10 весомых причин начать принимать «Q10»
Коэнзим Q10 представляет собой пищевую добавку, подобную витамину, который содержится в каждой из клеток организма. Его самая высокая концентрация обнаружена в клетках сердечной мышцы, печени, головного мозга и десен. Коэнзим является важным компонентом, который способствует укреплению нашего здоровья. Тем не менее, большинство людей не знают о важности его присутствия в организме, и того факта, что после 35 лет, и с возрастом, его уровень в организме снижается, и поэтому необходимо пополнять его в виде приема ежедневной пищевой добавки.
Не знаете, почему вы должны принимать коэнзим Q10?
Мы решили рассказать вам о 10-и весомых причинах:
1. Коэнзим Q10 участвует в механизме, ответственном за производство клеточной энергии, поэтому его называют «свечей зажигания клеток». Если мы сравним наше тело с автомобилем, наша пища сравнима с топливом для автомобиля, а Q10 является как бы свечей зажигания.
2. Это особенно мощный антиоксидант. В процессе производства энергии в клетках, также происходит образование свободных радикалов, которые могут, при высокой концентрации, наносить существенный вред здоровью. Q10 играет двойную роль в механизме производства энергии клетки, с одной стороны, способствует увеличению производства энергии, а с другой — помогает нейтрализовать свободные радикалы, высвобождаемые в процессе производства.
Коэнзим Q10 играет важную роль главным образом в создании энергии в клетках миокарда.4. Он необходимо для тех, кто принимает препараты статиновой группы-
5. Достаточное количество Q10 в организме особенно благоприятно сказывается на здоровье мозга. Правильный процесс производства энергии в клетках мозга необходим для его здорового функционирования. Коэнзим Q10, который отвечает за производство энергии и антиоксидантов, может замедлять старение клеток мозга и сохранять хорошую функциональность мозга.
Q10 оказывает благоприятное влияния на состояние десен. Пищевая добавка, содержащая коэнзим Q10 улучшает состояние десен, уменьшает глубину дёсенных карманов, уменьшает припухлости, уменьшает кровотечения, снижает болевые ощущения и уменьшает потерю костной массы.7. Q10 обеспечивает поддержку иммунной системы. Коэнзим Q10 обеспечивает энергию, необходимую для нашей иммунной системы, и улучшает ее функционирование, путем улучшения процесса поглощения кислорода в клетках. При этом он помогает организму справляться с внешними инфекциями.
9. Коэнзим улучшает фертильность. Q10 улучшает фертильность у мужчин, улучшая подвижность сперматозоидов.
10. Коэнзим повышает результативность спортсменов. В процессе занятий спортом, потребление кислорода в клетках увеличивается, с целью создания достаточного количества энергии для деятельности организма с высокой интенсивностью.
Теперь вы уже знаете, Коэнзим Q10 присутствует в каждой клетке человеческого тела, обеспечивая энергию и, таким образом, участвуя в деятельности систем организма!
ПРИМЕНЕНИЕ КОЭНЗИМА Q 10 В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИИ | Перепонов
1. Ольбинская Л. И., Андрущишина Т. Б. Рациональная фармакотерапия артериальных гипертензий // РМЖ 2001, Т. 9, № 15, с 615–621.
3.
Guidelines Subcommitee. 1999 World Health Organization – International Society of Hypertension guidelines for the management of hypertension // J. Hypertens. 1999; 17: 151–183.
4. Strocchi E., Bossini A., Ranieri G. et al. Efficacy and tolerability of enalapril (20 mg)/hydrochlorothiazide (12.5 mg) combination therapy in essential hypertension // Clin. Ther., 1991; 13 (6): 737– 746.
5. Tatti P., Pahor M., Byington R. P. et al. Outcome results of the Fosinopril Versus Amlodipine Cardiovascular Events Randomized Trial (FACET) in patients with hypertension and NIDDM // Diabetes Care, 1998; 21 (4): 597–603.
6. ALLHAT Officers and Coordinators for the ALLHAT Collaborative Research Group Major outcomes in high–risk hypertensive patients randomized to angiotensin–converting enzyme inhibitor or calcium channel blocker vs diuretic: The Antihypertensive and Lipid– Lowering Treatment to Prevent Heart Attack Trial (ALLHAT)// JAMA, 2002; 288 (23): 2981–2997.
7. Аронов Д. М. Применение коэнзима Q10 в кардиологической практике // РМЖ, 2004; том 12, № 15 (215), стр. 905–909.
8. Burke BE, Neuenschwander R, Olson RD. Randomized, double-blind, placebo-controlled trial of coenzyme Q10 in isolated systolic hypertension // South Med. J., 2001, 91 (11), 1112–1117.
9. Singh RB, Shinde SN, Chopra RK, et al. Effect of coenzyme Q10 on experimental atherosclerosis and chemical composition and quality of atheroma in rabbits // Atherosclerosis, 2000, 148 (2), 275–282.
10. Singh RB, Niaz MA. “Serum concentration of lipoprotein (a) decreases on treatment with hydrsoluble coenzyme Q10 in patients with coronary artery disease: discovery of a new role // Int.
J. Cardiol., 1999, 68 (1), 23–29.
11. Singh RB, Neki NS et al. Effect of coenzyme Q10 on risk of atherosclerosis in patients with recent myocardial infarction // Mol.Cll.Biochem., 2003, 264 (1–2), 75–82.
12. Singh RB, Niaz MA, Rastogi SS et al. Effect of hydrosoluble coenzyme Q10 on blood pressures and insulin resistance in hypertensive patients with coronary artery disease // J. Hum.Hypertens., 1999, 13 (3), 203–208.
13. Choy RJ, Deng YM et al. Coenzyme Q (10) supplementation inhibits aortic lipid oxidation but fails to attenuate intimal thickening in balloon-injured New Zealand white rabbits // Free. Radic. Biol. Med., 2003, 1, 35 (3), 300–309.
14. Hodgson JM, Watts GF et al.
Coenzyme Q10 improves blood pressure and glycaemic control: a controlled trial in subjects with type 2 diabetes // Eur.Clin.Nutr., 2002, 56 (11), 1137–1142.
15. Rosenfeldt F, Hilton D, Pepe S, Krum H. Systematic review of effect of coenzyme Q10 in phtysical exercise, hypertension and heart failure // Biofactors, 2003, 18 (1–4), 91–100.
16. Rosenfeldt FL, Pepe S et al. Coenzyme Q10 improves the tolerance of the senescent myocardium to aerobic and ischemic stress: studies in rats and in human atrial tissue // Biofactors, 1999, 9 (2–4), 291–299.
17. Rosenfeldt FL, Pepe S, Linnane A et al. The effects of ageing on the response to cardiac surgery: protective strategies for the ageing myocardium // Biogerontology, 2002, 3 (1–2), 37–40.
18.
Rosenfeldt FL, Pepe S, Linnane A, Nagley P et al. Coenzyme Q10 protect the aging heart against stress: studies in rats, human tissues, and patients // Ann. N. N. Acad.Sci., 2002, 959, 355–359.
19. Crestanello JA, Doliba NM et al. Effect of coenzyme Q10 supplementation on mitochondrial function after myocardial ischemia reperfusion // J. Surg.Res., 2002, 102 (2), 221–228.
20. Langsjoen PH, Langsjoen PH, Folkers K. Isolated diastolic dysfunction of the myocardium and its response to coenzyme Q10 treatment // Clin.Investig., 1993, 71, 140–144.
21. Langsjoen PH, Folkers K et al. Pronounced increase of survival of patients with cardiomyopathy when treated with coenzyme Q10 and conventional therapy // Int.Tissue React., 1990, 12 (3), 163–168.
22.
Langsjoen PH, Langsjoen A, Willis R, Folkers K. Treatment of hypertrophic cardiomyopathy with coenzyme Q10 // Mol. Aspects Med., 1997, 18, 145–151.
23. Неart Protection study Collaborative Group. MRC/BHF Heart Protection Study of antioxidant vitamin supplementation in 20536 high-risk individuals: a randomized placebo-controlled trial // Lancet, 2002, 360, 23–33.
24. Langsjoen P, Langsjoen P, Willis R, et al. Treatment of essential hypertension with coenzyme Q10 // Mol Aspects Med. 1994;15 Suppl: S265–72.
25. Hodgson JM, Watts GF et al. Coenzyme Q10 improves blood pressure and glycaemic control: a controlled trial in subjects with type 2 diabetes // Eur. Clin. Nutr., 2002, 56 (11), 1137–1142.
26.
Ishii N, Senoo-Matsuda N, Miyake K et al. Coenzyme Q10 can prolong C. elegans lifespan by lowering oxidative stress//Mech.Ageing.Dev., 2004, 125 (1), 41–46.
27. Judy WV, Stogsdill WW, Folkers K. Myocardial preservation by therapy with coenzyme Q10 during heart surgery//Clin.Investig, 1993, 71 (8), 155–161.
28. Kishimoto C, Tomioka N, Nakayama Y. et al. Anti-oxidant effects of coenzyme Q10 on experimental viral myocarditis in mice//J. Cardiovasc.Pharmacol., 2003, 42 (5), 588–592.
29. Kuklinski B, Weissenbacher E, Fahnrich A. Coenzyme Q10 and antioxidants in acute myocardial infarction//Mol. Aspects Med., 1994, 15, 143–147.
30. Kwong LK, Kamzalov S, Rebrin I. et al. Effects of coenzyme Q10 administration on its tissue concentrations, mitochondrial oxidant generation, and oxidative stress in the rat//Free Radic.
Biol.Med., 2002, 33 (5), 627–638.
31. Lenaz G, D’Aurelio M, Merlo Pich M et al. Mitochondrial bioenergetics in aging//Biochim.Biophys. Acta, 2000, 1459 (2–3), 397–404.
32. Mortinsen SA. Overview of coenzyme Q10 as adjunctive therapy in chronic heart failure. Rationale, design and end-points of “Q-symbio” – a multinational trial//Biofactors, 2003, 18, 79–89.
33. Тang PH, Miles MV, DeGrauw et al. AHPLC analysis of reduced and oxidised coenzyme Q10 in human plasma//Clin Chem 2001;47:256–265.
Как правильно принимать коэнзим Q10: показания и дозировка?
Про коэнзим Q10 слышали многие, но мало кто из неспециалистов скажет точно, что это такое, какова польза этого вещества для организма, и как употреблять содержащие его препараты и добавки.
Что это такое?
Коэнзим Ку10 (кофермент CoQ10) — вещество, присутствующее в митохондриях. Последние являются своеобразными электростанциями клеток и защищают их от повреждения в ходе окислительных процессов, воздействия бактерий и вирусов.
Внимание! Коэнзим Ку10 вырабатывается организмом человека, но с годами эта способность снижается, и количество кофермента Q10 уменьшается. У человека возникают проблемы со здоровьем и появляются признаки старения. Восполнить недостаток этого вещества можно, употребляя специальные пищевые добавки.
Окислительные процессы выделяют свободные радикалы, препятствующие нормальному функционированию клеток. Радикалы вызывают бесконтрольное деление клеток, в результате чего появляются поврежденные либо клетки-мутанты.
Причины недостатка CoQ10 в организме
Пожилой возраст — не единственная причина дефицита CoQ10.
Он может наблюдаться вследствие:
- недостатка витамина B6;
- повышенных потребностей организма в этом веществе ввиду некоторых патологий;
- генетических нарушений;
- митохондриальных болезней;
- лечения статинами.
Показания к приему CoQ10
Низкий уровень коэнзима Ку10 может привести к развитию заболеваний сердца и сосудов, сахарного диабета, болезни Альцгеймера. Дефицит этого вещества наблюдается у людей с онкологией.
Однако до сих пор не установлено, вызываются ли подобные проблемы со здоровьем низким уровнем CoQ10 или сами становятся причиной его отклонения от нормы. Доказано лишь, что это вещество полезно употреблять при следующих проблемах:
- Сердечной недостаточности. Она становится причиной плохого снабжения тканей и органов кислородом и необходимыми питательными веществами, а также замедляет процессы выведения продуктов обмена.
Большинство методов лечения имеют побочные эффекты, включая снижение уровня CoQ10. Прием препаратов с этим веществом улучшает состояние пациентов с сердечной недостаточностью и снижает риск летального исхода. - Сниженных репродуктивных способностях. У женщин прием препаратов с CoQ10 повышает возможность зачатия и вероятность рождения здорового ребенка. У мужчин, за счет антиоксидантной защиты, они улучшают качественные показатели спермы.
- Уставшей и преждевременно увядшей коже. Использование средств для ухода за кожей с CoQ10 повышает ее защитные возможности и увеличивает производство энергии в клетках, препятствуя ее старению.
Большинство методов лечения имеют побочные эффекты, включая снижение уровня CoQ10. Прием препаратов с этим веществом улучшает состояние пациентов с сердечной недостаточностью и снижает риск летального исхода.Внимание! Препараты или добавки с коэнзимом Q10 полезны для спортсменов. Они повышают силу и выносливость, улучшают результаты и способствуют скорейшему восстановлению организма.
Инструкция по применению
Применять препараты с коферментом нужно по назначению врача.
Он определит схему приема для конкретного пациента.
Для здорового человека суточная доза составляет 200 мг. Курс приема — 3 недели. Затем доза уменьшается до 100 мг в день.
Для спортсменов и/или людей, постоянно пребывающих в состоянии стресса, а также гипертоников, доза постоянная и составляет 200 мг.
При сердечной недостаточности (по назначению врача) или при высокой физической активности принимают по 300–600 мг препарата в сутки.
Суточную дозу разделяют на три приема.
Противопоказания
Прием кофермента Q10 пациентами, которым назначены препараты, снижающие уровень холестерина в крови, может осуществляться только после консультации с лечащим врачом. Тот же совет касается людей с сахарным диабетом.
Внимание! От приема коэнзима Q10 следует воздержаться беременным и кормящим матерям, так как нет данных о его влиянии на плод и качество материнского молока.
Принимайте коэнзим Q10, чтобы сохранить молодость и хорошую физическую форму на долгие годы.
Коэнзим Q10 для стабильной и правильной работы организма
Коэнзим Q10 – полезное вещество, которое улучшает состояние организма на клеточном уровне и замедляет процессы старения
В статье описана история появления коэнзима Q10. Перечислены его функции, преимущества, и рассмотрены полезные свойства.
Коэнзим Q10 является важной составляющей каждой клетки. Это полезное вещество, которое не относится к витаминам, хорошо растворяется в воде, не имеет побочных эффектов и не причиняет вреда организму человека.
Внимание! Наибольшее количество данного убихинона содержится в сердце.
История появления
Появление этого вещества, подобного витаминам, в медицине отмечено в 1957 году. При исследовании митохондрий говяжьего сердца, в котором содержится максимальное количество этого компонента, Фредерик Крен установил химическую структурную формулу убихонона.
Коэнзим содержится не только в теле людей, но и в тканях растений и всех животных организмов. Он выполняет роль транспортировки энергии от митохондрий к каждой клетке, нуждающейся в пополнении запасов.
В 1978 году Питер Митчел доказал необходимость использования этого вещества в медицине и получил за открытие механизма его синтеза Нобелевскую премию. В связи с этим, начиная с 1980-х годов количество исследований мощного антиоксиданта, который не причиняет вреда здоровью человека, постоянно увеличивается.
Внимание! Основными функциями коэнзима являются сохранение целостности митохондрий и активизация окислительно-восстановительных реакций в организме. При достаточном количестве он стимулирует выработку клеточной энергии.
Благодаря такой трансформации полезных веществ происходит блокировка свободных радикалов, что ускоряет работоспособность мозга, позволяет замедлить процессы старения и улучшить здоровье человека.
Польза коэнзима
Польза убихинона для организма человека очевидна. Это вещество:- нормализует давление, работу сердца;
- способствует быстрому восстановлению организма;
- является необходимым средством при профилактике диабета;
- помогает снизить риск заболеваемости десен;
- в сочетании с прочими препаратами имеет свойство активизировать процессы заживления ран;
- помогает выводить токсины и шлаки;
- защищает организм человека от вредных веществ, что позволяет повысить скорость сжигания жира в процессе занятий спортом;
- обладает антиоксидантными свойствами;
- передает энергию клеткам организма, пополняя их энергетические запасы;
- оказывает положительное влияние на митохондрии клеток;
- снижает риск развития наследственных и генетических заболеваний;
- замедляет старение;
- повышает иммунитет;
- способствует укреплению волос;
- улучшает состояние кожных покровов.
Чем чреват дефицит коэнзима Q10
При недостатке коэнзима Q10 в организме человека наблюдается ухудшение памяти, ощущение дискомфорта, психического состояния, обострение заболеваний различного характера. Обеспечить достойную защиту органов, тканей и всего организма на клеточном уровне можно при помощи употребления соответствующих добавок, в которых содержится максимальное количество полезного убихинона.
Научные и медицинские исследования неоднократно доказали пользу применения коэнзима Q10, который обладает множеством положительных свойств и способен повысить продолжительность жизни человека.Отказ от ответсвенности
Обращаем ваше внимание, что вся информация, размещённая на сайте
Prowellness предоставлена исключительно в ознакомительных целях и не является персональной программой, прямой рекомендацией к действию или врачебными советами.
Не используйте данные материалы для диагностики, лечения или проведения любых медицинских манипуляций. Перед применением любой методики или употреблением любого продукта проконсультируйтесь с врачом. Данный сайт не является специализированным медицинским порталом и не заменяет профессиональной консультации специалиста. Владелец Сайта не несет никакой ответственности ни перед какой стороной, понесший косвенный или прямой ущерб в результате неправильного использования материалов, размещенных на данном ресурсе.
Коэнзим Q10 капсулы 700мг №30 цена от 218 руб. в аптеках Апрель, инструкция по применению и аналоги
Рекомендуется в качестве биологически активной добавки к пище – дополнительного источника коэнзима Q10.
Не является лекарством.
Если Вы чувствуете, что Ваш организм истощен, Вы устаете и нет сил на новые свершения, то скорее всего у Вас дефицит Коэнзима Q10.
Коэнзим Q10 – это витаминоподобное вещество, которое относится к группе «убихинонов», переводится как «вездесущий», присутствующий в каждой клетке нашего организма.
От него зависит срок жизни клетки и, как следствие, здоровье, молодость и нормальное функционирование всех органов.
Коэнзим Q10 синтезируется в организме в основном в печени. В молодости концентрация убихинона в организме максимальна. Но, к сожалению, с возрастом запасы Коэнзима Q10 неумолимо истощаются под воздействием многих факторов.
Первые признаки старения человеческого организма начинают проявляться уже к 30 годам. Снижается физическая активность, повышается утомляемость и чувствительность к стрессам. Процессы восстановления происходят значительно медленнее, защитные функции организма ослабевают, развивается хроническая усталость, начинают проявляться нарушения в работе сердечно-сосудистой системы.
Все эти процессы связаны с недостаточной выработкой энергии в клетках и уменьшением содержания Коэнзима Q10 в организме.
Поэтому очень важно, чтобы Коэнзим Q10 поступал регулярно и в достаточном количестве с пищей и пищевыми добавками.
ПОЛЬЗА КОЭНЗИМА Q10:
• способствует ускорению процессов заживления и регенерации тканей
• способствует замедлению процессов старения
• способствует выработке энергии и укреплению организма
• способствует улучшению клеточного дыхания и ускорению обменных процессов в клетке
• способствует улучшению функций сердца, нормализации глюкозы в крови и контролю уровня холестерина
КОЭНЗИМ Q10 – МОЛОДОСТЬ КЛЕТОК
В результате жизнедеятельности в организме человека появляются, так называемые, свободные радикалы.
Это агрессивные молекулы, которые поражают здоровые клетки, разрушают ферменты и причиняют различный вред организму. Действия свободных радикалов приводят к окислительным процессам в организме, снижению иммунитета и, как следствие, раннему старению и развитию болезней.
Коэнзим Q10 активно нейтрализует свободные радикалы, одновременно многократно усиливает и поддерживает работу антиоксидантной системы организма, защищая клетки, ткани и органы. Предупреждая окислительные повреждения в организме, Коэнзим Q10 способствует торможению процессов старения.
КОЭНЗИМ Q10 – ЭНЕРГИЯ КЛЕТОК
Коэнзим Q10 – главнейший участник энергетического обмена, причастный к выработке почти всей клеточной энергии. И менно Коэнзим Q10, ускоряя обменные процессы, превращает питательные вещества в полезную энергию, которая требуется для обновления, восстановления и поддержания жизнедеятельности всех клеток организма.
Самыми чувствительными органами к недостатку Коэнзим Q10 являются: сердце, мозг, печень, почки, поджелудочная железа, так как процессы метаболизма в них более активны.
Сердце – это живой мотор, работа которого не может прекратиться ни на секунду, поэтому клетки сердечной мышцы постоянно нуждаются в огромном количестве энергии. Без энергии и работа мозга замедляется, снижается активность нервных импуль
сов и, как следствие, замедляются все умственные процессы.
Коэнзим Q10 – это уникальное вещество, которое наполняет каждую клетку организма жизненной энергией, продлевает полноценную умственную и физическую активность.
Коэнзим Q10 – придает сил для борьбы и победы над недугом!
Применение коэнзима Q10 в кардиологической практике
Препараты на основе коэнзима Q10, которые появились на российском фармацевтическом рынке относительно недавно, с самого начала вызвали большой интерес у клиницистов. С каждым годом возрастает перечень заболеваний, при которых эти препараты показали свою эффективность либо представляются весьма перспективными для дальнейших исследований. Наиболее изучены результаты применения коэнзима Q10 в кардиологии, в частности в комплексном лечении сердечной недостаточности.
Об этом — наша беседа с известным российским кардиологом, руководителем отдела кардиологической реабилитации и вторичной профилактики ГНЦ профилактической медицины Минздравсоцразвития России, профессором Давидом АРОНОВЫМ.
— Давид Меерович, какими свойствами коэнзима Q10 обусловлена его эффективность при лечении различных заболеваний, в первую очередь сердечно-сосудистых?
— Сначала небольшой исторический экскурс. Коэнзим Q10 (или убихинон) — жирорастворимое биологическое соединение, ко-фермент митохондриальных ферментных комплексов, был открыт в 1955 г. американским исследователем Фредериком Крейгом, выделившим его из бычьего сердца. 21 год спустя известный английский биохимик Питер Митчел получил Нобелевскую премию по химии за внесенный им вклад в понимание процесса переноса биологической энергии и доказательство важнейшей роли коэнзима Q10 в энергетическом балансе клеток организма. Оказалось, что этот биологический субстрат имеет большое значение в двух направлениях: как незаменимый компонент клеток, принимающий участие в синтезе АТФ и энергообеспечении организмов и как незаменимый антиоксидант.
Далее шло интенсивное накопление клинического материала по использованию коэнзима Q10 в самых разных областях медицины. Он оказался эффективным средством в силу своих энерготропных и антиоксидантных свойств, поскольку многие болезни сопровождаются нарушением энергетического обмена и оксидативным стрессом.
В первую очередь это относится к сердечно-сосудистым заболеваниям. Коэнзим Q10 входит в их комплексную терапию, увеличивает общий суммарный эффект лечения. С учетом основного предназначения коэнзима Q10 -обеспечения достаточного энергообразования для нормальной функциональной активности клеток (особенно в миоцитах скелетных мышц и в кардиомиоцитах) -легко предположить, что он может оказаться полезным при лечении хронической сердечной недостаточности. Исследования, проведенные по правилам доказательной медицины, показали, что это средство эффективно при комплексном лечении сердечной недостаточности, при которой серьезно страдают энергетика и сократительная функция мышц. Помимо антиоксидантного действия, коэнзим Q10 обеспечивает функцию внешнего дыхания в цикле Креббса с целью снабжения организма необходимым количеством АТФ.
Дополнительное образование энергии при сердечной недостаточности — важная составляющая эффективности лечения этого тяжелого заболевания. В результате увеличивается физическая работоспособность пациентов, исчезают основные проявления сердечной недостаточности — отеки, одышка, нарушения ритма сердца.
Установлено, что дефицит коэнзима Q10 может способствовать развитию атеросклероза, поэтому его дополнительное поступление экзогенным путем может служить фактором, предотвращающим атеросклероз. Это было доказано в ходе экспериментальных исследований. Представляется перспективным использование данного средства при лечении нейродегенеративных заболеваний (болезнь Альцгеймера, паркинсонизм и др.). Предварительные результаты выглядят обнадеживающими, исследования в этом направлении продолжаются.
— Вы упомянули об эффективности коэнзима Q10 при лечении сердечной недостаточности. Это как-то подтверждено клиническими исследованиями?
— Да, существует значительное число клинических и экспериментальных работ по применению этого средства при хронической сердечной недостаточности.
Например, в 2003 г. S.A.Mortensen провел метаанализ таких исследований. Для метаанализа было подобрано и включено 13 двойных слепых рандомизированных исследований по данному вопросу. В 10 из них и в сумме всех работ получены достоверные свидетельства улучшения функционального класса больных, повышения толерантности к физической нагрузке, снижения частоты госпитализаций.
В другой метаанализ, проведенный примерно в то же время F.Rosenfeld, было включено 9 рандомизированных исследований. У больных, принимавших коэнзим Q10, выявлена тенденция к улучшению течения болезни и увеличению продолжительности нагрузочной пробы. Эти же авторы представили результаты собственного рандомизированного двойного слепого плацебоконтролируемого исследования по применению коэнзима Q10 у группы больных хронической сердечной недостаточностью. Установлено, что за 3 месяца лечения у больных основной группы достоверно улучшился класс тяжести сердечной недостаточности.
Итальянское исследование Baggio с коллегами, пожалуй, является уникальным по числу включенных в него больных c сердечной недостаточностью II и III ФК (2664 человека).
Длительность наблюдения — 3 месяца. Исследователи ставили перед собой задачу изучить на основании опросного метода клиническую эффективность и безопасность препарата. Примечательно то, что за период лечения у значительной части больных произошло улучшение более чем в 2 раза со стороны таких показателей, как цианоз, отеки, субъективное ощущение больными аритмии, бессонница, головокружение. Эти данные, на мой взгляд, убедительно доказывают эффективность коэнзима Q10в лечении сердечной недостаточности.
— Значит, применение при сердечной недостаточности доказательно обосновано. А данные исследований по эффективности применения коэнзима Q10 при других сердечно-сосудистых заболеваниях, например инфаркте миокарда, артериальной гипертонии, столь же убедительны?
— Исследований с положительными результатами по применению коэнзима Q10 при этих патологиях тоже достаточно. В качестве примера могу сказать об исследовании, которое провел в 2003 г. R.B. Singh с учетом требований доказательной медицины.
В этом исследовании одна группа больных после острого инфаркта миокарда получала коэнзим Q10 на фоне стандартной терапии, другая — продолжала стандартную терапию. Через год у больных, получавших коэнзим Q10, в 2 раза реже случились сердечно-сосудистые события, нефатальные инфаркты миокарда и кардиальная смерть. При остром инфаркте миокарда выявлен один из возможных механизмов положительного действия коэнзима Q10 — предотвращение развития синдрома удлиненного Q-Т. Последний, как известно, сопряжен с более частой кардиальной смертью, особенно у больных острым инфарктом миокарда. Польские авторы наблюдали в течение одного года 61 больного с острым инфарктом миокарда. Через 6 часов от начала инфаркта миокарда госпитализированные больные рандомизи-рованно получали либо плацебо, либо коэнзим Q10 на фоне одинакового лечения, применяемого при инфаркте и в постинфарктном периоде. У 40% больных контрольной группы наблюдалось удлинение интервала Q-T > 440 мс, в группе больных, получавших коэнзим Q10, удлинения интервала Q-T не наблюдалось.
В течение года от повторных инфарктов умерли 20% больных контрольной группы и ни одного из основной группы. Авторы полагают, что такая благоприятная ситуация у больных основной группы объясняется тем, что они в остром периоде инфаркта миокарда и далее в течение одного года получали антиоксиданты, в том числе коэнзим Q10.
Что касается применения коэнзима Q10 при артериальной гипертонии, то был проведен метаанализ рандомизированных плацебоконтролируемых исследований, посвященных этому вопросу. Его провели F.Rosenfeld и коллеги. По их данным, произошло достоверное снижение систолического и диастолического артериального давления. С учетом отсутствия у коэнзима Q10 побочных эффектов авторы полагают, что этот препарат может использоваться для усиления гипотензивного эффекта основных гипотензивных средств.
— Коэнзим Q10 — жирорастворимое вещество, такое же, как и витамин А, усвоение которого в организме возможно при употреблении с жирной пищей. Относится ли это и к коэнзиму Q10?
— Да, это так.
Для усвоения коэнзим Q10 также необходимо принимать с жирной пищей. Однако сейчас на нашем фармацевтическом рынке существует не только жирорастворимая, но и водорастворимая форма этого соединения (Кудесан). Разницу в их усвоении хорошо иллюстрирует исследование по сравнению биодоступности жирорастворимой и водорастворимой форм коэнзима Q10. При этом было показано, что водорастворимая форма усваивается организмом более чем в 2 раза лучше. Также различие между жирорастворимой и водорастворимой формами коэнзима Q10 хорошо демонстрирует российское исследование по применению препарата при реперфузии миокарда у животных с экспериментальным инфарктом миокарда. В клиническом плане этот феномен приобретает значимость в условиях палат интенсивного наблюдения у больных инфарктом миокарда после применения тромболитических средств. Имеются доказательства того, что коэнзим Q10 в эксперименте на животных предотвращает реперфузионное повреждение миокарда, как и при непосредственной ишемии. Защитное действие коэнзима Q10 в условиях ишемии и реперфузии исследовалось на крысах.
Особенность этой работы заключалась и в том, что сопоставлялась эффективность двух форм коэнзима Q10 — водорастворимой и жирорастворимой. Скорость генерации свободных радикалов кислорода в митохондриях сердец крыс, получавших водорастворимую форму убихинона, была примерно в 2 раза ниже, чем в контрольной группе, в то время как в группе жирорастворимого убихинона эта величина достоверно не отличалась от контрольного уровня. Как видно из этого исследования, водорастворимая форма препарата оказалась более действенной.- Известно, что с возрастом эндогенный синтез убихинона уменьшается. В связи с этим возникает вопрос о возможности применения этого средства с профилактической целью у пожилых больных.
— Таким больным с профилактической целью можно принимать коэнзим Q10 на начальной стадии развития сердечно-сосудистых заболеваний, в период ухудшения самочувствия, а как лекарство в течение длительного периода — при сердечной недостаточности, мышечном истощении, физической слабости.
Действительно, старение сопровождается снижением синтеза убихинона. Снижение его естественной концентрации с возрастом, а также наблюдаемая при ряде сердечно-сосудистых заболеваний низкая концентрация коэнзима Q10 наводит на мысль о превентивной роли этого важного биологического субстрата в предотвращении преждевременной кардиальной смерти. Митохондриальная теория старения исходит из того, что старение наступает вследствие мутаций ми тохондриальной ДНК под влиянием кислородных радикалов, ведущих к снижению энергообразования. Достаточная концентрация в тканях коэнзима Q10 предотвращает патологические окислительные процессы внутри клеток и тормозит процесс старения.
Работами австралийских исследователей установлено, что при стимуляции изолированных сердец старых крыс, предварительно получавших коэнзим Q10, после электрической стимуляции сердца работоспособность и максимальная потребность в кислороде были значительно выше, чем у контрольных крыс, не получавших коэнзима Q10.
Это наводит на мысль о том, что коэнзим Q10 может рассматриваться как вещество, препятствующее возрастному снижению работоспособности миокарда.
В другом исследовании пожилые (более 70 лет) и менее пожилые (моложе 70 лет) пациенты за 2 недели до кардиохирургического вмешательства получали коэнзим Q10 или плацебо. У пожилых пациентов, получавших в предоперационный период коэнзим Q10, отмечались достоверно меньшая концентрация тропонина I в крови, более высокая насосная функция сердца, более короткая продолжительность пребывания в стационаре. Кроме того, была установлена более эффективная дыхательная функция митохондрий. Всё это свидетельствует, о том, что предоперационная подготовка пожилых больных с помощью коэнзима Q10 повышает митохондриальное энергообеспечение, улучшает функцию сердца в послеоперационном периоде, уменьшает повреждения сердца во время операции и ускоряет выписку больных из стационара. Таким образом, коэнзим Q10, играющий важную роль в жизнедеятельности каждой клетки организма, может быть использован как эффективное дополнительное средство при лечении ряда заболеваний и для предотвращения ускоренного развития процесса старения.
При этом в первую очередь следует иметь в виду такие патологические расстройства сердечно-сосудистой системы, как атеросклероз и дислипидемии, различные формы ИБС, недостаточность кровообращения различной этиологии. Надо отметить, что для диагностических целей, для более обоснованного назначения препаратов коэнзима Q10 и для контроля за проведением лечения препаратами коэнзима Q10 желательно определять уровень коэнзима в крови пациентов. Но, к сожалению, в настоящее время в нашей стране таких анализов не делают.
— Насколько безопасен коэнзим Q10? Есть ли у него какие-либо нежелательные взаимодействия c другими препаратами — ведь больным сердечнососудистыми заболеваниями приходится принимать немало лекарственных средств? И как долго его надо принимать?
— Коэнзим Q10 вырабатывается в организме каждого человека. Это вещество можно назвать родным для любого живого существа, даже простейших. Введенное извне, оно ничем не отличается от вырабатываемого в организме в результате сложных химических реакций.
Поэтому даже теоретически препарат не может давать каких-либо осложнений либо иметь противопоказания. В литературе и в моей практике не описано ни одного тяжелого побочного действия, связанного с применением коэнзима Q10. Встречающиеся побочные явления, приблизительно 1% случаев, связаны не с активным веществом, а с другими компонентами препаратов, не влияют на продолжение лечения и проходят самостоятельно. Совместимость с другими лекарствами у коэнзима Q10 хорошая, нет никаких наблюдений нежелательных лекарственных взаимодействий при комплексной терапии.
Ожидаемые эффекты лечения проявляются через 1 месяц приема препарата. Однако это минимальный срок приема коэнзима, после которого можно заметить какие-либо результаты. Максимум эффекта наступает при сроке лечения от 6 месяцев.
Коэнзим Q10 представляется весьма перспективным веществом для применения в кардиологической практике и как средство профилактики, и как средство комплексного лечения. Как вещество, играющее одну из ключевых ролей энергообразования в каждой клетке, а также обладающее антиоксидантными свойствами, может применяться и в других областях медицины.
Беседу вел Фёдор СМИРНОВ.
коэнзим Q10 в комплексной терапии » Медвестник
Уникальность CoQ10 придают его фундаментальные свойства, которые имеют потенциальную пользу в различных клинических ситуациях. Во-первых, CoQ10 является кофактором для митохондриальных ферментных комплексов, участвующих в окислительном фосфорилировании при производстве аденозинтрифосфата (АТФ). Во-вторых, помимо своей роли в создании АТФ, CoQ10 служит поглотителем свободных радикалов. Он является одним из самых мощных эндогенно синтезированных мембранных антиоксидантов, присутствующих во всех мембранах. Его антиоксидантная функция эффективно защищает липиды, ДНК и белки от вредных окислительных повреждений. Были описаны другие многочисленные полезные функции, такие как сигнализация клеток, экспрессия генов и стабилизация мембран.
CoQ10 присутствует во всех тканях в различных количествах, причем наиболее высокие концентрации наблюдаются в тканях с высокими энергетическими потребностями или метаболической активностью, таких как сердце, почки, печень и мышцы.
В норме организм обычно не зависит от экзогенных поставок CoQ10. Однако эндогенный биосинтез может снижаться с возрастом или при некоторых патологических состояниях. В такой ситуации, если количество CoQ10 в рационе питания недостаточное, добавление его в качестве добавки является самым простым способом компенсации нормального потребления.
Исходя из функций CoQ10 оказывает положительное влияние на биомаркеры окислительного стресса, и это подтверждено клиническими исследованиями. Несколько систематических обзоров и метаанализов показали защитное действие этой добавки на маркеры воспаления, гликемические индексы, липидные профили и артериальное давление. Благодаря своим потенциальным положительным эффектам он рассматривается в качестве добавки при многих заболеваниях нервной системы, например, при нейродегенеративных заболеваниях (болезни Паркинсона, боковом амиотрофическом склерозе) и рассеянном склерозе.
Антиоксидантная способность CoQ10 играет важную роль в снижении продукции свободных радикалов и осуществляется путем повышения уровня и активности антиоксидантных ферментов, отвечающих за нейтрализацию свободных радикалов.
Существуют доклинические исследования, подтверждающие возможность использования CoQ10 для увеличения репродуктивной активности, особенно при снижении фертильности путем улучшения митохондриального метаболизма в яйцеклетках, что ведет к увеличению их количества и качества у женщин. В плане влияния коэнзима Q10 на мужской организм было обнаружено, что добавка противодействует снижению тестостерона, вызванному химическими репродуктивными токсинами, главным образом путем противодействия разрушительному действию генерируемых при повреждении прооксидантов.
Во всем мире сердечно-сосудистые заболевания, ассоциированные с атеросклеротическими изменениями, остаются ведущей причиной смерти у взрослых. Важным звеном в терапии таких состояний являются гиполипидемические препараты – статины. Однако длительный прием статинов может быть связан с мышечными жалобами, называемыми статин-ассоциированной миопатией. Одной из причин этого состояния, по некоторым данным, служит индуцированное статинами снижение уровня CoQ10, а значит, и угнетение его функций.
В ряде клинических испытаниях и в самом крупном метаанализе было подтверждено рациональное использование экзогенных добавок CoQ10 для профилактики или улучшения течения таких миопатий.
Благодаря своим свойствам коэнзим Q10 нашел применение в комплексной терапии хронической сердечной недостаточности. Установлено, что у пациентов с сердечной недостаточностью имеется измеримый дефицит CoQ10 как в крови, так и в миокардиальной ткани. Добавление экзогенного CoQ10 улучшает симптомы и уменьшает основные неблагоприятные клинические события. Этот вывод был сделан на основе анализа многоцентрового рандомизированного исследования.
В некоторых испытаниях введение CoQ10 в базисную терапию артериальной гипертензии с эндотелиальной дисфункцией способствовало снижению артериального давления.
Кофермент нашел применение и в комплексной терапии сахарного диабета. Известно, что высокий уровень глюкозы при сахарном диабете приводит к окислительному стрессу и повреждению различных тканей организма из-за дефекта антиоксидантных систем.
Добавление к основной терапии сахарного диабета молекулы CoQ10 улучшало эндотелиальную дисфункцию, воспалительные изменения и метаболический профиль.
В одном из клинических исследований оценивали динамику показателей скорости клубочковой фильтрации, протеинурии и креатинина при диабетической нефропатии. Полученные результаты показали, что эффективность комбинации инсулина и CoQ10 превосходит эффективность монотерапии инсулином со статистическими различиями.
Кроме того, CoQ10 может существенно улучшить метаболические параметры по сравнению с плацебо. Клинические исследования продемонстрировали положительное влияние добавки CoQ10 на снижение массы тела и уровня адиполина у пациентов с ожирением. В дополнение к улучшению важных метаболических профилей добавление CoQ10 может снизить риск сердечно-сосудистых заболеваний за счет снижения уровня общего холестерина и липопротеидов низкой плотности у пациентов, страдающих сахарным диабетом или метаболическим синдромом.
Вещество также нашло применение у взрослых с диагностированной мигренью. В исследовании после трех месяцев приема препарата было зарегистрировано меньшее количество дней с мигренью в месяц, а также снижение признаков тревоги и депрессивных симптомов. Трехмесячная добавка также привела к значительному уменьшению симптомов, таких как фоточувствительность и тошнота, и улучшению качества жизни.
В целом CoQ10 имеет замечательный профиль безопасности, который показывает низкую частоту нежелательных явлений. Положительные свойства коэнзима Q10 и данные исследований могут служить обоснованием для его применения при некоторых нозологиях.
Выбрать подходящий продукт с CoQ10 поможет огромная торговая площадка натуральных продуктов с мировым именем. iHerb удалось собрать богатый ассортимент – более сотни добавок c коэнзим Q10 в различных формах (в порошке, веганских, растительных, мягких капсулах), отличающихся по объему упаковки и дозировке.
Представлены различные торговые марки, включая эксклюзивные бренды CGN и Lake avenue.
Сертификаты GMP гарантируют качество сырья и продуктов.
БАД. НЕ ЯВЛЯЕТСЯ ЛЕКАРСТВЕННЫМ СРЕДСТВОМ.
Источники литературы
1. Zohreh Sadat Sangsefidi, Fatemeh Yaghoubi, Salimeh Hajiahmadi, Mahdieh Hosseinzadeh. The effect of coenzyme Q10 supplementation on oxidative stress: A systematic review and meta HYPERLINK «https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7174219/»‐ HYPERLINK «https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7174219/»analysis of randomized controlled clinical trials. Food Sci Nutr. 2020 Apr; 8 (4): 1766-1776.
2. Qu H, Guo M, Chai H et al. Effects of Coenzyme Q10 on Statin-Induced Myopathy: An Updated Meta-Analysis of Randomized Clinical Trials. J Am Heart Assoc. 2018 Oct 2;(19).
3. Saleem Ali Banihani Biomolecules. Effect of Coenzyme Q HYPERLINK «https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6316376/»10 HYPERLINK «https://www.
ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6316376/»Supplementation on Testosterone Published online 2018 Dec 13.; 8(4): 172.4. Jafari M, Mousavi SM, Asgharzadeh A, Yazdani N. Coenzyme Q10 in the treatment of heart failure: A systematic review of systematic reviews. Indian Heart J. 2018 Jul;70 (Suppl 1):111–S117.
5. Hayder M. Al-Kuraishy, Ali I. Al-Gareeb, Hala A. Shams, Farah Al-Mamorri J. Endothelial dysfunction and inflammatory biomarkers as a response factor of concurrent HYPERLINK «https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6943859/»coenzyme Q10 HYPERLINK «https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6943859/»add-on metformin in patients with type 2 diabetes mellitus. Lab Physicians. 2019 Oct-Dec; 11(4): 317–322.
6. Marta Goschorska, Izabela Gutowska, Irena Baranowska-Bosiacka, Katarzyna Barczak, Dariusz Chlubek The Use of Antioxidants in the Treatment of Migraine Antioxidants (Basel) 2020 Feb; 9(2): 116. Published online 2020 Jan 28.
Конструирование на основе структуры и применение лиганда-миметика нуклеотид-кофермента: Применение для аффинной очистки нуклеотид-зависимых ферментов
Основные моменты
- •
Для создания биомиметического лиганда был использован подход, основанный на структуре.
- •
Фермент Cbo FDH был использован в качестве модели в нашем исследовании.
- •
Лиганд связывается в энергетически стабильной позе с более извилистой конформацией.
- •
Исследования связывания и мутагенеза подтверждают специфичность взаимодействия.
- •
Лиганд использовали для разработки протокола очистки для Cbo FDH.
Abstract
В настоящем исследовании структурный подход был использован для дизайна in silico нуклеотидного коферментного миметического лиганда. Фермент формиатдегидрогеназа (FDH) был использован в качестве модели в нашем исследовании.Биомиметический лиганд был разработан и синтезирован на основе каркаса триптамин / 3-аминопропилфосфоновой кислоты, би-замещенного 1,3,5-триазина (Trz) (Tra-Trz-3APP), который потенциально имитирует взаимодействия NAD + -FDH. сложный. Исследования молекулярного докинга биомиметического лиганда показали, что он может занимать тот же сайт связывания, что и природный кофермент.
Молекулярное моделирование и динамическое моделирование показали, что лиганд связывается в энергетически более стабильной позе в сайте связывания FDH, поскольку он принимает более извилистую конформацию по сравнению с природным коферментом.Изучение взаимодействия FDH / Tra-Trz-3APP-Sepharose посредством исследований адсорбционного равновесия и сайт-направленного мутагенеза выбранных кофермент-связывающих остатков FDH предоставило дополнительные экспериментальные доказательства специфичности взаимодействия. Биомиметический адсорбент Tra-Trz-3APP-Sepharose дополнительно оценивали в отношении ряда различных дегидрогеназ и использовали для разработки протокола одностадийной очистки для FDH. Протокол предоставил фермент с высоким выходом и чистотой, подходящий для аналитических и промышленных целей.
Ключевые слова
Аффинная хроматография
Формиатдегидрогеназа
Дизайн лиганда
Структурная биоинформатика
Сайт-ориентированный мутагенез
Рекомендуемые статьиЦитирующие статьи (0)
Просмотреть полный текст B.
Рекомендуемые статьи
Цитирующие статьи
Коферментная инженерия гипертермофильной 6-фосфоглюконатдегидрогеназы от НАДФ + до НАД + с ее применением в биобатареях
Sakai, H.и другие. Энергетический биотопливный элемент глюкозы / кислорода, работающий в спокойных условиях. Energy Environ. Sci. 2, 133–138 (2009).
CAS Google ученый
Zebda, A. et al. Безмедиаторные мощные глюкозные биотопливные элементы на основе электродов из сжатых углеродных нанотрубок-ферментов. Nat. Commun. 2, 370 (2011).
ADS PubMed PubMed Central Google ученый
Чжу, З.-G.
, Kin Tam, T., Sun, F., You, C. & Zhang, Y.-H. P. Сахарная биобатарея с высокой энергетической плотностью, основанная на синтетическом ферментативном пути. Nat. Commun. 5, 3026 (2014).
ADS PubMed Google ученый
Куни, М. Дж., Свобода, В., Лау, К., Мартин, Г. и Минтир, С. Д. Ферментативные биотопливные элементы. Energy Environ. Sci. 1. С. 320–337 (2008).
CAS Google ученый
Калабрезе Бартон, С., Gallaway, J. & Atanassov, P. Ферментативные биотопливные колокола для имплантируемых и микромасштабных устройств. Chem. Ред. 104, 4867–4886 (2004).
Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Минтир, С. Д., Лиав, Б. Ю. и Куни, М. Дж. Биотопливные элементы на основе ферментов. Curr. Мнение. Biotechnol. 18, 228–234 (2007).
CAS PubMed Google ученый
Окуда-Симадзаки, Дж., Какехи, Н., Ямазаки, Т., Томияма, М. и Соде, К. Система биотопливных элементов, использующая термостабильную глюкозодегидрогеназу. Biotechnol. Lett. 30, 1753–1758 (2008).
CAS PubMed Google ученый
Чжу, З., Сунь, Ф., Чжан, X. и Чжан, Ю.-Х. P. Глубокое окисление глюкозы в ферментативных топливных элементах посредством синтетического ферментативного пути, содержащего каскад двух термостабильных дегидрогеназ. Биосенс. Биоэлектрон. 36. С. 110–115 (2012).
CAS PubMed Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Суранити, Э., Цудзимура, С., Дюран, Ф. и Мано, Н. Термофильный биокатод с билирубиноксидазой из Bacillus pumilus . Электрохим. Commun. 26. С. 41–44 (2013).
CAS Google ученый
Wang, Y. & Zhang, Y. P. Избыточная экспрессия и простая очистка 6-фосфоглюконатдегидрогеназы Thermotoga maritima в Escherichia coli и ее применение для регенерации НАДФН. Microb. Cell Fact.8, 1 (2009).
Google ученый
Bornscheuer, U. et al. Разработка третьей волны биокатализа. Nature 485, 185–194 (2012).
ADS CAS PubMed PubMed Central Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Дэвидс Т., Шмидт М., Бёттчер Д. и Борншойер У. Т. Стратегии открытия и разработки ферментов для биокатализа. Curr. Мнение. Chem.Биол. 17. С. 215–220 (2013).
CAS PubMed Google ученый
Гювен, Г., Проданович, Р., Шванеберг, Ю. Белковая инженерия — вариант дизайна ферментативных биотопливных клеток. Электроанал, 22 (2010), 765–775.
Google ученый
Вонг, Т. С. и Шванеберг, У. Белковая инженерия в биоэлектрокатализе. Curr. Мнение. Biotechnol. 14. С. 590–596 (2003).
CAS PubMed Google ученый
Роллин, Дж.
А., Там, Т. К. и Чжан, Я.-Х. П. Новая парадигма биотехнологии: бесклеточные биосистемы для биопроизводства. Зеленый. Chem. 15. С. 1708–1719 (2013).
CAS Google ученый
Woodyer, R., van der Donk, W. A. и Zhao, H. Ослабление специфичности никотинамидного кофактора фосфитдегидрогеназы с помощью рационального дизайна.Биохимия 42, 11604–11614 (2003).
CAS PubMed Google ученый
Ву, Дж. Т., Ву, Л. Х. и Найт, Дж. А. Стабильность НАДФН: влияние различных факторов на кинетику разложения. Clin. Chem. 32, 314–319 (1986).
CAS PubMed Google ученый
Banta, S.
, Swanson, BA, Wu, S., Jarnagin, A. & Anderson, S. Изменение специфичности кармана связывания кофактора Corynebacterium 2, 5-дикето-D-глюконовой кислоты редуктазы А.Белок. Англ. 15, 131–140 (2002).
CAS PubMed Google ученый
Wong, C.-H. И Уайтсайдс, Г. М. Ферментно-катализируемый органический синтез: регенерация кофактора NAD (P) H с использованием глюкозо-6-фосфата и глюкозо-5-фосфатдегидрогеназы из Leuconostoc mesenteroides . Варенье. Chem. Soc. 103, 4890–4899 (1981).
CAS Google ученый
Чжан, Ю.-ЧАС. П., Мён, С., Ю, К., Чжу, З. и Роллин, Дж. А. К недорогому биопроизводству через in vitro синтетическая биология: восходящий дизайн. J. Mater. Chem. 21. С. 18877–18886 (2011).
CAS Google ученый
Brinkmann-Chen, S. et al. Общий подход к обращению зависимости кофактора кетолокислоты редуктоизомеразы от НАДФН к НАДН. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 110, 10946–10951 (2013).
ADS CAS PubMed Google ученый
Лерхнер, А., Jarasch, A., Meining, W., Schiefner, A. & Skerra, A. Кристаллографический анализ и структурно-ориентированная инженерия НАДФН-зависимого Ralstonia sp. Алкогольдегидрогеназа в отношении специфичности косубстрата НАДН. Biotechnol. Bioeng. 110, 2803–2814 (2013).
CAS PubMed Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Кацберг, М., Скорупа-Парачин, Н., Горва-Грауслунд, М.-Ф. И Бертау, М. Инженерное предпочтение кофакторов биокатализаторов, восстанавливающих кетон: исследование мутагенеза на γ-дикетонредуктазе из дрожжей Saccharomyces cerevisiae , служащих в качестве примера.Int. J. Mol. Sci 11. 2010. С. 1735–1758.
CAS PubMed PubMed Central Google ученый
Meng, H. et al. Разработка d-лактатдегидрогеназы, которая может сверхэффективно использовать НАДФН и НАДН в качестве кофакторов. Sci. Отчет 6 (2016).
Кэмпбелл, Э., Мередит, М., Минтир, С. Д. и Банта, С. Ферментативные биотопливные клетки, использующие биомиметический кофактор. Chem. Commun. 48, 1898–1900 (2012).
CAS Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Туоми, W.В. и Казлаускас, Р. Дж. Молекулярные основы энантиоселективности липазы из Pseudomonas cepacia по отношению к первичным спиртам. Моделирование, кинетика и химическая модификация Tyr29 для увеличения или уменьшения энантиоселективности. J.Org.Chem. 64, 2638–2647 (1999).
CAS PubMed Google ученый
Tetaud, E. et al. 6-Фосфоглюконатдегидрогеназа из Lactococcus lactis : роль остатков аргинина в связывании субстрата и кофермента.Biochem. J. 338, 55–60 (1999).
CAS PubMed PubMed Central Google ученый
Чен, Ю.-Й. и другие. Конформационные изменения, связанные со связыванием кофактора / субстрата 6-фосфоглюконатдегидрогеназы из Escherichia coli и Klebsiella pneumoniae : влияние на механизм фермента.
J. Struct. Биол. 169, 25–35 (2010).
CAS PubMed Google ученый
Li, L.& Cook, P. F. 2′-фосфат НАДФ отвечает за правильную ориентацию никотинамидного кольца в реакции окислительного декарбоксилирования, катализируемой 6-фосфоглюконатдегидрогеназой печени барана. J. Biol. Chem. 281, 36803–36810 (2006).
CAS PubMed Google ученый
Хуанг, Р., Чен, Х., Чжун, К., Ким, Ж.-Э. И Чжан, Ю. П. Высокопроизводительный скрининг изменения предпочтения коферментов термофильной 6-фосфоглюконатдегидрогеназы с НАДФ + на НАД + .Sci. Реп.6, 32644 (2016).
ADS CAS PubMed PubMed Central Google ученый
org/ScholarlyArticle»>Шарки, М. А., Оливейра, Т. Ф., Энгель, П. К. и Хан, А. Р. Структура НАДФ + -зависимой глутаматдегидрогеназы из Escherichia coli — отражения на основе коферментной специфичности в семействе глутаматдегидрогеназ. FEBS J. 280, 4681–4692 (2013).
CAS PubMed Google ученый
Ватанабе, С., Кодаки, Т. и Макино, К. Полное изменение коферментной специфичности ксилитолдегидрогеназы и повышение термостабильности путем введения структурного цинка. J. Biol. Chem. 280, 10340–10349 (2005).
CAS PubMed Google ученый
Бринкманн-Чен, С., Кан, Дж. И Арнольд, Ф. Х. Выявление редких НАДН-предпочтительных кетол-кислотных редуктоизомераз. Метаб. Англ.
26, 17–22 (2014).
CAS PubMed Google ученый
Bastian, S.и другие. Сконструированные кетолокислотредуктоизомераза и алкогольдегидрогеназа обеспечивают анаэробное производство 2-метилпропан-1-ола с теоретическим выходом в Escherichia coli . Метаб. Англ. 13. С. 345–352 (2011).
CAS PubMed Google ученый
Ван, Ю., Хуанг, В., Сатицуксано, Н., Чжу, З. и Чжан, Ю.-Х. P. Биогидрирование из сахара биомассы опосредовано in vitro, синтетическими ферментативными путями. Chem.Биол. 18. С. 372–380 (2011).
PubMed Google ученый
Фоглер, Х.
С. Элементы инженерии химических реакций (1999).
Kontani, A. et al. Биоанод, использующий термостабильную алкогольдегидрогеназу для этанольного биотопливного элемента, работающего при высоких температурах. Электроанализ. 26. С. 682–686 (2014).
CAS Google ученый
Ю, К., Чжан, X.-Z. И Чжан, Ю.-Х. P. Простое клонирование посредством прямой трансформации продукта ПЦР (ДНК-мультимер) в Escherichia coli и Bacillus subtilis . Appl. Environ. Microbiol. 78, 1593–1595 (2012).
CAS PubMed PubMed Central Google ученый
Consortium, U. Реорганизация белкового пространства в Universal Protein Resource (UniProt). Nucleic Acids Res. 40, 1–5 (2012).
Google ученый
Гужон, М.и другие. Новая структура инструментов биоинформатического анализа в EMBL – EBI. Nucleic Acids Res. 38, W695 – W699 (2010).
ADS CAS PubMed PubMed Central Google ученый
Sievers, F. et al. Быстрое и масштабируемое создание высококачественного выравнивания множественных последовательностей белков с помощью Clustal Omega. Мол. Syst. Биол. 7, 539 (2011).
PubMed PubMed Central Google ученый
Шнайдер Т.Д. и Стивенс, Р. М. Логотипы последовательностей: новый способ отображения согласованных последовательностей.
Nucleic Acids Res. 18, 6097–6100 (1990).
CAS PubMed PubMed Central Google ученый
Crooks, G.E., Hon, G., Chandonia, J.-M. & Бреннер, С. Э. WebLogo: генератор последовательного логотипа. Genome Res. 14, 1188–1190 (2004).
CAS PubMed PubMed Central Google ученый
Ласковски, Р.A., MacArthur, M. W., Moss, D. S. & Thornton, J. M. PROCHECK: программа для проверки стереохимического качества белковых структур. J. Appl. Кристаллография. 26. С. 283–291 (1993).
CAS Google ученый
Роль коферментов | Sciencing
Коферменты играют роль в функциях клеток. Реакции внутри клеток работают либо на расщепление питательных веществ, либо на объединение молекул для клеточной активности, которая поддерживает жизнь клеток.
Ферменты ускоряют эти реакции. Без ферментов эти реакции могут не возникнуть. Коферменты, в свою очередь, поддерживают функции ферментов. Они слабо связываются с ферментами, чтобы помочь им завершить свою деятельность. Коферменты — это небелковые органические молекулы, которые облегчают катализ или реакцию его фермента.
Коферменты являются кофакторами
Коферменты — это один из двух типов кофакторов, используемых ферментами в этих ферментативных реакциях. Другие типы кофакторов — это неорганические ионы.Ионы магния, кальция и калия обычно используются с ферментами для ускорения этих реакций.
Функция коферментов
Коэнзимы работают путем связывания с активной стороной ферментов, стороной, которая участвует в реакции. Поскольку ферменты и коферменты представляют собой неметаллические органические молекулы, они связываются вместе, образуя ковалентные связи. Коферменты делятся электронами с ферментами, а не теряют или приобретают электроны.
Когда они образуют эту связь, они только способствуют протеканию реакции, неся и передавая электроны через реакцию.Коферменты не становятся неотъемлемой частью ферментативной реакции. Вместо этого ковалентные связи разрываются в конце реакции, и кофермент возвращается в свободную циркуляцию внутри клетки, пока не будет использован снова.
Витамины и коферменты
Прием витаминов, будь то из пищевых продуктов или в виде добавок, увеличивает количество коферментов в организме. Некоторые витамины помогают организму вырабатывать коферменты, такие как фолиевая кислота и некоторые витамины группы B, тогда как другие витамины действуют непосредственно как коферменты, такие как витамин C.Без витаминов организм не смог бы вырабатывать коферменты.
Цикл NAD
NAD — никотинамидадениндинуклеотид — представляет собой кофермент, который образуется из витамина B3. Он работает в нескольких метаболических процессах, которые проходят через окисление — удаление иона водорода — и восстановление или получение иона водорода.
Он работает как переносчик атомов водорода и передает их конечным молекулам в ферментативной реакции. Коэнзим НАД может повторно использоваться клеткой снова и снова.
Другие коферменты
Другие коферменты включают АТФ или аденозинтрифосфат, источник потока энергии в клетках, как упомянул профессор Университета Торонто Лоуренс А. Моран. FAD, или флавинадениндинуклеотид, также участвует в реакциях окисления и восстановления, в то время как PLP — пиридоксальфосфат — играет множество ролей, в том числе в аминокислотных реакциях.
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.
Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.
Чтобы предоставить доступ без файлов cookie
потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файлах cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Применение синтетазы пропионил-кофермента А для накопления поли (3-гидроксипропионат-со-3-гидроксибутирата) в рекомбинантной Escherichia coli
РЕФЕРАТ
Генетический оперон деградации пропионовой кислоты в Salmonella enterica serovar Typh обозначенный как prpE , который кодирует пропионил-кофермент A (пропионил-CoA) синтетазу (A.
R. Horswill и J. C. Escalante-Semerena, Microbiology 145: 1381–1388, 1999). В этой статье мы сообщаем о клонировании prpE с помощью ПЦР, его сверхэкспрессии в Escherichia coli и субстратной специфичности фермента. Когда пропионат использовался в качестве субстрата для PrpE, при концентрации насыщающего субстрата были обнаружены K m 50 мкМ и удельная активность 120 мкмоль · мин -1 · мг -1 . PrpE также активировал ацетат, 3-гидроксипропионат (3HP) и бутират до их соответствующих эфиров кофермента А, но действовал гораздо менее эффективно, чем пропионат.Когда prpE коэкспрессировалось с генами биосинтеза полигидроксиалканоата (PHA) из Ralstonia eutropha в рекомбинантной E. coli , сополимер PHA, содержащий звенья 3HP, накапливался, когда 3HP подавали с питательной средой. Чтобы сравнить полезность ацил-КоА-синтетаз с ацил-КоА-трансферазой для продукции PHA, были сконструированы рекомбинантные штаммы, продуцирующие PHA, для совместной экспрессии генов биосинтеза PHA с prpE , с acoE (ген ацетил-CoA-синтетазы от р.
eutropha [H. Priefert и A. Steinbüchel, J. Bacteriol. 174: 6590–6599, 1992]), или orfZ (ген трансферазы ацетил-КоА: 4-гидроксибутират-КоА из Clostridium propionicum [HE Valentin, S. Reiser и KJ Gruys, Biotechnol. Bioeng. 67 : 291–299, 2000]). Из трех ферментов PrpE и OrfZ обеспечивали сходные уровни включения 3HP в PHA, тогда как AcoE был значительно менее эффективным в этом отношении.
Полигидроксиалканоаты (ПГА) представляют собой разнообразную группу бактериальных запасных полиэфиров, которые накапливаются, когда углерод и источники энергии доступны в избытке, а рост клеток ограничивается из-за отсутствия необходимого питательного вещества (1, 25).Некоторые из этих сложных полиэфиров обладают характеристиками материала, сопоставимыми с характеристиками полимеров нефтехимического происхождения. Например, по физическим свойствам поли (3-гидроксибутират- со -3-гидроксивалерат) напоминают свойства полиэтилена и полипропилена (8). В отличие от полимеров на нефтехимической основе, PHA полностью биоразлагаемы до CO 2 и воды и могут производиться из возобновляемых источников.
К сожалению, производство PHA путем бактериальной ферментации является дорогостоящим и из-за неэффективного использования ресурсов не обязательно экологически безвредно (6).Однако, если можно будет внедрить систему производства PHA на основе растений, прогнозируются значительно более низкие производственные затраты (12, 17).
Поли (3-гидроксибутират- co -3-гидроксивалерат) был коммерчески произведен путем ферментации с использованием мутанта Ralstonia eutropha , утилизирующего глюкозу, который требует подпитки пропионовой кислотой для образования 3-гидроксивалерата. Этот полимер продавался под торговым наименованием Biopol. В отличие от бактериальной производственной системы, производство сополиэфиров РНА в растениях требует, чтобы все метаболиты были получены из доступных промежуточных продуктов метаболизма растений.В то время как производство простого, но хрупкого гомополимера поли (3-гидроксибутирата) (ПОБ) хорошо изучено в рекомбинантных бактериальных и растительных системах (18, 21, 24), только недавние исследования продемонстрировали инженерное производство более сложных PHA (7 , 13, 16, 22, 23, 28).
О производстве поли (3-гидроксипропионат- co -3-гидроксибутирата) (PHPB) в рекомбинантной системе, такой как Escherichia coli , не сообщалось. Этот конкретный сополимер с включенными мономерами 3-гидроксипропионата (3HP) в основную цепь полимера имеет пониженную кристалличность по сравнению с PHB (J.Асрар, личное сообщение).
Путь биосинтеза ПОБ в R. eutropha поддается системе продуцирования растений, поскольку исходным биосинтетическим метаболитом является ацетилкофермент А (ацетил-КоА). Ферменты этого пути состоят из 3-кетотиолазы (PhaA), ацетоацетил-CoA редуктазы (PhaB) и PHB-синтазы (PhaC) (21, 24). 3-кетотиолаза катализирует конденсацию Клайзена двух молекул ацетил-КоА с образованием ацетоацетил-КоА, который затем восстанавливается в НАДФН-зависимой реакции с образованием D — (-) — 3-гидроксибутирил-КоА (3HB-CoA).3HB-CoA служит субстратом для синтазы PHB, которая катализирует реакцию полимеризации 3HB-CoA с образованием PHB.
В микробных системах, продуцирующих PHA, только небольшая часть разнообразной группы PHA получается из структурно неродственных источников углерода (25), и эти пути лишь частично охарактеризованы.
Успешная разработка растений для производства PHA потребует большего понимания как ферментов, участвующих в этих микробных путях, так и сложностей клеточной компартментализации биохимических процессов в растениях.Информация о ферментах, потенциально полезных для продукции PHA в разработанных путях, но не обязательно естественным образом участвующих в биосинтезе PHA, также будет иметь значение. Одним из таких ферментов является PrpE, пропионил-КоА-синтетаза, участвующая в деградации пропионата в сероваре Typhimurium Salmonella enterica (9).
Все известные PHA-синтазы требуют гидроксиацил-CoAs в качестве субстратов. Следовательно, органические кислоты-предшественники должны быть активированы до CoA-тиоэфиров перед тем, как вступить в путь биосинтеза PHA (5, 27).Хотя CoA-активированные короткоцепочечные жирные кислоты необходимы для широкого ряда других метаболических путей, подробно охарактеризованы только ацетил-CoA-синтетазы или ацил-CoA-синтетазы со специфичностью длины цепи, превышающей 10 атомов углерода.
Ацил-КоА-синтетазы с предпочтением жирных кислот с длиной цепи в диапазоне от C 3 до C 10 еще не охарактеризованы. В этом сообщении приводится характеристика одного такого фермента этого класса, PrpE.
Известно, что в дополнение к ацил-КоА-синтетазам ацил-КоА трансферазы, обнаруженные в анаэробных бактериях, катализируют образование коА-тиоэфиров с короткой и средней длиной цепи (14). Однако считается, что эти ферменты менее подходят для метаболической инженерии, поскольку они зависят от наличия донорного субстрата CoA-тиоэфира в дополнение к свободной органической кислоте для получения достаточного количества желаемого органического ацил-CoA. Эти ферменты не используют свободную энергию гидролиза нуклеозидтрифосфата для управления образованием CoA-тиоэфира, как ацил-CoA синтетазы.
Сравнение ацил-КоА-синтетазы с ацил-КоА-трансферазой в интегрированном пути продукции PHA еще не проводилось. По этим причинам и для того, чтобы узнать больше о значении специфичности субстрата, мы сравнили образование PHPB в аналогичных условиях с использованием prpE, acoE (кодирует ацетил-CoA синтетазу из R. eutropha [20]) или orfZ . (кодирующая трансферазу ацетил-КоА: 4-гидроксибутират-КоА из Clostridium kluyveri [26]), коэкспрессируемая с опероном биосинтеза ФГА из R.eutropha ( phaCAB ) в E. coli . Было обнаружено, что все эти ферменты (AcoE, OrfZ и PrpE) активируют 3HP в 3HP-CoA в условиях in vitro (ссылка 20 и это исследование).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Бактериальные штаммы и плазмиды. Все штаммы и плазмиды, использованные в этом исследовании, перечислены в таблице 1. Карты экспрессионных плазмид показаны на рисунке 1. Для рутинного клонирования плазмиды вводили в E. coli DH5α. Для экспериментов по накоплению ФГА плазмиды переносили в E.coli XL1-синий.
Таблица 1.Бактериальные штаммы и плазмиды
Рис. 1.Плазмиды, использованные в экспериментах по накоплению ФГА в данном исследовании. Вектор убегающей репликации pJM9238 несет биосинтетический оперон R. eutropha PHA ( phaCAB ) под контролем промотора tac (11). Накопление PHA вызывается тепловым шоком или ростом бактерий при температуре выше 34 ° C. Плазмида pSES38 содержит фрагмент геномной ДНК размером 3,8 т.п.н. из R. eutropha , кодирующий ацетил-КоА-синтетазу, необходимую для деградации ацетоина.Ген коллинеарен промотору lac родительского вектора pBluescript. Однако считается, что экспрессия гена управляется внутренним зависимым от 70 промотором. Ацетил-КоА: 4-гидроксибутират-КоА трансфераза (OrfZ) экспрессируется из pBluescript KS — :: orfZ , которая несет ген orfZ на фрагменте ClaI / Eco RI геномной ДНК размером 1,8 т.п.н. из C. kluyveri , коллинеарно промотору lacZ . Многокопийный вектор pMON34576 несет сконструированный ген prpE под контролем промотора lac .
Среда. Для исследования периодических культур бактерии выращивали в среде Лурия-Бертани (LB) (15), которая содержала соответствующие антибиотики (Sigma, Сент-Луис, Миссури) в следующих концентрациях: ампициллин, 100 мкг · мл −1 ; хлорамфеникол, 25 мкг · мл -1 . Если это указано, добавляли изопропил-β-d-тиогалактопиранозид (IPTG) (Sigma) до конечной концентрации 1 мМ. Если не указано иное, все культуры инкубировали при 37 ° C и встряхивали при 225 об / мин в орбитальном шейкере.Рост клеток контролировали путем измерения оптической плотности при длине волны 600 нм (OD 600 ).
ПЦР. Для амплификации prpE аликвоту тотальной геномной ДНК из S. enterica серовара Typhimurium инкубировали в течение 41 цикла с праймерами, специфичными для prpE (верхний праймер, 5′-GGGGGGGAATTCAGATCTCCATGGTAGTAGTCAGTGTGTGTGTGTCCAGCAG ′ -GGGGGGGAATTCTAATAACCCGTTGCCGAACGCGGCCTTATCCGGC) (Gibco-BRL, Rockville, MD) в термоциклере (DNA Thermal Cycler, Perkin-Elmer, Norwalk, Conn.) с использованием основного набора для ПЦР Boehringer (Мангейм, Германия). Чтобы расслабить GC-богатую ДНК, к каждой реакционной смеси добавляли 10% (об. / Об.) Диметилсульфоксида. Первый цикл ПЦР-амплификации проводили в следующих условиях: 2 мин инкубации при 95 ° C для денатурации, 1 мин при 50 ° C для отжига и 2 мин при 72 ° C для удлинения. Все остальные циклы амплификации были выполнены с 1 мин инкубации при 94 ° C для денатурации, 1 мин для отжига при 50 ° C и 2 мин для удлинения при 72 ° C.
Конструкция плазмид.Для клонирования prpE продукты ПЦР очищали с использованием набора для очистки ПЦР Qiagen (Валенсия, Калифорния), расщепляли Eco RI и лигировали с pSP72, расщепленным Eco RI, что приводило к образованию pMON34555. Для высокого уровня экспрессии prpE субклонировали под контролем промотора trc в pSE380 (Invitrogen, Carlsbad, CA), что привело к образованию pMON34564. Клонирование pMON34564 проводили следующим образом. pMON34555 расщепляли с помощью Nco I и Eco RI.Фрагмент длиной 1933 п.н., кодирующий ген prpE , отделяли от компонента вектора в 1,0% агарозном геле в трис-ацетатном буфере (15). Выделенный фрагмент очищали с использованием набора для экстракции геля Qiagen и лигировали с расщепленным и очищенным pSE380 Nco I и Eco RI. Для экспериментов по накоплению PHA prpE субклонировали под контролем промотора lac в pMON34610, что привело к образованию pMON34576. Для клонирования pMON34576 плазмиду pMON34564 расщепляли с помощью Nco I и Eco RI.Фрагмент длиной 1933 п.н. выделяли и очищали, как описано выше, и выделенный фрагмент лигировали в pMON34610, расщепленную Nco I и Eco RI.
Плазмида pBluescriptvector KS — :: orfZ была получена путем расщепления pCK3 (28) с помощью Cla I и Eco RI. Рестрикционные фрагменты разделяли в 0,8% агарозном геле. Фрагмент размером 1,8 т.п.н., несущий orfZ , очищали и лигировали в pBluescriptvector KS —, расщепленный Cla I и Eco RI (Stratagene, La Jolla, Calif.).
Анализ ацил-КоА-синтетазы. Общая смесь для анализа ацил-КоА-синтетазы содержала 5 мМ АТФ, 10 мМ натриевой соли органической кислоты, 1,25 мМ CoASH, 5 мМ дитиотреитол (DTT) и 5 мМ хлорид магния в 100 мМ калий-фосфатном буфере (pH 7,5). Чтобы начать реакцию, 20 мкл образца фермента добавляли к конечному объему 200 мкл смеси для анализа. После 15 мин инкубации при комнатной температуре реакцию гасили добавлением 20 мкл 10% (об. / Об.) Муравьиной кислоты. Продукты реакции ацил-КоА разделяли жидкостной хроматографией высокого давления на обращенно-фазовой колонке (Beckman C 8 ; 5 мкм, 4.6 мм на 15 см) с использованием градиента ацетонитрила от 5 до 45% в 50 мМ буфере ацетата аммония (pH 6,0). Линейный градиент был получен путем изменения соотношения буферов A (50 мМ буфер ацетата аммония [pH 6,0] плюс 5% ацетонитрил) и B (ацетонитрил) от 100% буфера A в начале каждого цикла до 60% буфера A и 40%. % буфера B в течение 15 мин. Пик элюции контролировали по поглощению при 260 нм. Количественное определение продуктов ацил-КоА проводили с использованием построенной стандартной кривой со стандартами ацил-КоА.Анализы для определения кинетических констант проводились путем изменения концентрации субстрата органической кислоты в серии реакций. Все анализы были прекращены в стационарной части реакции, когда было менее 20% использования ограничивающего субстрата.
Очистка PrpE. 3-мл прекультуру клеток E. coli DH5α, несущих pMON34564, выращивали в течение ночи при 37 ° C. Затем в культуру LB объемом 250 мл инокулировали 1 мл прекультуры и инкубировали при 37 ° C.Когда был получен OD 600 , равный 0,6, добавляли IPTG в конечной концентрации 1 мМ для индукции экспрессии PrpE. Через 2 часа после индукции клетки собирали центрифугированием и один раз промывали фосфатно-солевым буфером (1 мМ KH 2 PO 4 , 10 мМ Na 2 HPO 4 , 137 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl [ pH 7,4]. Затем клетки ресуспендировали в 20 мМ калий-фосфатном буфере (pH 7,4), содержащем 20% (об. / об.) глицерина и 2 мМ DTT. Суспензии клеток разрушали обработкой ультразвуком (Sonifier 450; Branson, Danbury, Conn.) в течение 2 минут (30-секундная обработка ультразвуком с последующим 30-секундным отдыхом) при настройке 0,3 для управления выходом и 30% для рабочего цикла с использованием 3-мм зонда. Лизат клеток очищали 10-минутным центрифугированием при 31000 × g с использованием ротора Beckman SA-17. Белки осаждали 80% насыщенным сульфатом аммония и осаждали центрифугированием, и полученный осадок растворяли в буфере B (100 мМ натрий-фосфатный буфер) [pH 7,0], содержащем 1 мМ DTT и 1 М сульфат аммония). Раствор пропускали через 0.Мембранный фильтр с размером пор 2 мкм (Aerodisc; Gelman Sciences, Анн-Арбор, штат Мичиган), а затем его загружали на колонку с фенил-сефарозой (1 на 10 см) (с использованием системы Biologic от Bio-Rad). Белки разделяли на колонке с фенил-сефарозой с использованием двухступенчатого градиента при скорости потока 2 мл · мин -1 с буфером A (100 мМ натрий-фосфатный буфер [pH 7,0], содержащий 1 мМ DTT) и буфером B; градиент запускали со 100-50% буфером B за 15 минут, а затем с 50-0% буфером B за 30 минут. Каждую минуту собирали одну фракцию.Большая часть PrpE была элюирована во фракциях с 37 по 59. Эти фракции были объединены, обессолены и сконцентрированы с помощью ультрафильтрационной системы Ultrafree-15 (отсечение молекулярной массы 30 000; Millipore) до конечного объема 2 мл. Затем белки разделяли на колонке Mono-Q HR5 / 5 (Pharmacia, Piscataway, N.J.) с использованием буфера C (10 мМ Tris [pH 7,8], 1 мМ DTT) и буфера D (буфер C плюс 1 M KCl). Разделение выполняли с использованием ступенчатого градиента с 0 до 20% буфера D за 5 минут, от 20 до 35% буфера D за 25 минут, а затем от 35 до 100% буфера D за 10 минут.Скорость потока составляла 1 мл · мин -1 , и одна фракция собиралась в минуту. Основной пик PrpE был элюирован во фракциях с 14 по 19. Ацил-КоА-синтетаза во фракциях с 15 по 17 имела чистоту> 95% на основе электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (предварительно отлитые гели марки Daiichi; Owl Scientific Co., Woburn , Массачусетс) с окрашиванием Pro-Blue (Emprotech).
Эксперименты по накоплению ФГА. Эксперименты по накоплению ФГА проводили в системе с двумя плазмидами. Плазмида pJM9238, вектор неуправляемой репликации для индукции пути биосинтеза PHA (11), индуцируется для амплификации под действием теплового шока или температурного сдвига до 37 ° C.Используя метод Chung et al. (4) вторую плазмиду, индуцируемую IPTG (pMON34576, pSES38 или pBluescript KS — :: orfZ ), трансформировали в E. coli XL1-Blue, которая ранее содержала pJM9238. Эти рекомбинантные штаммы E. coli выращивали в среде LB, содержащей 1% 3HP, при 30 ° C до достижения OD 600 0,6. Впоследствии температуру культивирования повышали до 37 ° C, чтобы вызвать накопление PHA, и добавляли IPTG до конечной концентрации 1 мМ, чтобы индуцировать вторую плазмиду.После 48-часового инкубационного периода клетки собирали для анализа содержания и состава PHA.
PHA анализ. Для анализа содержания полиэфира и состава клеток E. coli собирали центрифугированием, промывали один раз фосфатно-солевым буфером (Boehringer) и лиофилизировали в течение ночи. Осушенный осадок клеток экстрагировали горячим хлороформом в пробирках с завинчивающейся крышкой при 100 ° C в течение 2 часов. Хлороформный экстракт фильтровали через стекловату, и PHA осаждали в этаноле.Содержание полиэфира было получено путем сравнения массы осажденного ПГА с сухой массой осадка бактериальных клеток, используемого в процессе экстракции полимера.
ЯМР-спектроскопический анализ. Состав ПГА анализировали с помощью исследований ядерного магнитного резонанса (ЯМР) с использованием спектрометра Varian 300 МГц. Спектры протонов получали при 22 ° C для образцов ФГА примерно 20 мг, растворенных в 1 мл дейтерохлороформа. Состав полимера рассчитывали на основании площадей пиков всех протонов полимерных звеньев.Импульсы были сняты под углом 45 ° с временем сбора данных 2,46 с, собрано 16 000 точек данных и 1024 накопления. Химические сдвиги измеряли относительно CHCl 3 (δ = 7,24 м.д.). Спектры 13 C { 1 H} (75 МГц) были сняты при 22 ° C в растворе приблизительно 50 мг PHA в 1 мл дейтерохлороформа. Спектры были получены с использованием развязки по Вальсу, импульсов 30 °, задержки релаксации 1 с, ширины спектра 12 кГц, 32 000 точек данных и 20 000 накоплений.Химические сдвиги измеряли относительно CHCl 3 (δ = 77,0 м.д.). (См. Рис. 2 для примера протонного спектра PHPB, экстрагированного из рекомбинантного E. coli. )
РЕЗУЛЬТАТЫ
Клонирование prpE . Общая геномная ДНК была выделена из S. enterica серовара Typhimurium LT2 с помощью метод Ausubel et al. (2) и использовали в качестве матрицы для ПЦР-амплификации гена prpE . Праймеры были сконструированы для введения сайтов рестрикции Eco RI на 5′- и 3′-концах гена.5′-область гена была дополнительно модифицирована для введения сайта рестрикции Nco I в стартовый кодон трансляции. Чтобы избежать возможных токсических эффектов генов, продукты ПЦР очищали, расщепляли с помощью Eco RI и клонировали в pSP72. Этот вектор клонирования содержит только вирусные промоторы, которые не распознаются в E.coli DH5α. Высокий уровень экспрессии гена prpE был достигнут путем клонирования гена в pSE380 под контролем промотора trc .Полученная плазмида представляет собой pMON34564. Для экспериментов по накоплению PHA ген prpE клонировали под контролем экспрессии более умеренного промотора lac . Это вектор pMON34576.
Ферментативная характеристика PrpE. Как показано в Таблице 2, объединенные фракции Mono-Q очищенного PrpE дали 1,4% исходного белка, осажденного сульфатом аммония, и привели к 30-кратному увеличению специфической активности пропионил-CoA синтетазы. На основании анализа электрофореза в геле с додецилсульфатом натрия и полиакриламидным гелем, белок на этой конечной стадии очистки имел чистоту> 95%.Удельная активность PrpE в условиях насыщающего субстрата составляет 120 Ед / мг белка. Было обнаружено, что в дополнение к пропионату PrpE активирует ацетат и 3HP, и он показал нормальную кинетику Михаэлиса-Ментен со всеми тремя субстратами. Однако значения K m демонстрируют сильное предпочтение связывания пропионата ( K m 0,050 ± 0,003 мМ) по сравнению с ацетатом (0,9 ± 0,1 мМ) или 3HP (27 ± 1 мМ). Значения V max для ацетата и 3HP в два и три раза меньше, чем для пропионата, соответственно, на основе кинетических измерений, которые напрямую сравнивали три субстрата с частично очищенным ферментом.Бутират также был субстратом для PrpE, но продуцировал только низкие уровни соответствующего CoA-тиоэфира. Детальный кинетический анализ с использованием этого субстрата не проводился из-за очень низкой скорости реакции. При использовании 4-гидроксибутирата или dl-3-гидроксибутирата в качестве субстрата с PrpE не было обнаруженных продуктов. На основании этих результатов сделан вывод, что PrpE является пропионил-CoA синтетазой и лишь плохо использует другие короткоцепочечные органические кислоты в качестве субстратов.
Таблица 2.Очистка PrpE
Применение PrpE, AcoE и OrfZ для образования PHA.На рисунке 2 показан типичный спектр для PHPB, где в этом случае фракция 3HP является основным компонентом сополимера. Как видно, характерные резонансы для компонентов 3HP и 3HB позволяют провести четкое количественное определение. Как показано в таблицах 3 и 4, сополиэфиры, содержащие звенья 3HP, были получены только тогда, когда ацил-CoA-синтетаза или CoA-трансфераза экспрессировались в связи с биосинтетическим опероном PHA. Когда рекомбинантные клетки E. coli , экспрессирующие prpE или orfZ , выращивали в среде LB плюс 1% 3HP, накапливались полиэфиры, содержащие приблизительно 90 мол.% 3HP.Экспрессия AcoE в таких условиях роста привела к значительно более низким уровням 3HP в полиэфире (Таблица 3).
Рис. 2.1 H ЯМР-спектроскопический анализ PHPB, экстрагированного из E. coli XL1-Blue (pJM9238, pMON34576), выращенных на 1% 3HP в среде LB. Скобки и числа под абциссой указывают зоны сигнала. Исходя из этих чисел, этот полиэфир содержит 15 мол.% 3HB и 85 мол.% 3HP. ТМС, тетраметилсилан.
Таблица 3.Образование ПГА, содержащего 3HP a
Таблица 4.Образование PHPB в присутствии маннита a
Во втором эксперименте клетки культивировали в присутствии 1% (мас. / Об.) 3HP плюс 1% (мас. / Об.) Маннита. Все остальные параметры оставались неизменными. В этих условиях использование PrpE или OrfZ для активации 3HP привело к накоплению сложных полиэфиров с аналогичным составом. По сравнению с экспериментами без манита в качестве дополнительного источника углерода общее количество 3HP в этих полиэфирах снизилось до 20-25 мол.%.Штаммы, экспрессирующие AcoE, не накапливали каких-либо определяемых количеств 3HP в этих условиях, хотя предыдущие результаты показали, что AcoE может использовать 3HP в качестве субстрата (20), и уровни экспрессии AcoE оказались сравнимыми с уровнями PrpE на основе ацетил-CoA синтетазы. Мероприятия. Суммарное количество полиэфиров, накопленных этими штаммами, существенно не менялось (таблица 4).
ОБСУЖДЕНИЕ
Кинетические данные, представленные в этом исследовании, подтверждают, что prpE кодирует пропионил-КоА синтетазу, как предполагалось ранее (9, 10).Наши результаты показывают, что PrpE может также активировать ацетат, 3HP и бутират до соответствующих им CoA-тиоэфиров в дополнение к пропионовой кислоте, хотя и менее эффективно. Активация бутирата PrpE противоречит предыдущим результатам, которые были получены с неочищенными экстрактами E. coli , экспрессирующими рекомбинантный prpE (9). Однако в наших руках активация бутирата до CoA-тиоэфира PrpE была очень неэффективной.
Комбинация экспрессии prpE с экспрессией R.eutropha Путь биосинтеза ФГА в E. coli XL1-Blue продемонстрировал, что PrpE можно использовать для биосинтеза специфических РНА, которые невозможно получить без присутствия активирующего КоА фермента. Мы также продемонстрировали, что формирование PHPB в E. coli может быть получено путем экспрессии phaCAB из R. eutropha либо с ацетил-КоА синтетазой из R. eutropha ( acoE ), либо с пропионил-КоА. синтетазы из S.enterica серовар Typhimurium ( prpE ) или трансфераза ацетил-КоА: 4-гидроксибутират-КоА из C. kluyveri ( orfZ ). Неожиданно аналогичные количества 3HP были накоплены с использованием PrpE или OrfZ.
Синтетаза КоА должна способствовать образованию тиоэфиров КоА и давать высокие концентрации соответствующих сложных тиоэфиров КоА за счет использования свободной энергии АТФ. Это должно способствовать включению 3HP в PHA. Напротив, трансфераза ацетил-КоА: 4-гидроксибутират-КоА зависит от пулов доступных ацетил-КоА и свободных кислот и в нашем случае создает равновесие между ацетил-КоА, ацетатом, 3HP и 3HP-CoA.Ацетил-КоА присутствует в большом количестве в клетках E. coli при определенных условиях роста, достигая миллимолярных уровней (3), и в наших экспериментах мы добавляли 1% 3HP (приблизительно 0,1 М) в среду для выращивания. Эти условия, по-видимому, позволили получить достаточное количество 3HP-CoA в присутствии трансферазы ацил-CoA для высокого уровня включения в сополимер.
Улучшение пути для рекомбинантных систем должно было бы полагаться на образование эндогенного 3HP. Хотя такая система, безусловно, более привлекательна, она приведет к значительно более низкому предложению 3 л.с.Более того, если бы такой путь был использован в системе производства растений, уровни доступного ацетил-КоА, вероятно, были бы ниже 50 мкМ (19, 29). В таких условиях ацил-КоА-синтетаза может быть более предпочтительной, чем ацил-КоА-трансфераза для эффективной активации 3HP в соответствующий 3HP-CoA.
Другими причинами аналогичных полиэфирных композиций с использованием PrpE или OrfZ для активации 3HP также могут быть разные уровни экспрессии двух ферментов или различия в субстратной специфичности, а не пулы конкретных метаболитов в бактериальных клетках.Мы попытались сохранить уровни экспрессии в наших экспериментах постоянными, клонируя все три гена в плазмидах с большим числом копий за промотором lac , хотя предыдущие исследования показали, что acoE , а также orfZ могут быть экспрессированы с их собственные промоторы в E. coli (20, 28). К сожалению, OrfZ оказался очень нестабильным в неочищенных экстрактах E. coli . Вестерн-блот-анализ показал протеолитическое расщепление (данные не показаны), и, основываясь на анализах активности, OrfZ имеет период полужизни примерно 20 мин при комнатной температуре в присутствии ингибиторов протеаз бензамидина (1 мМ), лейпептина (10 мг · мл -1 ) и 4- (2-аминоэтил) бензолсульфонилфторид (10 мг · мл -1 ).По этой причине активности ферментов in vitro было трудно воспроизвести, и они не обязательно отражают активности этого фермента in vivo.
Это исследование также показывает, что AcoE, хотя было продемонстрировано, что он активирует 3HP в 3HP-CoA в условиях in vitro со скоростью, аналогичной таковой для ацетата (20), не так эффективен для этой задачи in vivo, как PrpE или OrfZ. Это особенно удивительно, поскольку ферментативные активности AcoE и PrpE были сопоставимы на основе активности ацетил-CoA синтетазы.В предыдущих исследованиях (20) было показано, что AcoE активирует 3HP со скоростью, аналогичной таковой для уксусной кислоты. Однако это исследование показывает, что AcoE не так эффективен для этой задачи, как PrpE или OrfZ in vivo.
БЛАГОДАРНОСТИ
Мы благодарим A. Steinbüchel за предоставленную плазмиду pSES38 и Steven C. Slater и Katey L. Houmiel за рецензирование рукописи.
СНОСКИ
- Получено 21 июня 2000 г.
- Принято 24 сентября 2000 г.
- Авторское право © 2000 Американское общество микробиологии
Коэнзим: определение, функция и примеры
КоэнзимОпределение коэнзима 9 is 9 органическое небелковое соединение, которое связывается с ферментом, чтобы катализировать реакцию.Коферменты часто называют кофакторами, но они различаются по химическому составу. Коэнзим не может действовать в одиночку, но его можно использовать несколько раз в паре с ферментом.
Функции коферментов
Фермент без кофермента называется апоферментом . Без коферментов или кофакторов ферменты не могут эффективно катализировать реакции. На самом деле фермент может вообще не работать. Если реакции не могут происходить с нормальной каталитической скоростью, тогда организму будет трудно поддерживать жизнь.
Когда фермент получает кофермент, он становится холоферментом или активным ферментом. Активные ферменты превращают субстраты в продукты, необходимые организму для выполнения важных функций, будь то химические или физиологические. Коферменты, как и ферменты, можно повторно использовать и перерабатывать без изменения скорости реакции или эффективности. Они прикрепляются к части активного центра фермента, что позволяет катализированной реакции происходить. Когда фермент денатурируется под воздействием экстремальной температуры или pH, кофермент больше не может прикрепляться к активному центру.
Типы ферментов
Кофакторы — это молекулы, которые присоединяются к ферменту во время химических реакций. В общем, все соединения, которые помогают ферментам, называются кофакторами. Однако кофакторы можно разделить на три подгруппы в зависимости от химического состава и функции:
Коферменты
Это небелковые молекулы многократного использования, которые содержат углерод (органический). Они слабо связываются с ферментом в активном центре, помогая катализировать реакции. Большинство из них — витамины, производные витаминов или нуклеотиды.
Кофакторы
В отличие от коферментов истинные кофакторы представляют собой небелковые молекулы многократного использования, которые не содержат углерод (неорганический). Обычно кофакторами являются ионы металлов, таких как железо, цинк, кобальт и медь, которые слабо связываются с активным центром фермента. Их также необходимо добавлять в рацион, поскольку большинство организмов не синтезируют ионы металлов естественным путем.
Протезные группы
Это могут быть органические витамины, сахара, липиды или неорганические ионы металлов. Однако, в отличие от коферментов или кофакторов, эти группы очень прочно или ковалентно связываются с ферментом, способствуя катализированию реакций.Эти группы часто используются в клеточном дыхании и фотосинтезе.
Примеры коферментов
Большинство организмов не могут производить коферменты естественным образом в достаточно больших количествах, чтобы быть эффективными. Вместо этого они вводятся в организм двумя путями:
Витамины
Многие коферменты, хотя и не все, являются витаминами или производными витаминов. Если потребление витаминов слишком мало, то в организме не будет коферментов, необходимых для катализа реакций. Водорастворимые витамины, в состав которых входят все витамины комплекса B и витамин C, приводят к образованию коферментов.Двумя наиболее важными и широко распространенными коферментами, полученными из витаминов, являются никотинамидадениндинуклеотид (НАД) и кофермент А.
НАД является производным витамина В3 и функционирует как один из наиболее важных коферментов в клетке, когда он превращается в две его альтернативные формы. Когда НАД теряет электрон, образуется низкоэнергетический кофермент, называемый НАД + . Когда НАД получает электрон, образуется высокоэнергетический кофермент, называемый НАДН.
NAD + в первую очередь переносит электроны, необходимые для окислительно-восстановительных реакций, особенно тех, которые участвуют в частях цикла лимонной кислоты (TAC).TAC приводит к другим коферментам, таким как АТФ. Если в организме дефицит NAD + , митохондрии становятся менее функциональными и обеспечивают меньше энергии для функций клеток.
Когда NAD + получает электроны в результате окислительно-восстановительной реакции, образуется NADH. НАДН, часто называемый коферментом 1, выполняет множество функций. Фактически, он считается коферментом номер один в организме человека, потому что он необходим для очень многих разных вещей. Этот кофермент в первую очередь переносит электроны для реакций и вырабатывает энергию из пищи.Например, цепочка переноса электронов может начаться только с доставки электронов из НАДН. Недостаток НАДН вызывает дефицит энергии в клетках, что приводит к повсеместной усталости. Кроме того, этот кофермент признан самым мощным биологическим антиоксидантом для защиты клеток от вредных или повреждающих веществ.
Коэнзим A, также известный как ацетил-КоА, естественным образом является производным витамина B5. Этот кофермент выполняет несколько различных функций. Во-первых, он отвечает за инициирование производства жирных кислот в клетках.Жирные кислоты образуют фосфолипидный бислой, который составляет клеточную мембрану, что необходимо для жизни. Коэнзим А также инициирует цикл лимонной кислоты, что приводит к выработке АТФ.
Невитамины
Невитаминные коферменты обычно способствуют химическому переносу ферментов. Они обеспечивают физиологические функции организма, такие как свертывание крови и обмен веществ. Эти коферменты могут быть получены из нуклеотидов, таких как аденозин, урацил, гуанин или инозин.
Аденозинтрифосфат (АТФ) является примером незаменимого невитаминного кофермента.Фактически, это наиболее распространенный кофермент в организме человека. Он транспортирует вещества и поставляет энергию, необходимую для необходимых химических реакций и сокращения мышц. Для этого АТФ переносит и фосфат, и энергию в различные места внутри клетки. Когда фосфат удаляется, энергия также высвобождается. Этот процесс является результатом цепи переноса электронов. Без кофермента АТФ на клеточном уровне было бы мало энергии, и нормальные жизненные функции не могли бы происходить.
Вот пример цепи переноса электронов. Коэнзим НАДН, полученный из витаминов, начинает процесс с доставки электронов. Конечным продуктом является АТФ:
- Catalyze — Чтобы вызвать или ускорить реакцию.
- Фермент — белок, катализирующий химические реакции в организме.
- Активный сайт — Область на ферменте, где субстраты связываются во время реакции.
- Субстрат — Вещество, на которое фермент воздействует, создавая новый продукт.
Тест
1. Зачем нужны коферменты?
A. Они катализируют реакции в организме
B. Они присоединяются к ферменту, который катализирует реакцию
C. Они производят витамины и нуклеотиды
D. Они останавливают ненужные реакции
Ответ на Вопрос № 1
B правильный. Коферменты не могут функционировать, если они не присоединены к ферменту.
2.Коэнзим — это белок.
A. True
B. False
Ответ на вопрос № 2
False. Коферменты — это небелковые молекулы, которые связываются с ферментом.
3. Какие из перечисленных ниже коферментов могут быть?
A. Повторно используется и перерабатывается в организме
B. Используется только один раз в реакции
C. Ионы металлов
D. Молекулы, прочно связанные с ферментом
Ответ на вопрос № 3
правильный.Коферменты слабо прикрепляются к ферментам, поэтому после реакции они могут высвободиться и использоваться снова.
Служба анализа коэнзима I — Creative Proteomics
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) — это метод, позволяющий разделять нелетучие, термически нестабильные и полярные компоненты по отдельности или в смеси. По сути, хроматография — это метод, используемый для разделения компонентов, содержащихся в образце. ВЭЖХ — это тип хроматографии, который из-за широкого диапазона применения и количественной точности считается незаменимым аналитическим методом, особенно в области органической химии.Он также широко используется в качестве методики подготовки для выделения и очистки целевых компонентов, содержащихся в смесях. Российско-польский ботаник М. Цветт считается первым человеком, установившим принципы хроматографии. В статье, которую он представил в 1906 году, Цветт описал, как он наполнил стеклянную трубку меловым порошком (CaCO3) и, пропустив эфирный раствор хлорофилла через мел, разделил хлорофилл на слои разного цвета.Он назвал эту технику «хроматографией». ВЭЖХ использовала качество и количество как малых молекул, так и полимерных частиц. Служба анализа высокопроизводительной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) по Creative-Proteomics предлагает вам современную платформу разделения жидкостей, которая включает стандартную ВЭЖХ с часто используемыми механизмами разделения.
Коэнзим I также известен как никотинамидадениндинуклеотид, который состоит из рибозилникотинамид-5′-дифосфата, связанного с аденозин-5′-фосфатом пирофосфатной связью. Коэнзим I широко присутствует во всех живых клетках. В клетках есть две формы коэнзима I : одна представляет собой окислитель, называемый НАД +, а другой — восстановленный от НАДН, который можно использовать в качестве восстановителя для передачи электронов. Коэнзим I служит переносчиком электронов в многочисленных ферментативных реакциях. Коэнзим I также используется в других клеточных процессах, самый известный из которых является субстратом ферментов, которые добавляют или удаляют химические группы из белков в посттрансляционных модификациях белков.Ферменты, участвующие в метаболизме НАД, являются мишенями для открытия лекарств из-за важности этих функций.
Служба анализа коэнзима I по адресу Creative Proteomics поддерживает ваши исследования в области анализа коэнзима I . HPLC Платформа аналитических услуг на основе позволяет нам в Creative Proteomics предлагает вам современную аналитическую службу.
В том числе:
Служба анализа никотинамидадениндинуклеотида (NAD +)
Служба анализа коэнзима Q10
Служба анализа ниацина (никотиновая кислота, известная как витамин B3)
Служба анализа никотинамида
специалисты Creative Proteomics высоко оценены опыт и знания в области применения анализа HPLC в самых разных отраслях промышленности, от продуктов питания и напитков до фармацевтики и многих других.Опыт, быстрое выполнение работ, четкие и краткие письменные отчеты и индивидуальное обслуживание помогут клиентам решить ваши аналитические и технические задачи.
* Только для исследовательских целей. Не использовать в диагностических процедурах.
Наши представители по обслуживанию клиентов доступны 24 часа в сутки, 7 дней в неделю.