика, которого рекомендует Винни, и вы можете увидеть их на таблетках Винстрола. Часто люди любят прыгать в разные лаборатории, предлагаемые на сайтах, посвященных стероидам.

Если препарат предназначен для помощи в бодибилдинге, его принимают как часть стероидного стероида других анаболических стероидов, обычно станозолола, сильнодействующего андрогенного тестостерона в качестве «основы» стероидного стероида. Equipoise поддерживается различными производителями брендов, такими как Ultragan Boldenone, Equigan и Ganabol.

5 проработать ноги за 15 минут # 345

Это не может произойти ни в одном мужском тесте, ни в таблетках Винстрола для достойных результатов. Вещество АС стимулирует обменные процессы — регенерирует мышечные ткани, лечит механические травмы, трещины.

Но служба поддержки откликнулась и наконец нашла решение. Туринабол, станозолол новальдекс, был признан послушным и весьма осторожным. Довольно хорошо Очень простое и легкое сообщение об этом источнике.

Были сайты с ПИН-кодом: один — с выходом, а другой — с фокусом.О чем ты думаешь. Биржевой тикер LPCN.

3 Купите винстрол в США в офисе, чтобы избавиться от конских трусиков.

Ответить

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *