Коэнзим инструкция: Коэнзим Композитум инструкция по применению: показания, противопоказания, побочное действие – описание Coenzyme Compositum Раствор для в/м введения гомеопатический (28637)

Биохимическая диагностика дефицита коэнзима Q10 — FullText — Molecular Syndromology 2014, Vol. 5, № 3-4

Абстрактные

, по-видимому, имеет особенно неоднородную клиническую картину.Однако существует 5 распознаваемых клинических фенотипов: энцефаломиопатия, тяжелое детское мультисистемное заболевание, нефропатия, мозжечковая атаксия и изолированная миопатия. Однако, хотя и полезны, одних только клинических симптомов недостаточно для окончательного диагноза дефицита CoQ ₁₀ , который основан на биохимической оценке тканевого статуса CoQ ₁₀ . В этой статье мы рассмотрим биохимические методы, используемые для диагностики дефицита человеческого CoQ ₁₀ , и укажем наиболее подходящие ткани для этой оценки.

© 2014 S. Karger AG, Базель

Коэнзим Q ₁₀ (CoQ ₁₀ ) играет важную роль в окислительном фосфорилировании, где он действует как переносчик электронов в митохондриальной цепи переноса электронов (ETC; рис.1), принимая электроны, полученные из комплекса I (НАДН убихинон). редуктаза; EC 1.6.5.3) и комплекс II (сукцинатубихинонредуктаза; EC 1.3.5.1) и перенос их в комплекс III (убихинолцитохром c редуктаза; EC 1.10.2.2) [Эрнстер и Даллнер, 1995]. Восстановленная форма CoQ ₁₀ , убихинол, выполняет важную клеточную антиоксидантную функцию; он защищает мембраны и липопротеины плазмы от окисления, вызванного свободными радикалами [Ernster and Forsmark-Andrée, 1993]. Кроме того, CoQ ₁₀ также участвует в репликации и репарации ДНК благодаря своей роли в синтезе пиримидина [Lopez-Martin et al., 2007], модуляции апоптоза посредством регуляции поры перехода митохондриальной проницаемости [Cotan et al., 2011] и регуляции температуры тела посредством его обязательной кофакторной роли для разобщающих белков [Echtay et al., 2001].

Рис. 1

Структура митохондриальной цепи переноса электронов, показывающая функцию переноса электронов кофермента Q ₁₀ (Q). Красные кружки указывают на белки с мутациями, вызывающими дефицит CoQ ₁₀ ; см. таблицу 1.

Таблица 1

Мутации гена и связанные клинические фенотипы пациентов с дефицитом CoQ ₁₀

С учетом его роли как переносчика электронов в ETC и его антиоксидантной функции, дефицит CoQ ₁₀ Статус, вероятно, может вносить вклад в патофизиологию заболевания, вызывая сбой в энергетическом обмене и ставя под угрозу клеточный антиоксидантный статус.

Первые случаи дефицита CoQ ₁₀ были зарегистрированы в 1989 году Ogasahara et al. Пациенты были 2 сестрами, рожденными от неродственных родителей, у которых был рецидивирующий рабдомиолиз, связанный с припадками и умственной отсталостью. С этого времени был описан ряд пациентов, и дефицит CoQ ₁₀ , по-видимому, имеет особенно неоднородную клиническую картину. Однако существует 5 различных клинических фенотипов: энцефаломиопатия, тяжелое детское мультисистемное заболевание, нефропатия, мозжечковая атаксия и изолированная миопатия [Emmanuele et al., 2012]. В большинстве случаев семейный анамнез предполагает аутосомно-рецессивный тип наследования. С 2006 года мутации в 7 генах, кодирующих компоненты, тесно связанные с путем биосинтеза CoQ ₁₀ , были связаны с дефицитом CoQ ₁₀ человека (таблица 1). Однако у большинства пациентов с дефицитом CoQ ₁₀ не удалось идентифицировать основную генетическую причину [Rahman et al., 2012]. Генетический диагноз дефицита CoQ ₁₀ осложняется тем фактом, что путь биосинтеза CoQ ₁₀ у людей еще не выяснен полностью, и возникает вероятность того, что причина дефицита может быть результатом патогенных мутаций в генах, не являющихся непосредственно связанные с синтезом CoQ ₁₀ [Emmanuele et al., 2012].

Целью данной статьи является критический обзор современных биохимических методов, используемых в диагностике дефицита человеческого CoQ ₁₀ , и определение наиболее подходящих тканей для этой оценки.

Методы, используемые для определения тканевого CoQ

Наиболее распространенные лабораторные процедуры, используемые для диагностики дефицита CoQ ₁₀ , основаны на жидкостной хроматографии высокого давления с ультрафиолетовым (HPLC-UV) или электрохимическим (HPLC-ED) системы обнаружения.Другие процедуры, такие как тандем-масс-спектрометрия, были использованы для оценки тканевого CoQ ₁₀ ; однако этот метод не будет обсуждаться далее в этой статье, и читателю отсылаем к обзору Barshop and Gangoiti [2007], в котором обсуждается эта аналитическая процедура. Хотя можно определить восстановленную (убихинол) и окисленную формы CoQ ₁₀ одновременно с помощью анализа HPLC-ED, диагностически определение общего состояния CoQ ₁₀ в тканях является достаточно точным для выявления дефицита CoQ ₁₀ человека.Одновременное измерение как восстановленной, так и окисленной формы CoQ ₁₀ обычно требует сложного преданалитического управления образцами, а с хроматографической точки зрения это сложнее, чем измерение общего CoQ ₁₀ . Кроме того, склонность убихинола окисляться до CoQ ₁₀ , если не замораживать сразу при -80 ° C, может снизить клиническую применимость этого определения [Molyneux et al., 2008]. Следовательно, одновременная оценка восстановленной и окисленной форм CoQ ₁₀ , вероятно, больше подходит для исследовательских целей, чем для клинической диагностики.Однако в образцах ткани с надлежащим обращением соотношение убихинол: CoQ ₁₀ использовалось в качестве маркера окислительного стресса [Niklowitz et al., 2004; Kaya et al., 2012].

В следующих параграфах будут описаны подробности методов ВЭЖХ, используемых для определения статуса тканевого CoQ ₁₀ в лабораториях авторов.

Условия ВЭЖХ-УФ

Общее количество CoQ в тканях _{10 Состояние} количественно определяют с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ с УФ-детектированием при 275 нм в соответствии с методом Duncan et al.[2005]. CoQ ₁₀ разделяют на колонке для ВЭЖХ (Techsphere ODS 5 мкм, 150 × 4,6 мм). Подвижная фаза состоит из этанола: метанола: 60% хлорной кислоты; 700: 300: 1,2, к которому добавлено 7 г перхлората натрия [Boitier et al., 1998]. Скорость потока поддерживается на уровне 0,7 мл / мин. Виды убихинона обнаруживаются при 275 нм. Этот метод ВЭЖХ был использован для определения статуса CoQ ₁₀ скелетных мышц и мононуклеарных клеток крови, которые были приготовлены и экстрагированы в соответствии с методом Duncan et al.[2005].

Условия HPLC-ED

Общая концентрация CoQ ₁₀ количественно определяется обращенно-фазовой ВЭЖХ с электрохимическим детектированием (Coulochem II, ESA, Массачусетс, США) в соответствии с ранее описанной процедурой [Montero et al., 2008] . Вкратце, CoQ ₉ и CoQ ₁₀ разделяют в колонке с нуклеосилом C-18 (5 мкм, 25 × 0,4 см, Teknokroma, Барселона, Испания). Подвижная фаза состоит из 20 мМ перхлората лития в смеси этанол / метанол (40/60). Ячейки электрохимического детектора были установлены на -600 мВ (ячейка кондиционирования, модель 5021) и +600 мВ (ячейка для анализа, модель 5010).

Этот метод ВЭЖХ был использован для оценки состояния CoQ ₁₀ плазмы, скелетных мышц и фибробластов (рис. 2), которые были приготовлены и экстрагированы в соответствии с методом Montero et al. [2008].

Рис.2

Обращенные хроматограммы HPLC-ED для CoQ ₉ и CoQ ₁₀ дюймов стандартного калибратора Q ₁₀ и внутреннего стандарта Q _{9 Профиль} , b Профиль сыворотки , c профиль мышц и d фибробластов.

Внутренние стандарты

Основная трудность, с которой приходится сталкиваться при оценке статуса CoQ ₁₀ в ткани, заключается в отсутствии коммерчески доступных нефизиологических внутренних стандартов (IS). В большинстве случаев препаратом выбора является кофермент Q ₉ [Okamoto et al., 1988]. К сожалению, в результате пищевого загрязнения и синтеза кишечными микроорганизмами CoQ ₉ был обнаружен в образцах тканей и плазмы человека, составляющих до 2-7% от общего пула убихинона [Weber et al., 1997]. Чтобы избежать возможного влияния эндогенных убихинонов при оценке состояния тканевого CoQ ₁₀ , нефизиологические убихиноны, диэтокси-CoQ ₁₀ [Edlund, 1988] и ди-пропокси-CoQ ₁₀ [Duncan et al. , 2005], использовались как IS в этих определениях.

Оценка ткани

Оценка плазмы, мононуклеарных клеток крови и тромбоцитов

Клиническая оценка дефицита CoQ ₁₀ обычно основана на измерениях в плазме, а референтный интервал, установленный для статуса CoQ ₁₀ в плазме, кажется, находится в диапазоне от 0.От 5 до 1,7 мкМ [Molyneux et al., 2008]. Уровни CoQ ₁₀ в плазме также отслеживаются после дополнительной терапии для оценки абсорбции и биодоступности составов CoQ ₁₀ . Плазменные уровни CoQ ₁₀ до 10,7 мкМ были достигнуты после добавления солюбилизированных составов убихинола [Bhagavan and Chopra, 2007]. Уровни CoQ ₁₀ в плазме выше, чем «нормальные», по-видимому, необходимы для облегчения поглощения тканями и передачи через гематоэнцефалический барьер, хотя эти уровни могут различаться для разных тканей [Bhagavan and Chopra, 2007].При болезни Паркинсона уровни CoQ ₁₀ в плазме, составляющие 4,6 мкМ, сообщали Shults et al. [2002], чтобы быть наиболее эффективным в замедлении функционального снижения у пациентов. Напротив, уровень в плазме 2,8 мкМ показал наивысший терапевтический эффект при лечении пациентов с застойной болезнью сердца [Belardinelli et al., 2006]. Пол, по-видимому, не влияет на статус CoQ ₁₀ в плазме [Molyneux et al., 2005]; однако влияние возраста на уровни CoQ ₁₀ в плазме пока остается неопределенным, при этом в исследованиях сообщается как о положительной корреляции с возрастом, так и в других не обнаружено возрастных эффектов [Miles et al., 2004; Дункан и др., 2005]. На статус CoQ ₁₀ в плазме влияет как питание, так и биосинтез печени [Hargreaves et al., 2005]. Это контрастирует с другими тканями, которые зависят от биосинтеза de novo [Kalen et al., 1987]. Влияние диеты имеет особое значение, поскольку CoQ ₁₀ имеет относительно длительный период полувыведения из кровообращения (около 24 часов), а потребление с пищей может составлять до 25% от общего количества CoQ ₁₀ в плазме [Weber et al., 1997].

Состояние CoQ ₁₀ в плазме сильно зависит от концентрации липопротеинов, которые являются основными переносчиками CoQ ₁₀ в кровотоке, при этом примерно 58% общего CoQ в плазме ₁₀ связано с липопротеинами низкой плотности или ЛПНП фракция [Karlsson et al., 1992; Макдоннелл и Арчболд, 1996]. Следовательно, ввиду его зависимости как от приема с пищей, так и от концентрации липопротеинов, статус CoQ ₁₀ в плазме может не отражать уровни в тканях [Duncan et al., 2005]. Было высказано предположение, что уровни CoQ ₁₀ в плазме должны быть выражены как отношение либо к общему холестерину плазмы, либо к холестерину ЛПНП, чтобы иметь диагностическую ценность [Kontush et al., 1997; Tomasetti et al., 1999]. Кроме того, экспрессия CoQ ₁₀ в плазме в виде отношения к общему холестерину, по-видимому, исключает какое-либо влияние возраста на этот параметр [Wolters and Hahn, 2003; Molyneux et al., 2005].

Оценка мононуклеарных клеток крови была предложена в качестве альтернативного суррогата для оценки статуса эндогенного CoQ ₁₀ [Duncan et al., 2005]. Мононуклеарные клетки легко выделяются из крови EDTA / Li-гепарина, и сообщалось, что статус этих клеток по CoQ ₁₀ коррелирует со статусом скелетных мышц [Duncan et al., 2005]. Сообщается также, что мононуклеарные клетки крови отражают изменения клеточного статуса после приема добавок [Turunen et al., 2004]. Об этом свидетельствует пациент, описанный в исследовании Duncan et al. [2005], у которого был обнаружен дефицит CoQ ₁₀ в мононуклеарных клетках крови (20 пмоль / мг белка: референтный интервал 37-133 пмоль / мг).Однако после приема добавок CoQ ₁₀ в дозе 300 мг / день в течение 2 месяцев статус мононуклеарных клеток CoQ ₁₀ у пациента повысился до 42 пмоль / мг, и это сопровождалось улучшением подвижности; пациент прошел путь от «шарлатанства снизу» до способности ходить с помощью посторонней помощи. Тромбоциты также использовались в качестве суррогатов для оценки эндогенных уровней CoQ ₁₀ в клинических исследованиях [Shults et al., 1997; Mortensen et al., 1998]. Кроме того, было обнаружено, что статус тромбоцитов CoQ ₁₀ повышается после добавления CoQ ₁₀ , что указывает на то, что эти клеточные фрагменты также могут использоваться для мониторинга эффекта добавления CoQ ₁₀ на эндогенные уровни [Niklowitz et al., 2004].

Скелетная мышца

Скелетная мышца обычно считается тканью выбора для оценки CoQ ₁₀ , и эта ткань использовалась для диагностики дефицита CoQ ₁₀ , так как первые случаи этого дефицита были описаны Ogasahara et al. . [1989]. Однако с учетом важности этой ткани в диагностике дефицита CoQ ₁₀ , по-видимому, не существует общепринятых единиц, в которых можно было бы представить статус CoQ ₁₀ скелетных мышц, и поэтому трудно сравнивать референсные диапазоны между лаборатории (таблица 2).Как показано в таблице 2, статус CoQ ₁₀ скелетных мышц может быть представлен либо в единицах мкг / г свежей массы ткани, либо в пмоль / мг белка (нмоль / г белка). Интересно, что хотя методы обнаружения ВЭЖХ-УФ и ВЭЖХ-ЭД использовались для определения статуса CoQ ₁₀ в скелетных мышцах в исследованиях, описанных Rahman et al. [2001] и Montero et al. [2008], соответственно, референсные диапазоны, указанные в этих исследованиях, заметно схожи. В исследовании Montero et al. [2008], был описан пациент, у которого предполагалось снижение уровня CoQ ₁₀ в скелетных мышцах ввиду серьезного снижения активности ETC CoQ ₁₀ -зависимых ферментов, комплексов II-III (сукцинат: цитохром c редуктаза; ЭК.1.3.5.1 + 1.10.2.2) и I-III (НАДН: цитохром с редуктаза; ЭК 1.6.5.3 + 1.10.2.2). Однако было обнаружено, что у пациента нормальный уровень CoQ в скелетных мышцах ₁₀ по отношению к белку (125 нмоль / г; контрольные значения: 110-480 нмоль / г). Когда содержание CoQ ₁₀ в мышцах было связано с активностью цитрат-синтазы (CS), митохондриальный маркер фермента [Selak et al., 2000], свидетельствовавший о дефиците CoQ ₁₀ , был очевиден (1,16 нмоль / CS единиц; ссылка значения 2,68-8,47 нмоль / CS).Возможным объяснением этого наблюдения, предложенного авторами, была возможность того, что высокая степень мышечного повреждения, который испытывал пациент [рабдомиолиз и повышенные уровни креатинкиназы в плазме (250 000 МЕ; контрольные значения 50–250 МЕ)], могли привести к истощению белка скелетных мышц. Следовательно, когда статус CoQ ₁₀ был связан с общим содержанием мышечного белка, это могло привести к «ложноотрицательному» результату. Поскольку примерно 50% клеточного CoQ ₁₀ присутствует в митохондриях [Ernster and Dallner, 1995], статус экспрессии мышечного CoQ ₁₀ по отношению к активности CS может иметь важное диагностическое значение (таблица 2).Это особенно важно при митохондриальных миопатиях, где наблюдается чрезмерная пролиферация митохондрий в мышцах [DiMauro, 2004] и, следовательно, экспрессия CoQ ₁₀ в отношении активности CS, которая учитывает то, что обогащение митохондрий в образце может указывать на доказательства дефицита, который не может быть идентифицирован, если статус CoQ ₁₀ связан исключительно с общим белком.

Таблица 2

Контрольные значения уровней CoQ ₁₀ в мышцах и фибробластах, выраженные в различных единицах, о которых сообщается в литературе

Снижение активности комплекса I-III и / или комплекса II-III ETC также указывает на наличие Дефицит CoQ ₁₀ , поскольку активность этих связанных ферментов зависит от эндогенного CoQ ₁₀ [Rahman et al., 2001]. Кроме того, исследование Montero et al. [2008] предположили, что активность комплекса II-III может быть более чувствительным маркером снижения статуса CoQ ₁₀ , чем активность комплекса I-III. Однако нормальные уровни активности комплекса I-III или II-III не исключают снижения статуса мышечного CoQ ₁₀ , как это ранее наблюдалось у пациентов с атаксическим фенотипом дефицита CoQ ₁₀ [Lamperti et al., 2003 ]. Ввиду важной роли убихинола в синтезе пиримидина [Lopez et al., 2006], синдром истощения митохондриальной ДНК также может быть связан со снижением статуса CoQ ₁₀ , как сообщалось Montero et al. [2009]. Следовательно, оценка состояния мышечного CoQ ₁₀ у пациентов с множественным дефицитом ETC не должна расстраиваться. Кроме того, ввиду связи между мутациями митохондриальной ДНК и дефицитом мышечного кофермента Q ₁₀ , оценка состояния мышечного CoQ ₁₀ должна рассматриваться в дополнение к определению активности ферментов ETC у пациентов с подозрением на митохондриальное заболевание [Sacconi et al. ., 2010]. Снижение активности глицерин-3-фосфатдегидрогеназы и / или дигидрооротатцитохром с-редуктазы также может указывать на свидетельство снижения уровней CoQ ₁₀ в мышцах, поскольку эти ферменты, как сообщается, особенно чувствительны к нарушениям в статусе CoQ ₁₀ [Rotig et al., 2000].

Фибробласты

Оценка состояния фибробластов CoQ ₁₀ также следует учитывать при диагностике дефицита CoQ ₁₀ . Опубликованные эталонные диапазоны для статуса фибробластов CoQ ₁₀ показаны в таблице 2.Принимая во внимание предполагаемую тканевую специфичность дефицита CoQ ₁₀ , нормальный уровень CoQ ₁₀ в фибробластах не исключает дефицит статуса CoQ ₁₀ в других тканях [Ogasahara et al., 1989]. Действительно, нормальные уровни фибробластов CoQ ₁₀ были зарегистрированы у пациентов с генетически подтвержденными дефектами биосинтеза CoQ ₁₀ [Lagier-Tourenne et al., 2008]. Однако, напротив, оценка фибробластов использовалась для выявления доказательств дефицита CoQ ₁₀ у пациента с нормальным статусом мышечного CoQ ₁₀ [Montero et al., 2008]. Фибробласты также предоставляют средства для анализа биосинтеза CoQ ₁₀ путем изучения включения ¹⁴ Cp-гидроксибензоата, ³ H-мевалоната и / или ³ H-декапренилпирофосфата в CoQ ₁₀ [Lopez et al. др., 2006; Quinzii et al., 2006]. Эти исследования включения с радиоактивной меткой можно использовать для подтверждения дефицита биосинтеза CoQ ₁₀ , определения положения дефекта в пути биосинтеза в некоторых случаях, а также для различения первичного и вторичного дефицита CoQ ₁₀ .

Церебральная спинномозговая жидкость

Ввиду преобладания неврологической дисфункции, связанной с дефицитом CoQ ₁₀ [Mancuso et al., 2010], возможность оценить церебральный статус CoQ ₁₀ будет иметь значительную диагностическую ценность. Спинномозговая жидкость (CSF) считается подходящим суррогатом для оценки статуса церебрального CoQ ₁₀ . Однако ввиду низких уровней CoQ ₁₀ , обнаруживаемых в спинномозговой жидкости с помощью ВЭЖХ-УФ, обнаружение было бы недостаточно чувствительным для этого анализа [Duncan et al., 2005]. Ориентировочные референсные диапазоны для уровней CoQ ₁₀ в спинномозговой жидкости 1,18-4,91 нМ, установленные для когорты пациентов в возрасте 9-18 лет, n = 15 [Artuch et al., 2004] и 5,7-9 нМ, установленные для когорты пациентов в возрасте 0,1- 22 года, n = 17 [Duberley et al., 2012], соответственно. Расхождения в этих диапазонах могут частично быть результатом различных аналитических методик и пробоподготовки, используемых для этого определения. В исследовании Artuch et al. [2004], образцы спинномозговой жидкости фильтровали, пропуская через колонку 10,000-NMWL, перед анализом методом HPLC-EC.Напротив, тандемная спектрометрия использовалась для определения статуса CoQ ₁₀ в нефильтрованной спинномозговой жидкости в исследовании Duberley et al. [2012]. Еще одним фактором, который, возможно, также повлиял на это несоответствие, является разный возраст пациентов, находящихся в «контрольной группе», используемых для установления этих референсных диапазонов. Хотя Isobe et al. [2010] не сообщили о корреляции между возрастом и статусом CoQ ₁₀ в спинномозговой жидкости, это исследование проводилось исключительно на взрослых в возрасте 65,8 ± 12,4 года (среднее ± стандартное отклонение), а спинномозговая жидкость не исследовалась у детей.Следовательно, чтобы установить более надежный и надежный референтный интервал для статуса CSF CoQ ₁₀ , необходимы дальнейшие исследования, которые оценивают влияние возраста, пола, а также рострально-каудального градиента на уровни этого убихинона в спинномозговой жидкости.

Обсуждение / Заключение

Фактическая распространенность дефицита CoQ ₁₀ человека в настоящее время неизвестна, но есть подозрения, что это состояние недостаточно диагностировано [Rahman et al., 2012]. Это усугубляется отсутствием специализированных центров, которые могли бы определять статус CoQ ₁₀ в тканях, а также крайней клинической неоднородностью этого состояния [Rahman et al., 2012]. Рекомендуется определять статус CoQ ₁₀ в биопсиях мышц всех пациентов с подозрением на митохондриальное заболевание. Как только будет обнаружено доказательство дефицита CoQ ₁₀ , потребуются дальнейшие исследования для выяснения основной причины этого дефекта. Генетические исследования и биосинтетические исследования с радиоактивной меткой в ​​фибробластах могут помочь различить первичные и вторичные причины дефицита. Однако у ряда пациентов с дефицитом CoQ ₁₀ не удалось выяснить основную причину дефекта [Rahman et al., 2012].

Поскольку биопсия мышц не всегда доступна, необходимы менее инвазивные средства для оценки состояния CoQ ₁₀ в тканях. Хотя есть некоторые опасения по поводу диагностической ценности уровней CoQ ₁₀ в плазме, определение тромбоцитов и мононуклеарных клеток крови может предложить альтернативный способ этой оценки.

Было высказано предположение, что в пути биосинтеза CoQ ₁₀ могут быть тканеспецифические изоферменты; поэтому статус CoQ ₁₀ одной ткани может не отражать статус другой [Ogasahara et al., 1989]. Поскольку неврологическая дисфункция является постоянным клиническим признаком синдромов дефицита CoQ ₁₀ , хотя некоторые дефекты могут быть выражены в мышцах или периферических тканях, другие дефекты (например, дефекты церебрального биосинтеза CoQ ₁₀ ) могут не проявляться и оставаться невыявленными. . Таким образом, способность точно оценить статус CoQ ₁₀ в спинномозговой жидкости может повысить эффективность диагностики пациентов с неврологической дисфункцией и ранее недиагностированным церебральным дефицитом CoQ ₁₀ .Ввиду различий в тканях, выбранных для оценки CoQ ₁₀ , единицах, в которых выражается CoQ ₁₀ , и референтных интервалах, используемых для этого диагноза между лабораториями, требуется более унифицированный подход для мониторинга пациентов и их лечения. Для лабораторий, предлагающих эту клинико-диагностическую услугу, предлагается создать схему внешнего контроля качества (Ex-QC) для измерения статуса CoQ ₁₀ в тканях. В настоящее время между лабораториями Великобритании и Испании проводится испытательная схема Ex-QC, и в случае успеха она будет предложена в более глобальном масштабе.

Благодарности

Эта работа была поддержана Центром биомедицинских сетевых исследований редких заболеваний (CIBERER-ISCIII) и проектом FIS: PI11 / 02350. Часть этой работы была проведена в Университетском колледже больниц Лондона, который получил часть своего финансирования из схемы финансирования Центров биомедицинских исследований NIHR Министерства здравоохранения.

Список литературы

1. Artuch R, Aracil A, Mas A, Monros E, Vilaseca MA и др.: Концентрация идебенона в спинномозговой жидкости у пациентов с атаксией Фридрейха.Нейропедиатрия 35: 95-98 (2004).
2. Barshop BA, Gangoiti JA: Анализ кофермента Q в крови и тканях человека. Митохондрия 7S: s89-s93 (2007).
3. Belardinelli R, Mucaj A, Lacalaprice F, Solenghi M, Seddaiu G и др.: Коэнзим Q10 и упражнения при хронической сердечной недостаточности.Eur Heart J 27: 2675-2681 (2006).
4. Бхагаван Х.Н., Чопра Р.К.: Реакция плазменного кофермента Q10 на пероральный прием препаратов кофермента Q10. Митохондрия 7S: s78-s88 (2007).
5. Буатье Э, Дегуль Ф, Дегер I, Шарпантье С, Франсуа Д. и др.: Случай митохондриальной энцефаломиопатии, связанной с дефицитом мышечного кофермента Q10.J Neurol Sci 156: 41-46 (1998).
6. Бухан Н., Ариас А., Монтеро Р., Гарсия-Виллория Дж., Лиссенс В. и др.: Анализ биосинтеза CoQ10 в культивируемых фибробластах с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии. J Inherit Metab Dis (2013), в печати.
7. Cotan D, Cordero MD, Garrido-Maraver J, Oropesa-Avila M, Rodriguez-Hernandez A и др.: Вторичный дефицит кофермента Q10 запускает митохондриальную деградацию в результате митофагии в фибробластах MELAS.FASEB J 25: 2669-2687 (2011).
8. DiMauro S: Митохондриальные заболевания. Biochimica et Biophysica Acta 1654: 80-88 (2004).
9. Диомеди-Камассей Ф., Ди Джандоменико С., Санторелли Ф. М., Карди Дж., Пьемонте Ф. и др.: Нефропатия COQ2: недавно описанная наследственная митохондриопатия с первичным поражением почек.J Am Soc Nephrol 18: 2773-2780 (2007).
10. Duberley KE, Hargreaves IP, Chaiwatanasirikul K, Heales SJ, Rahman S, et al: Разработка метода масс-спектрометрии для количественного определения кофермента Q10 в спинномозговой жидкости. J Inherit Metab Dis 35 Дополнение 1: S124 (2012).
11. Duncan AJ, Heales SJ, Mills K, Eaton S, Land JM, et al: Определение коэнзима Q ₁₀ в мононуклеарных клетках крови, скелетных мышцах и плазме с помощью ВЭЖХ с использованием дипропокси-коэнзима Q ₁₀ в качестве внутреннего стандарта .Clin Chem 51: 2380-2382 (2005).
12. Дункан А.Дж., Битнер-Глинджич М., Менье Б., Костелло Н., Харгривс И.П. и др.: Нонсенс-мутация в COQ9 вызывает аутосомно-рецессивный первичный дефицит кофермента Q10 у новорожденных: потенциально излечимая форма митохондриального заболевания.Am J Hum Genet 84: 558-566 (2009).
13. Echtay KS, Winkler E, Frischmuth K, Klingenberg M: Разобщающие белки 2 и 3 являются высокоактивными переносчиками H ⁺ и очень чувствительны к нуклеотидам при активации коферментом Q (убихиноном). Proc Natl Acad Sci USA 98: 1416-1421 (2001).
14. Эдлунд П.О.: Определение кофермента Q ₁₀ , α-токоферола и холестерина в биологических образцах методом жидкостной хроматографии на спаренных колонках с кулонометрическим и ультрафиолетовым детектированием. J Chromatogr 425: 87-97 (1988).
15. Эммануэле В., Лопес Л.С., Берардо А., Наини А., Тадессе С. и др.: Гетерогенность дефицита кофермента Q10: исследование пациентов и обзор литературы.Arch Neurol 69: 978-83 (2012).
16. Эрнстер Л., Даллнер Г.: Биохимические, физиологические и медицинские аспекты функции убихинона. Biochim Biophys Acta 1271: 195-204 (1995).
17. Эрнстер Л., Форсмарк-Андре П.: Убихинол: эндогенный антиоксидант в аэробных организмах.Clin Investigate 71 (8 Suppl): S60-S65.
18. Hargreaves IP, Duncan AJ, Heales SJR, Land JM: Эффект ингибиторов HMG-CoA редуктазы на коэнзим Q ₁₀ доступность: биохимические / клинические последствия. Drug Saf 28: 659-676 (2005).
19. Heeringa SF, Chernin G, Chaki M, Zhou W, Sloan AJ, et al: COQ6 Мутации у людей вызывают нефротический синдром с нейросенсорной глухотой.Дж. Клин Инвест 121: 2013-2024 (2011).
20. Хорват Р., Шнайдерат П., Шозер Б.Г., Гемпель К., Нойен-Якоб Э. и др.: Дефицит коэнзима Q10 и изолированная миопатия. Неврология 66: 253-255 (2006).
21. Isobe C, Abe T, Terayama Y: Уровни восстановленного и окисленного кофермента Q10 и 8-гидрокси-2-дезоксигуанозина в спинномозговой жидкости пациентов с болезнью Паркинсона при жизни демонстрируют, что повреждение митохондрий окислительным стрессом и / или окислительное повреждение ДНК способствует нейродегенеративному процессу. процесс.Neuroscience Letts 469: 159-163 (2010).
22. Кален А., Норлинг Б., Аппельквист Е.Л., Даллнер Г.: Биосинтез убихинона микросомальной фракцией печени крысы. Biochim Biophys Acta 926: 70-78 (1987).
23. Карлссон Дж., Диамент Б., Эдлунд П.О., Лунд Б., Фолкерс К. и др.: Убихинон в плазме, α-токоферол и холестерин у человека.Int J Vitam Nutr Res 62: 160-164 (1992).
24. Kaya Y, Cebi A, Soylemez N, Demir H, Alp HH и др.: Корреляция между окислительным повреждением ДНК, окислительным стрессом и коэнзимом Q10 у пациентов с ишемической болезнью сердца. Int J Med Sci 9: 621-626 (2012).
25. Контуш А., Райх А., Баум К., Спрангер Т., Финк Б. и др.: Уровень убихинола-10 в плазме снижается у пациентов с гиперлипидемией.Атеросклероз 129: 119-126 (1997).
26. Lagier-Tourenne C, Tazir M, Lopez LC, Quinzii CM, Assoum M, et al: ADCK3 , предковая киназа, мутировала в форме рецессивной атаксии, связанной с дефицитом кофермента Q10. Am J Hum Genet 82: 661-672 (2008).
27. Lamperti C, Naini A, Hirano M, De Vivo DC, Bertini E, et al: Мозжечковая атаксия и дефицит коэнзима Q10.Неврология 60: 1206-1208 (2003).
28. Lopez LC, Schuelle M, Quinzii CM, Kanki T, Rodenburg RJ, et al: Синдром Ли с нефропатией и дефицитом CoQ10 из-за мутаций субъединицы 2 декапренилдифосфатсинтазы (PDSS2) . Am J Hum Genet 79: 1125-1129 (2006).
29. Лопес-Мартин Дж. М., Сальвиати Л., Тревиссон Э., Монтини Дж., Димауро С. и др.: Миссенс-мутация гена COQ2 вызывает дефекты биоэнергетики и синтеза пиримидина de novo.Hum Mol Genet 16: 1091-1097 (2007).
30. Mancuso M, Orsucci D, Volpi L, Calsolaro V, Siciliano G: Коэнзим Q10 при нервно-мышечных и нейродегенеративных расстройствах. Curr Drug Targets 11: 111-121 (2010).
31. McDonnell MG, Archbold GP: Соотношения убихинол / холестерин в плазме у пациентов с гиперлипидемией, сахарным диабетом и у пациентов, нуждающихся в диализе.Clin Chim Acta 253: 117-126 (1996).
32. Майлз М.В., Хорн П.С., Моррисон Дж. А., Танг PH, ДеГрау Т. и др. Референсные интервалы плазменного кофермента Q10, но не окислительно-восстановительный статус, зависят от пола и расы у здоровых взрослых, о которых сообщают сами пациенты. Clin Chim Acta 347: 139-144 (2004).
33. Моллет Дж, Джургеал I, Шлеммер Д., Даллнер Дж., Кретьен Д. и др.: Пренилдифосфатсинтаза, субъединица 1 (PDSS1) и мутации ОН-бензоатполипренилтрансферазы (COQ2) при дефиците убихинона и окислительных расстройствах.Дж. Клин Инвест 17: 765-772 (2007).
34. Mollet J, Delahodde A, Serre V, Chretien D, Schlemmer D, et al: CABC1 Мутации гена вызывают дефицит убихинона с мозжечковой атаксией и судорогами. Am J Hum Genet 82: 623-630 (2008).
35. Molyneux SL, Florkowski CM, Lever M, George PM: Биологические вариации кофермента Q _10. Clin Chem 51: 455-457 (2005).
36. Molyneux SL, Young JM, Florkowski CM, Lever M, George PM: Коэнзим Q10: есть ли клиническая роль и есть ли основания для измерения? Clin Biochem Rev 29: 71-81 (2008).
37. Montero R, Sánchez-Alcazar JA, Briones P, Hernández AR, Cordero MD, et al: Анализ коэнзима Q10 в мышцах и фибробластах для диагностики синдромов дефицита CoQ10.Clin Biochem 41: 697-700 (2008).
38. Montero R, Sanchez-Alcazar JA, Briones P, Navarro-Sastre A, Gallard E: Дефицит коэнзима Q10, связанный с синдромом истощения митохондриальной ДНК: отчет о болезни. Clin Biochem 42: 742-745 (2009).
39. Мортенсен С.А., Хайдт П., Сехестед Дж .: Клинические перспективы лечения сердечно-сосудистых заболеваний с помощью кофермента Q ₁₀ ; в Lenza G, Barnabei, Rabbi A, Battion M (eds): Highlights in Ubiquinone Research, pp 226-227 (Taylor and Francis, London 1998).
40. Никловиц П., Менке Т., Андлер В., Окун Дж. Г.: Одновременный анализ коэнзима Q10 в плазме, эритроцитах и ​​тромбоцитах: сравнение уровня антиоксидантов в клетках крови и окружающей их среде у здоровых детей и после пероральных добавок у взрослых. Clin Chim Acta 342: 219-226 (2004).
41. Огасахара С., Энгель А., Френс Д., Мак Д. Дефицит мышечного кофермента Q при семейном митохондриальном энцефаломиозите. Proc Natl Acad Sci USA 86: 2379-2382 (1989).
42. Окамото Т., Фукунага Ю., Ида Ю., Киши Т.: Определение восстановленных и общих убихинонов в биологических материалах с помощью жидкостной хроматографии с электрохимическим детектированием.J Chromatogr 430: 11-19 (1988).
43. Pastore A, Di Giovamberadino G, Petrillo S, Boenzi S, Bertini S, et al: Педиатрические контрольные интервалы для мышечного кофермента Q ₁₀ . Биомаркеры 17: 764-766 (2012).
44. Qunzii C, Naini A, Salviati L, Trevisson E, Navas P, et al: Мутация пара-гидроксибензоат-полипренилтрансферазы (COQ2) вызывает дефицит первичного кофермента Q10.Am J Hum Genet 78: 345-349 (2006).
45. Рахман С., Харгривс И., Клейтон П., Хилес С.: Неонатальная презентация дефицита коэнзима Q ₁₀ . J Pediatr 139: 456-458 (2001).
46. Rahman S, Clarke CF, Hirano M: 176 ^th Международный семинар ENMC: диагностика и лечение дефицита коэнзима Q ₁₀ .Нервно-мышечное расстройство 22: 76-86 (2012).
47. Ротиг А, Аппельквист Е.Л., Геромел В., Кретьен Д., Кадхом Н. и др.: Хинон-зависимая дисфункция множественных дыхательных цепей из-за широко распространенного дефицита кофермента Q ₁₀ . Ланцет 356: 391-395 (2000).
48. Sacconi S, Trevisson E, Salviat L, Ayme S, Rigal O и др.: Коэнзим Q10 часто снижается в мышцах пациентов с митохондриальными заболеваниями.Нервно-мышечное расстройство 20: 44-48 (2010).
49. Salviati L, Sacconi S, Murer L, Zacchello G, Franceschini L, et al: Инфантильная энцефаломиопатия и нефропатия с дефицитом CoQ10: состояние, реагирующее на CoQ10. Неврология 65: 606-608 (2005).
50. Salviati L, Trevisson E, Rodriquez-Hernandez MA, Casarin A, Pertegata V и др.: Гаплонедостаточность COQ4 вызывает дефицит коэнзима Q10.J Med Genet 49: 187-196 (2012).
51. Селак М.А., де Чадаревиан Дж. П., Мелвин Дж. Дж.: Митохондриальная активность при болезни Помпе. Pediatr Neurol 23: 54-57 (2000).
52. Shults CW, Haas RH, Passor D, Beal MF: коэнзим Q10 восстанавливается в митохондриях пациентов с паркинсонизмом.Ann Neurol 42: 261-265 (1997).
53. Шульц К.В., Оукс Д., Кибуртц К., Бил Флорида, Хаас Р. и др.: Эффекты коэнзима Q10 на ранних стадиях болезни Паркинсона. Arch Neurol 59: 1541-1550 (2002).
54. Terracciano A, Renaldo F, Zanni G, D ‘Amico A, Pastore A, et al: Использование мышечной биопсии в диагностике неопределенной атаксии с атрофией мозжечка у детей.Eur J Pediatric Neurol 16: 248-256 (2012).
55. Томасетти М., Литтарру Г.П., Стокер Р., Аллева Р. Обогащение коэнзима Q10 снижает окислительное повреждение ДНК в лимфоцитах человека. Free Radic Biol Med 27: 1027-1032 (1999).
56. Турунен М., Олссон Дж, Даллнер Г.: Метаболизм и функция коэнзима Q.Biochimi Biophys Acta 1660: 171-199 (2004).
57. Вебер C, Bysted A, Holmer G: содержание коэнзима Q ₁₀ в средней датской диете. Internat J Vit Nutr Res 67: 123-129 (1997).
58. Wolters M, Hahn A: Статус убихинона в плазме и реакция на шестимесячный прием добавок в сочетании с поливитаминами у здоровых пожилых женщин — результаты рандомизированного двойного слепого плацебо-контролируемого исследования.Int J Vitam Res 73: 207-214 (2003).

Автор Контакты

И.П. Hargreaves

Нейрометаболическое отделение

Национальная больница неврологии и нейрохирургии

Queen Square, London WC1N 3BG (UK)

Электронная почта [email protected]

Подробности статьи / публикации

Предварительный просмотр первой страницы

Опубликовано онлайн: 17 мая 2014 г.
Дата выпуска: июль 2014 г.

Количество страниц для печати: 9
Количество рисунков: 2
Количество столов: 2

ISSN: 1661-8769 (печатный)
eISSN: 1661-8777 (онлайн)

Для дополнительной информации: https: // www.karger.com/MSY

Авторские права / Дозировка препарата / Заявление об ограничении ответственности

Авторские права: Все права защищены. Никакая часть данной публикации не может быть переведена на другие языки, воспроизведена или использована в любой форме и любыми средствами, электронными или механическими, включая фотокопирование, запись, микрокопирование, или какой-либо системой хранения и поиска информации, без письменного разрешения издателя. .
Дозировка лекарств: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор и дозировка лекарств, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации.Тем не менее, ввиду продолжающихся исследований, изменений в правительственных постановлениях и постоянного потока информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на них, читателю рекомендуется проверять листок-вкладыш для каждого препарата на предмет любых изменений показаний и дозировки, а также дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендованным агентом является новое и / или редко применяемое лекарство.
Отказ от ответственности: утверждения, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и соавторам, а не издателям и редакторам.Появление в публикации рекламы и / или ссылок на продукты не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор (-ы) не несут ответственности за любой ущерб, причиненный людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в контенте или рекламе.

уровень мышечного кофермента Q10 при статиновой миопатии | Кардиология | JAMA Neurology

Фон Статиновые препараты (ингибиторы 3-гидрокси-3-метилглутарил-кофермента А-редуктазы) снижают уровень холестерина, ингибируя синтез мевалоната, промежуточного звена в пути биосинтеза холестерина.Использование статинов было связано с множеством жалоб, связанных со скелетными мышцами. Коэнзим Q ₁₀ (CoQ ₁₀ ), компонент дыхательной цепи митохондрий, также синтезируется из мевалоната, и пониженная концентрация CoQ ₁₀ в мышцах может играть роль в патогенезе миопатии, связанной со статинами.

Цели Для измерения концентрации CoQ ₁₀ и активности ферментов дыхательной цепи в образцах мышечной биопсии от 18 пациентов с миопатией, связанной с приемом статинов, и для поиска доказательств апоптоза с помощью теста TUNEL (терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза-опосредованная дезоксуридинтрифосфатная мечение на конце) .

Дизайн Открытое исследование концентрации CoQ ₁₀ в мышцах у пациентов с повышенными концентрациями креатинкиназы в сыворотке крови, получавших стандартную лекарственную терапию статинами.

Настройка Нервно-мышечные центры при 2 академических больницах третичного уровня.

Результаты Структура мышц была в основном нормальной у 14 пациентов и демонстрировала признаки митохондриальной дисфункции и неспецифических миопатических изменений у 2 пациентов.Концентрация CoQ ₁₀ в мышцах статистически не различалась между пациентами и контрольными субъектами, но она была более чем на 2 SD ниже нормального среднего у 3 пациентов и более чем на 1 SD ниже нормы у 7 пациентов. Ни у одного пациента не было положительных результатов TUNEL.

Заключение Эти данные предполагают, что миопатия, связанная с приемом статинов, связана с умеренным снижением концентрации CoQ ₁₀ в мышцах, что не вызывает гистохимических или биохимических свидетельств митохондриальной миопатии или морфологических свидетельств апоптоза у большинства пациентов.

Статиновые препараты (ингибиторы 3-гидрокси-3-метилглутарил-кофермента А-редуктазы) — это широко назначаемые препараты, снижающие уровень холестерина в крови путем ингибирования синтеза мевалоната, важнейшего промежуточного звена в пути холестерина. Лекарственная терапия статинами связана с множеством жалоб со стороны мышц, от миалгии и судорог до непереносимости физических упражнений, слабости и, иногда, острого разрушения мышц с миоглобинурией. ^{1 , 2} Уровни креатинкиназы сыворотки (СК) повышены во всех этих условиях. ² Любопытно, что мышечные симптомы и высокие уровни КФК в сыворотке часто сохраняются даже после отмены статинов. ²

Коэнзим Q ₁₀ (CoQ ₁₀ ), липофильный компонент цепи переноса электронов, переносит электроны от комплексов I и II к комплексу III, а также является антиоксидантом и стабилизатором мембран. Хотя было ясно показано, что аторвастатин снижает концентрацию CoQ ₁₀ в крови у пациентов с гиперхлестеринемией, ³ подобный эффект статиновых препаратов на мышечный CoQ ₁₀ не был задокументирован.Кроме того, исследования на мышечных культурах крыс и человека показали, что статины вызывают апоптоз, но не дефицит CoQ ₁₀ . ⁴ Чтобы изучить возможную корреляцию между миопатией, связанной с приемом статинов, и дефицитом CoQ ₁₀ , мы изучили образцы мышечной биопсии у 18 пациентов с мышечными симптомами, связанными с приемом статинов, или высокими уровнями КФК в сыворотке. Мы коррелировали структуру мышц с концентрацией CoQ ₁₀ , активностью комплекса III дыхательной цепи и доказательствами апоптоза, используя тест TUNEL (мечение ник-концов дезоксиуридинтрифосфата, опосредованное терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой) и иммуногистохимический анализ с антителами против каспазы-3, Bax, и Bcl-2).

Обследовано 18 пациентов с гиперхолестеринемией (8 мужчин, 10 женщин) в возрасте от 31 до 76 лет, получавших статины. Восемь из 18 пациентов имели как слабость, так и миалгию, 4 пациента имели только слабость, 3 пациента имели только миалгию и 5 пациентов сообщили о судорогах (таблица 1). Слабость была скорее проксимальной, чем дистальной, не серьезной (шкала Совета по медицинским исследованиям от 4+ [легкая] до 5– [очень легкая]). Два пациента (пациенты 1 и 4 [Таблица 1]) имели симптомы и перенесли мышечную биопсию из-за постоянно высоких значений CK в сыворотке.Уровни КФК в сыворотке находились в диапазоне от 200 до 1500 Ед / л (нормальный, <195 Ед / л), но у 1 пациента (пациент 10) значения достигли 18 000 МЕ.

Шесть пациентов получали симвастатин; 5, церивастатин; 3, аторвастатин; и 1, розувастатин, в дозах 5 мг / день (1 пациент), 10 мг / день (9 пациентов) или 20 мг / день (5 пациентов). Ни тип статинов, ни дозировка у 3 пациентов не были известны. Электромиография была проведена у 15 пациентов и продемонстрировала миопатические изменения у 6 пациентов, нейропатические изменения у 3 пациентов и нормальные результаты у 6 пациентов (таблица 1).

Морфология и биохимия

Гистохимия мышц и измерения ферментов дыхательной цепи в мышечных экстрактах были выполнены с использованием описанных методик. ^{5 , 6} Иммуногистохимические реакции как для проапоптотических (TUNEL, Bax и каспаза-3), так и для антиапоптотических (Bcl-2) маркеров проводили в серийных поперечных срезах криостата. ⁷ Анализ TUNEL выполняли в соответствии с инструкциями производителя (набор для обнаружения смерти клеток in situ; Roche Applied Science, Мангейм, Германия). Что касается проапоптотических и антиапоптотических маркеров (Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния), анти-Bax представляло собой кроличьи поликлональные антитела, индуцированные против аминоконца человеческого Bax, анти-каспаза-3 представляла собой козьи поликлональные антитела, индуцированные против аминоконца. субъединицы p11 каспазы-3 человека, а анти-Bcl-2 было мышиным моноклональным антителом, полученным путем слияния клеток миеломы с клетками селезенки иммунизированной мыши.В качестве вторичных антител использовали антимышиный IgG. Реакции были разработаны с 3,3′-диаминобензидином с использованием системы амплификации комплекса авидин-биотин и вектора иммунопероксидазы (Vectastain Elite ABC Kit; Vector Laboratories, Burlingame, Calif), как описано ранее. ⁷

Коэнзим Q ₁₀ экстрагировали из мышц (50 мкл мышечного гомогената и 950 мкл ледяного 1-пропанола) путем перемешивания на вортексе в микроцентрифужной пробирке в течение 2 минут; после центрифугирования при 14 000 об / мин в течение 10 минут при 4 ° C 30 мкл прозрачного супернатанта вводили непосредственно в систему высокоэффективной жидкостной хроматографии.Высокоэффективные жидкостные хроматографические анализы были выполнены с использованием изократической системы с обращенной фазой, как описано ранее. ⁸

Мышечная структура была нормальной или имела легкие миопатические изменения у 14 пациентов. У 2 пациентов (пациенты 7 и 8 [Таблица 2]) было несколько некротизированных и вакуолизированных волокон. Только 2 пациента продемонстрировали некоторые доказательства митохондриальной дисфункции: 5 отрицательных по цитохрому c оксидазо-оксидазо-отрицательных рваных красных волокон были замечены в образце биопсии от 61-летнего пациента 10, а 2 отрицательных по цитохрому c оксидаза волокна были обнаружены в биоптате. биоптат пациента 11 63 лет (таблица 2).

Уровни мышечного CoQ ₁₀ у наших пациентов как группы существенно не отличались от таковых в контрольной группе (медианные значения, 29,5 мкг / г у пациентов против 32,0 у 118 контрольных; P > 0,05, Mann-Whitney тест на сумму рангов). Однако концентрация CoQ ₁₀ в мышцах была ниже 2 SD от нормального среднего у 3 пациентов и ниже 1 SD у 7 пациентов (10 [56%] из 18 пациентов). У остальных 8 пациентов концентрация мышечного CoQ ₁₀ была нормальной (± 1 SD от среднего) у 4 пациентов и увеличилась (> 2 SD) у 4 пациентов (рисунок).Не было четкой корреляции между структурой мышц и концентрацией CoQ ₁₀ , но у 2 пациентов (пациенты 10 и 11) с несколькими рваными красными волокнами или цитохром c оксидазно-отрицательные волокна были уровни CoQ ₁₀ на уровне 1 или ниже. SD среднего. У одного из 2 (пациент 10) также был самый высокий уровень КФК в сыворотке. Активность Комплекса III была нормальной у всех пациентов.

Тест TUNEL и иммуногистохимические исследования с антителами против Bax, Bcl-2 и каспазы-3 были выполнены у 11 пациентов, у которых было достаточно ткани; все эти тесты дали отрицательные результаты у всех 11 пациентов.

В развитых странах статины являются одними из наиболее часто назначаемых лекарств, используемых для снижения уровня холестерина в крови и предотвращения сердечно-сосудистых заболеваний и инсульта. Обычно они хорошо переносятся и безопасны, но менее чем у 1% пациентов они вызывают мышечные проблемы, обычно связанные с физической нагрузкой миалгию и судороги, реже фиксированную слабость и иногда острое мышечное расстройство (рабдомиолиз) и миоглобинурию. ² По всей видимости, частота миопатии при приеме различных статиновых препаратов схожа.

Патогенез миопатии, связанной с приемом статинов, неизвестен. ^{9 , 10} Привлекательная гипотеза состоит в том, что мышечные симптомы могут быть вызваны частичным дефектом CoQ ₁₀ , потому что CoQ ₁₀ и холестерин имеют общий путь биосинтеза, который ингибируется статинами. Эта концепция подтверждается данными, полученными в образцах крови пациентов с гиперхолестеринемией, у которых концентрация CoQ ₁₀ снизилась до 50% от исходных значений после 30 дней лечения аторвастатином, ³ , хотя дозировка статина (80 мг / сут) был значительно выше, чем у наших пациентов (5-20 мг / сут).Косвенная поддержка этой гипотезы основана на знании того, что тяжелый и предположительно первичный дефицит CoQ ₁₀ в мышцах вызывает митохондриальные миопатические изменения с непереносимостью физических упражнений и рецидивирующей миоглобинурией. ^{11 -15} Менее тяжелый мышечный дефицит CoQ ₁₀ связан с синдромом, в котором преобладает мозжечковая атаксия, но часто сопровождается мышечной слабостью. ^{16 -18} У пациентов с атаксическим дефицитом CoQ ₁₀ мышечная ткань при биопсии обычно нормальная или неспецифическая миопатия, а активность комплекса III дыхательной цепи непостоянно снижена.

Чтобы пролить свет на роль CoQ ₁₀ в патогенезе миопатии, связанной с приемом статинов, мы изучили образцы мышечной биопсии 18 пациентов, получавших стандартные дозы статиновых препаратов для лечения гиперхолестеринемии, с сообщениями о мышечной боли, судорогах и слабости. (16 пациентов) или с повышенным уровнем сывороточных КФК при отсутствии симптомов (2 пациента). Мы обнаружили снижение концентрации CoQ ₁₀ в мышцах у 10 пациентов (56%), но снижение было незначительным (<1 SD от нормального среднего) у 7 пациентов (70%) и тяжелым (<2 SD) только у 3 пациентов ( 30%).Ни у одного из 3 пациентов (пациенты 3, 16 и 17) с самыми низкими концентрациями CoQ ₁₀ не было аномальной мышечной структуры или биохимических изменений. Напротив, у 2 пациентов (пациенты 10 и 11) с некоторыми морфологическими признаками митохондриальной дисфункции наблюдалось лишь умеренное снижение концентрации мышечного CoQ ₁₀ . Кроме того, оба пациента были старше 60 лет, что повышает вероятность того, что несколько рваных красных волокон и цитохром c -отрицательных волокон в их биоптатах могли быть связаны со старением, а не с дефицитом CoQ ₁₀ .Повышение мышечной концентрации CoQ ₁₀ у 4 пациентов (пациенты 6, 7, 8 и 14) трудно объяснить, если только эти пациенты не принимали витаминные добавки, содержащие CoQ ₁₀ , возможность, которую мы не могли исключить с уверенностью.

Поскольку образцы биопсии мышц от 2 молодых братьев с миопатическим дефицитом CoQ ₁₀ показали витиеватый апоптоз, ¹³ , а исследования на мышечных культурах крыс и людей, подвергшихся воздействию статинов, также показали активацию путей апоптоза (без CoQ ₁₀ дефицит), ⁴ мы искали доказательства апоптоза у наших пациентов, но не нашли.

Таким образом, наши данные предполагают, что статины могут снижать концентрацию CoQ ₁₀ в мышцах в умеренной степени у некоторых пациентов. Хотя эти данные не подтверждают патогенную роль дефицита CoQ ₁₀ в миопатии, связанной с приемом статинов, может быть разумным рекомендовать пациентам с миопатией, связанной с приемом статинов, принимать пероральные добавки CoQ ₁₀ .

Для корреспонденции: Salvatore DiMauro, MD, 4-420 Колледж врачей и хирургов, 630 W 168th St, New York, NY 10032 (sd12 @ columbia.edu).

Принята к публикации : 23 июня 2005 г.

Вклад авторов: Концепция и дизайн исследования : Прелле, Брезолин, Могжио, Кауфманн и ДиМауро. Сбор данных : Ламперти, Наини и Луккини. Анализ и интерпретация данных : Ламперти, Наини, Шакко, Кауфманн и ДиМауро. Составление рукописи : Ламперти и Наини. Критический пересмотр рукописи на предмет важного интеллектуального содержания : Луккини, Прелле, Моджио и Шакко. Статистический анализ : Ламперти, Наини и Кауфманн. Получено финансирование : Ламперти и ДиМауро. Административная, техническая и материальная поддержка : Lucchini и DiMauro. Надзор за работой : Прелле, Брезолин и Могжио.

Финансирование / поддержка: Это исследование было поддержано Ассоциацией Amici del Centro Dino Ferrari, Миланский университет, Милан, Италия; проект телемарафона QLTR − 2001−02769; гранты NS11766 и HD32062 от Национальных институтов здравоохранения, Бетесда, Мэриленд; грант Ассоциации мышечной дистрофии, Тусон, Аризона; и Фонд клинических исследований митохондриальных заболеваний Marriott (MMDCRF), Chevy Chase, Md.

Благодарность: «Criobanca Automatizzata di Materiale Biologico» выражает благодарность за предоставление замороженных образцов биопсии мышц.

Контроли плазмы с коэнзимом Q10

Магазин не будет работать корректно, если куки отключены.

Похоже, в вашем браузере отключен JavaScript. Для наилучшего взаимодействия с нашим сайтом обязательно включите Javascript в своем браузере.

Номер заказа: 0091/0092/0093

Контроли плазмы с коэнзимом Q10, лиофилизированные

0091 Coenzyme Q10 Plasma Control, Bi-Level I + II (лиоф.), 2 x 5 x 2 мл
0092 Coenzyme Q10 Plasma Control, уровень I (лиоф.), 5 x 2 мл
0093 Coenzyme Q10 Plasma Control, Level II (лиоф.), 5 x 2 мл

Эти лиофилизированные средства контроля качества от Chromsystems основаны на человеческой плазме и должны использоваться в соответствии с инструкцией по эксплуатации. Они предназначены для контроля точности и точности аналитических процедур в клинической диагностике для количественного определения коэнзима Q10 (убихинона) в сыворотке / плазме / цельной крови. Следуя инструкциям, с контрольными образцами следует обращаться и измерять их так же, как и с образцом пациента.