Функциональные петли: Тренировочные петли. Купить функциональные петли по самой низкой цене

Что такое функциональные петли TRX и зачем они нужны?

Существует огромное количество преспособлений, который используются для современных фитнес-тренировок.

Например, это специальный мяч фитбол или оригинальные по внешнему виду ботинку кангу джамп. Но есть и еще один инструмент, без которого не обойтись , если вы хотите достичь хорошего уровня в фитнесе и укрепить свое здоровье.

Речь идет о петлях ТРХ.

Что это такое и зачем они нужны? В этой статье мы постараемся максимально подробно ответить на эти вопросы.

Что такое петли ТРХ?

ТРХ – это петли для функционального тренинга. Если говорить предметно, то это специальные прочные нейлоновые стропы, которые оснащены механизмом для регулировки длины. У них есть ручки для ладоней, как правило, круглой формы и петли для ног.

Как видите, этот фитнес инструмент достаточно простой по своей конструкции, но не смотря на это он очень полезен. Кроме того, с ним можно делать огромное количество упражнений.

Но об этом важно сказать немного подробнее.

Для чего нужны петли TRX и что с ними можно делать?

Занятия на тренажере TRX подходят для людей с любым уровнем физической подготовки. Такие занятия можно проводить как самостоятельно дома, так и в зале под руководством тренера.

Упражнения с петлями ТРХ эффективно способствуют развитию:

• силы
• выносливости
• гибкости
• равновесия

Петли для функционального тренинга способствуют развитию всех мышц, объединяя в единое целое стабильность, подвижность, силу и гибкость. Все эти качества нужны нам всем в повседневной жизни.

Основной аспект тренировок с петлями ТРХ – это упор на гармоничное и эффективное развитие мышц корпуса. Тренировка с собственным весом исключает осевую нагрузку на позвоночник. Поэтому такие занятия можно назвать абсолютно безопасными.

Правильная регулировка ремней позволяет заниматься с нужным уровнем нагрузки, которая корректируется разным коэффициентом стабилизации. Это позволяет получать любую желаемую интенсивность тренировки, подходящую как новичкам, так и людям с более высоким уровнем физической подготовки.

Упражнения с TRX позволят вам по-новому взглянуть на возможности своего организма и изменят ваш взгляд на привычные функциональные тренировки.

Функциональные петли TRX PRO P3 | Санкт-Петербург

Тренажер TRX PRO P3  это профессиональная модель третьего поколения.

Достигайте  впечатляющих результатов в любом месте, в любое время c TRX PRO P3.
Профессиональный тренажер TRX PRO P3 оснащен страховочной петлей, что позволяет петлям TRX не проскальзывать и выполнять упражнения используя только одну руку, ногу или когда тренажер TRX находится за спиной.

Усиленный карабин с ключем шестигранником
Тренажер TRX PRO P3 оснащен усиленным карабином, что исключает возможность его разгиба. С этим карабином Вы точно будете уверены в своей безопасности. Карабин данной модели рассчитан на нагрузку до 300кг., так же он устойчив к коррозии. В комплекте  тренажера TRX PRO P3 так же имеется ключ шестигранник для фиксации карабина. Это самый надежный карабин из всей серии тренажеров TRX.

Прорезиненные рукояти 
Рукоятки тренажера TRX PRO P3 выполнены из износостойкой гипоаллергенной  резины и имеют текстурный рисунок, что позволяет НЕ проскальзывать рукояткам, увеличивает сцепление и безопасность во время тренировок. Так же они более долговечные, легко моются и не впитывают пот и влагу. Благодаря этому Вы можете проводить тренировку с TRX в любых условиях. Снег, дождь, парящее солнце теперь Вам не помеха! 

Крепление на дверь
Для использования тренажера TRX нет необходимости в сложных конструкциях, Вы можете проводить тренировку с TRX дома, в офисе, гостинице и любом удобном для Вас месте! TRX Door Anchor, позволяет закрепить петли TRX в дверном проеме и надежно зафиксировать их, просто закрыв дверь. Крепление TRX очень легко устанавливается и так же легко снимается. После этого любая комната превратится в функциональный зал для Вашей тренировки c TRX. 

Регулировка по длине 
Регулировка по длине позволит Вам в независимости от вашего роста настроить тренажер TRX под Ваши индивидуальные параметры. В тренажере TRX PRO P3 изменён механизм регулировки длины строп, теперь изменение длины строп стало более быстрым, удобным и безопасным. 

Удлинитель TRX Xtender
TRX Xtender позволяет увеличить длину тренажера и надежно закрепить его практически на любой высоте. Удлинитель отлично подходит для высоких потолков, баскетбольных колец, деревьев, турников и так далее. Длина удлинителя — 1 метр.

 
Анкерное крепление — (удлинитель с карабином) 
Анкерное крепление тренажера TRX PRO P3 позволит Вам закрепить тренажер на турник, дерево, столб, практически на любую поверхность. Длина — 1 метр. 

Фирменная сумка TRX
Компактная и удобная сумка, позволит Вам всегда иметь под рукой тренажер TRX, в командировке, на прогулке или на отдыхе. 

Руководство по использованию
В комплекте TRX PRO P3 Вы найдете краткое руководство по использованию которое включает в себя базовые тренировки и технику безопасности. 

Браслет TRX 
В тренажер TRX PRO P3 так же входит фирменный браслет TRX, которой может служить, как напоминание о необходимости тренировки. 

Табличка на дверь  

Позволяет безопасно проводить тренировку TRX петлями и предотвратить внезапное открытие двери и срыва тренажера.  

DVD диск c видео упражнениями на петляхTRX 

ПОДАРОК! К данному комплекту в рамках акции идет специальный 2 часовой dvd диск с описанием и подробными комментариями на русском языке!
В нем Вы найдете более 170 упражнений с петлями TRX и полным разъяснением их выполнения.

 

Функциональные петли с роликами Aerobis aeroSling Elite Set Basic

Функциональные петли с роликами Aerobis aeroSling Elite Set Basic

 — Революция в подвесном тренинге!

aeroSling — бренд компании Aerobis — предназначен для эффективных и инновационных тренировок со стропами на подвижном блоке, разработан в Германии. Тренировки со стропами aeroSling^® (также известные как подвесной тренинг) помогают вам увеличить силу, повысить силовую выносливости и мышечную координацию. Вам больше не нужны тренажеры или скамьи с бесчисленными гантелями!

AeroSling^® ELITE Set BASIC — это набор тренировочных строп, содержащий все необходимые принадлежности для новичков или для человека, переходящего на aeroSling^® с других программ подвесного тренинга. AeroSling^®

 ELITE Set BASIC дает вам основу для подвесного тренинга.

Ваш новый партнер по тренировкам!

Вы больше не захотите выходить из дома без него. AeroSling^® ELITE — расширенная тренировочная платформа, предназначенная для спортивных тренировок всего тела. AeroSling^® ELITE позволяет выполнять сотни различных упражнений для тренировки мышечной силы и координации. В любое время и в любом месте!

Идеально подходит для функционального тренинга дома.

AeroSling^® ELITE Set BASIC поставляется вместе с компактным и чрезвычайно прочным креплением aeroSling^® T-Mount. Крепление AeroSling^® T-Mount полностью изготовлен из нержавеющей стали и хорошо смотрится стене или потолке, не привлекая излишнего внимания и не занимая много места. Вы можете повесить aeroSling

® ELITE с якорным карабином непосредственно на крепление aeroSling^® T-Mount или вы можете пропустить стропу aeroSling^® через одну из петель, чтобы лучше зафиксировать стропы для высоких точек монтажа.

Еще больше вариантов тренировок.

Рукоятка aeroSling® Flex Handle идеально подходит для фиксации ног, предплечий и, конечно, рук во время тренировки. AeroSling® Flex Handle предназначена для всех вариантов тренировок, т. е. рукоятка может быть закреплена на одном или двух карабинах aeroSling®.

Характеристики

Изготовитель — AEROBIS

Вес  — 1, 92 кг

Максимальная нагрузка статическая — 720 кг

Максимальная нагрузка во время тренировки  — 120 кг

Комплектация — крепление к двери, гибкие рукоятки (2 шт.), крепление к стене, доступ к онлайн-DVD

Функциональные петли TRX Спорткомплекса SKV

Петли TRX (Total Body Resistance Exercise) . Упражнения на TRX лежат в основе программы TRX Suspension Training – эффективной методики функционального тренинга с использованием собственного веса для проработки мышц всего тела. Занятия на тренажере TRX подходят для людей с любым уровнем физической подготовки и эффективно способствуют развитию силы, выносливости и равновесия. Петли для функционального тренинга способствуют развитию всех мышц, объединяя в единое целое стабильность, подвижность, силу и гибкость – то, что нужно нам всем в повседневной жизни. Основной аспект этих тренировок – упор на гармоничное и эффективное развитие мышц-стабилизаторов. Тренировка с собственным весом исключает осевую нагрузку на позвоночник, именно поэтому тренажер TRX станет незаменимым и для подростков. Тренажер TRX Suspension Professional Trainer состоит из нейлоновых ремней, создающих сопротивление с помощью двух источников: веса вашего тела и силы гравитации. Любой компонент оригинального функционального тренажера TRX гарантированно выдерживает нагрузку до 160 кг. Правильная регулировка ремней позволит вам заниматься с нужным уровнем нагрузки (от 5 до 100% своего веса), которая корректируется разным коэффициентом стабилизации и позволяет получать любую желаемую интенсивность тренировки, подходящую как новичкам, так и людям в идеальной спортивной форме.

Тренировочные петли TRX это:
— портативность и компактность, простота в установке;
— возможность использовать где угодно, как в помещении, так и на открытом воздухе;
— высокая надежность: несущий карабин выдерживает нагрузку до 180 кг;

Преимущества функциональных тренировок с TRX
— высокая эффективность любых типов тренировок: кардио и силовых, групповых и индивидуальных, на мышцы-стабилизаторы и растягивания, специализированных для разнообразных видов спорта и так далее;
— в любом упражнении тренируются мышцы-стабилизаторы и используется все тело, что делает такие тренировки по-настоящему функциональными;
— свобода тренировок с использованием любых направлений – исключаются ограничения стандартных силовых тренировок, в которых как правило доминирует сагиттальная плоскость;

Огромное преимущество TRX тренажера — безопасность его использования. В упражнениях максимальная нагрузка ограничена собственным весом человека, к тому же эта нагрузка не локализируется на одном месте и распределяется по всему телу. Также на позвоночник отсутствует осевая нагрузка. Благодаря этому, вероятность получения травм во время тренировок снижается. TRX, прежде всего, — прекрасный инструмент для эффективного метаболического тренинга. Гибкая конструкция петель превращает самые простые отжимания в сложнейшее комбинационное упражнение, задействует массу мышечных групп одновременно. Благодаря этому, а также из-за повышенной координационной сложности большинства упражнений, тренинг на TRX способствует более активному расходу энергии во время занятия, а также созданию высокого уровня метаболического отклика, который позволит тратить калории спустя многие часы после окончания тренировки.

Оставьте свои данные и вопрос — и наш менеджер свяжется с вами в ближайшее время

Диана спорт — товары для спорта и отдыха

Функциональные петли aeroSling XPE — это новое поколение оборудования для подвесного тренинга. С ним Вы сократите время тренировки и улучшите результаты, одновременно работая над силой и мышечной координацией.

AeroSling XPE демонстрирует то же высокое качество, как и другие модели aeroSling, однако, эта модель доступна по более низкой цене. Это стало возможным благодаря фокусировке при его разработке на основных ключевых функциях aeroSling. AeroSling XPE идеально подходит для тех, кто много путешествует — он компактен и удобен для транспортировки.

Рукоятки aeroSling XPE отличаются от рукояток aeroSling® ELITE — они не оснащены карабинами, позволяющими уменьшит размер aeroSling® XPE.

Подвесной тренинг с подвижным блоком — революция в тренировках cо стропами.

Выполнение упражнений на стропах с подвижным блоком — это больше, чем просто захватывающий опыт. Подвижный блок позволяет выполнять множество новых упражнений. Все модели aeroSling® оснащены подвижным блоком, что позволяет свободно осуществлять движения во всех направлениях. Нестабильность, обеспечиваемая подвижным блоком, повышает сложность упражнений, одновременно влияя на силу и мышечную координацию. Вы быстро заметите увеличение силы в повседневной жизни. Совершенно естественные и плавные движения обеспечивает возможность регулировки подвижного блока согласно вашим индивидуальным потребностям. Таким образом, элемент неустойчивости может быть снижен, чтобы упростить выполнение новых упражнений.

Простая система регулировок и готовность к экстремальным нагрузкам.

AeroSling® XPE является «младшим братом» модели aeroSling ELITE и был разработан специально для новичков или пользователей, переходящих от других систем подвесного тренинга к aeroSling.

Рукоятки, используемые для aeroSling XPE, сделаны из текстурированного стеклоармированного пластика (GRP) для того, чтобы уменьшить вес и повысить износостойкость. Высота рукояток может быть изменена в течение нескольких секунд благодаря запатентованному регулировочному узлу.

Проводите тренировки где угодно — в помещении или на открытом воздухе.

Благодаря съемному интегрированному дверному креплению вы сможете проводить тренировки почти повсюду. Конечно, мы рекомендуем вам фиксировать крепление вокруг стабильного неподвижного объекта или использовать карабин. Тем не менее иногда дверь бывает единственным вариантом для крепления. Убедитесь, что дверь является достаточно стабильной, и закрепите aeroSling XPE с использованием дверного крепления. Можете начинать персональную тренировку с aeroSling XPE!

Преимущества

• AeroSling XPE идеально подходит для тех, кто много путешествует — он компактен и удобен для транспортировки
• Использование технологий, аналогичных стандартам альпинистского снаряжения, делает этот тренажер невероятно надежным и безопасным
• Уровень нестабильности легко регулируется, что делает AeroSling XPE доступным для пользователей с любым уровнем подготовки
• Рукоятки изготовлены из текстурированного стеклоармированного пластика (GRP) – это позволило уменьшить вес и повысить износостойкость
• Запатентованный регулировочный узел позволяет легко и быстро изменять высоту петель
• Благодаря съемному дверному креплению Вы не будете ограничены в выборе места тренировок

Также рекомендуем ознакомиться с обзорами петель aeroSling на нашем YouTube-канале:

    

Распродажа петель 2021, все ведущие бренды (спросите о бесплатных образцах)

Одна из самых важных частей вашего шкафа

Без петель ни один кухонный шкаф не может быть полноценным. И независимо от того, выберете ли вы декоративные петли, дополняющие остальную кухонную фурнитуру, или петли, которые скрыты внутри шкафа, вы должны знать, что ваши шкафы будут функционировать так, как они были задуманы. Вот почему у нас есть такой широкий выбор типов и стилей петель.От самозакрывающихся петель, предотвращающих захлопывание, до съемных петель, которые позволяют легко снимать двери для чистки, — у нас есть петли разных стилей, которые вам нужны.

Отделка и внешний вид или функция и стиль

Петли шкафа часто упускаются из виду большинством домовладельцев. Однако при наличии множества вариантов отделки, стиля и функций они не нужны.

Когда придет время покупать петли, выберите те, которые лучше всего дополнят ваш шкаф.Петли для вашего нового шкафа, от ремешка и петель H-образной формы на дверной доске и дверях в стиле кантри до скрытых петель на защелках на современных кухнях, должны органично вписаться в остальной дизайн.

Покупайте петли в первую очередь по стилю; выберите из H-образных петель, петель с полным или частичным обертыванием, петель для торцевого и скрытого монтажа, съемных петель, стыковых петель и петель для ремешка. Выбрав свой стиль, переходите к функциям глубже. Ищите такие функции, как самозакрывающиеся петли, петли с защелками и петли с защитой от захлопывания, чтобы улучшить работу ваших шкафов.Наконец, посмотрите на отделку ваших петель. Совместите поверхностные, заподлицо, торцевое крепление, H и петли для ремешка с ручками и ручками шкафа, чтобы получить наиболее цельный дизайн корпуса. И то, что скрытые петли не видны, не означает, что их отделка тоже не имеет значения. Совместите эту отделку с остальным металлом на кухне, будь то ваша техника, раковина, кран или ручки, чтобы ничто не столкнулось при открытии шкафов.

Если петли вашего шкафа не работают должным образом, ваши шкафы не будут использоваться так, как вам нужно.Дайте им то внимание, которого они заслуживают, и выберите петли, которые наилучшим образом соответствуют вашим шкафам, потребностям и дизайну, чтобы безупречно вписаться в вашу кухню.

Типы петель и материалы для петель

Примеры петель

Изображение предоставлено: Parilov / Shutterstock.com

Петли — это простые механические подшипниковые устройства, которые используются для соединения двух частей и позволяют им вращаться относительно друг друга вокруг фиксированной оси. В зависимости от используемого типа компоненты могут перемещаться (чаще всего) в пределах ограниченной дуги или со свободой 360 °.

Эти устройства используются для различных целей, включая двери, ворота, оконные ставни, крышки и т. Д. Для удовлетворения различных требований этих приложений доступны петли с широким спектром технических характеристик продукта, например, для декоративного или функционального назначения. , внешнее и внутреннее размещение, способ монтажа, полный или половинный врезной монтаж, ограниченное пространство, грузоподъемность и т. д. На основе этих конструктивных характеристик доступно множество различных типов и стилей петель.

Петли для бочек

Изображение предоставлено: MZinchenko / Shutterstock.com

Петли для бочек состоят из двух бочкообразных компонентов, соединенных шарниром. Как правило, эти типы петель используются для скрытого крепления в шкафах и мебели.

Петли стыковые

Изображение предоставлено: InkheartX / Shutterstock.com

Один из наиболее часто используемых типов петель, стыковые петли (также известные как врезные петли) состоят из двух пластин — i.е., листы — с соединяющимися друг с другом наборами петель, то есть суставов пальцев, скрепленных вместе центральным направляющим штифтом или стержнем для образования гибкого соединения. Обычно используемые парами или множеством, размещенными с интервалами вдоль внутренней части соединения, эти типы петель используются для множества применений, включая прикрепление дверей, окон, панелей и крышек к их соответствующим рамам, так что в закрытом состоянии два компоненты установлены заподлицо друг с другом.

Петли-бабочки и футляры

Изображение предоставлено: paha1205 / Shutterstock.ком

Подобно стыковым петлям, петли-бабочки и петли корпуса сконструированы с учетом функционального и декоративного дизайна. Более изысканный дизайн этих типов петель делает их подходящими для внешнего размещения, например, на шкатулках для драгоценностей и портфелях.

Петли сплошные

Изображение предоставлено: VDB Photos / Shutterstock.com

Также известные как петли для фортепиано, неразрезные петли состоят из компонентов, аналогичных компонентам стыковых петель.Однако они длиннее и уже, и, как правило, один проходит по всей внутренней длине соединения, образованного между двумя прикрепленными объектами, такими как столы, сундуки, душевые и, как показано на изображении выше, пианино.

Европейские петли

Изображение предоставлено: romchik911 / Shutterstock.com

Европейские петли

обычно используются как в безрамных, так и в лицевых шкафах, поскольку они расположены внутри и позволяют полностью скрыть аппаратный компонент, когда дверь закрыта.Эти типы петель предлагают множество функций (например, мягкое и бесшумное закрывание) и подходят для широкого диапазона стилей дверей, от плоских врезных до угловых. Эти петли также позволяют регулировать положение дверцы шкафа относительно рамы шкафа с помощью набора регулировочных винтов, расположенных на каждой петле.

Петли для флажков

Изображение предоставлено: Jefco Manufacturing Inc.

Петли для флажков имеют фиксированный штифт, вставленный в один из прямоугольных элементов створки.Конструкция этих типов петель позволяет вращать их на 360 °, а также легко разбирать их при необходимости.

Петли заподлицо

Изображение предоставлено: Suncor Stainless, Inc.

Как следует из названия, скрытые петли спроектированы так, чтобы плотно прилегать друг к другу, чтобы занимать меньше места; это достигается без выемки, вставляя одну створку внутрь другой. Как правило, эти типы петель используются для более легких приложений.

Петли с четырьмя стержнями

Изображение предоставлено: Ади Чи / Shutterstock.com

Петли с четырьмя стержнями, также называемые петлями с несколькими стержнями, состоят из нескольких стержней, которые позволяют прикрепленному компоненту перемещаться наружу, когда он открывается, чтобы избежать удара о край рамы. Эти типы петель подходят для створчатых, выступающих и параллельно открывающихся окон и панелей.

Петли с крючком и проушиной

Петли с крючком и проушиной состоят из L-образного крючка и петли или винта в форме глаза.Эти типы петель обычно используются для наружных работ, например, ворот.

Петли шарнирные

Изображение предоставлено: Moore Industrial Hardware

В основном используется для дверей, поворотных петель или поворота вокруг одной точки поворота. В отличие от большинства петель (например, стыковых петель), эти типы петель обычно размещаются на расстоянии от края рамы над и под дверью, а не по бокам рамы, что позволяет скрыть оборудование и, в некоторых случаях дверь перемещается в обе стороны.

Пружинные петли

Изображение предоставлено: Moore Industrial Hardware

Пружинные петли

разработаны со встроенным пружинным компонентом, что делает их пригодными для приложений, требующих, чтобы дверь, крышка или панель находились в открытом или закрытом положении. Пружинные петли двойного действия используются во внутренних помещениях, поскольку их конструкция позволяет перемещаться в обоих направлениях.

Петли для ремня

Изображение предоставлено: Suncor Stainless, Inc.

Петли с ремешком — это более короткие петли с более длинными створками, которые используются для поддержки дверей, ворот и других панелей. Эти типы петель, используемые парами или несколькими, обычно не предназначены для скрытия при использовании и часто доступны с учетом как функции, так и украшения.

Материалы и отделка петель

Петли должны выдерживать нагрузку при постоянном открытии и закрытии в зависимости от области применения, в которой они применяются.Чтобы выполнить это требование, многие петли изготовлены из нержавеющей стали, поскольку прочность стальных материалов позволяет оборудованию выдерживать тяжелые компоненты, а характеристики нержавеющей стали предотвращают ржавчину и коррозию. Последнее важно, потому что петли, используемые для наружных работ, особенно вблизи океана или соленых озер, могут быстрее уставать и выходить из строя из-за воздействия влаги и соли в окружающей среде.

Нержавеющая сталь, однако, не всегда поддается отделке.В результате для скрытых петель чаще используется нержавеющая сталь, тогда как петли из латуни, бронзы, а также петли с латунным и бронзовым покрытием более распространены для более заметного размещения. Латунь и бронза — оба сплава на основе меди — являются прочными металлами, которые могут противостоять экстремальным погодным условиям, включая дождь, соленый воздух, смог, и могут образовывать более толстые петли, чем нержавеющая сталь. В то время как латунь требует дополнительной обработки поверхности, чтобы выдерживать воздействие соленой воды, бронза по своей природе устойчива к атмосферным воздействиям и подходит для использования в морских приложениях.Оба материала также хорошо поддаются отделке, поэтому на них можно наносить широкий спектр цветов, чтобы дополнить множество различных слоев краски. Эти варианты отделки включают:

• Медь: Изготавливает основной металл из твердых сплавов бронзы и латуни, а также материалы, используемые для покрытия бронзы и латуни
• Цинкование: Процесс электрохимической обработки, при котором сталь покрывается для защиты от ржавчины
• Japanning: Европейская техника отделки, 17 ^th Азиатское тиснение лаком
• Воронение: Процесс пассивации, придающий стальному материалу голубоватый оттенок

Выбор подходящего материала

Атмосферостойкость и эстетическая привлекательность — не единственные важные факторы при выборе материала для петли. При принятии осознанного решения важно учитывать стоимость.Уравновешивание требований к окружающей среде и конструкции петли со стоимостью может привести к использованию различных типов материалов.

Например, если атмосферостойкость не является решающей для конструкции петли (например, для использования во внутренней среде), сталь с покрытием является более дешевой альтернативой по сравнению с латунью, которая по-прежнему имеет некоторую эстетическую ценность и способна выдерживать нагрузки, связанные с прикреплением. Однако, если прикрепленный компонент будет находиться в прямом контакте с внешней средой, дополнительные расходы на латунь могут окупить вложения для большей устойчивости к атмосферным воздействиям и долговечности.

Обращение за помощью к производителю петель или даже в местный магазин бытовой техники может помочь в принятии окончательного решения.

Сводка

Это руководство дает общее представление о петлях, включая доступные типы, а также некоторые соображения по материалам и отделке.

Для получения дополнительной информации о сопутствующих продуктах обратитесь к другим руководствам Thomas или посетите платформу Thomas Supplier Discovery Platform, где вы найдете информацию о более чем 500 000 коммерческих и промышленных поставщиков.

Источники

1. https://bonito.in/2014/various-types-of-hinges-and-where-to-use-them/
2. https://kitchencabinetkings.com/glossary/butt-hinge/
3. https://www.builder-questions.com/construction-glossary/barrel-hinge/
4. https://www.4feldco.com/articles/door-hinge-types/
5. http://www.woodworkbasics.com/hinges.html
6. https://kitchencabinetkings.com/glossary/pivot-hinge/
7. https://www.dwmmag.com/aama-releases-volvention-specification-for-multi-bar-hinges-in-window-applications/

Петли прочие изделия

Прочие «виды» статей

Больше из оборудования

Функциональное оборудование

— (2 шт. В упаковке) Компактные петли с накладкой 1/2 «из полированного никеля

Описание продукта

Монтажное оборудование и инструкции по установке включены

Гарантия: ограниченная пожизненная

Технические характеристики

Арт. №

.

KAW-360123

Модель №

KFHCN012-A-2

UPC №

843512067617

Марка:

Kasaware

Коллекция:

Kasaware — Функциональное оборудование

Категория:

Фурнитура для шкафа

Подкатегория:

Петли для шкафов

Цвет:

Никель

Функции:

Ценностная массовая упаковка

Специальная отделка:

Никель полированный

Бесплатная доставка:

Есть

Сделано в:

Китай

Базовый материал:

Сталь

Нет комиссии за пополнение запасов:

Есть

Тема:

Переходный

Масса:

0.65 фунтов (294,84 г)

Другие номера деталей:

групповая упаковка

жителей Калифорнии:

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ

см. информацию о предложении 65

Каталожные номера поставщика:

Текущий: KFHCN012-A-2

KFHCN012-A-10 KFHCN114-A-10 KFHCN114-A-2 показать все

18 различных типов петель для шкафов

Нужна петля для шкафа? Решить, какой тип получить, не так-то просто.Узнайте о 18 различных типах петель для шкафов здесь. Все виды, формы, размеры, особенности и особенно разные типы для различных типов шкафов и потребностей безопасности.

A. Руководство по покупке петель шкафа

Шкафы на кухне, в прачечной или ванной могут служить разным целям, поэтому важно подобрать петли, подходящие для работы.

Вы можете подумать, что стиль — самый важный фактор при выборе петли.Хотя это важная часть поиска наилучших петель для ваших шкафов, не менее важно найти правильный тип петли для работы.

Петли для шкафов бывают разных отделок, типов и имеют несколько различных функций, которые заставляют их работать немного по-разному.

Связанные: Петли 15 видов

B. Характеристики петель шкафа

Характеристики петель для шкафов отражают способ их использования. Некоторые предназначены исключительно для декоративных целей, в то время как другие помогают закрывать двери шкафа определенным образом.

1. Декоративный

Источник: Amazon

Термин «декоративные» применительно к петлям может означать одно из двух:

1. Петля должна быть функциональной и декоративной. Он прикрепляется к двери и действует как петля, но имеет декоративную поверхность, которая видна снаружи дверцы шкафа.
2. Петля предназначена больше для декоративных, чем для функциональных целей. В этом случае настоящая петля может быть на внутренней части двери, а декоративная петля — снаружи, чтобы добавить больше деталей шкафам.

Петли последнего типа иногда называют искусственными. Некоторые люди используют их, когда им нужен особый вид, но при этом они хотели бы, чтобы двери их шкафов были самозакрывающимися или плавно закрывающимися, и не могут найти декоративную петлю, которая бы соответствовала их функциональным и эстетическим предпочтениям.

Нефункциональные декоративные петли также могут пригодиться для искусственных шкафов, которые выглядят на месте, но не работают, потому что не открываются.

2. Разборный

Источник: Amazon

Съемные петли позволяют снять дверцы шкафа, к которым они прикреплены, чтобы вы могли их починить или почистить.В частности, на ваших кухонных шкафах могут быть установлены съемные петли, потому что вы можете снимать их, не снимая никакого оборудования, чтобы быстро протереть их, чтобы убрать брызги жира и другие беспорядки. Эти петли бывают как одинарные, так и двойные съемные.

На каркас шкафа можно установить одиночные съемные петли, при этом другой конец вставляется в прорезь на двери без каких-либо винтов. Это позволяет при необходимости скользить к двери, не снимая петли.

Двойные съемные петли вставляются в пазы как на двери, так и на раме шкафа и не требуют установки винтов.

3. Сверхмощный

Источник: Amazon

Петли для тяжелых условий эксплуатации — это те типы петель, которые вы обычно чаще видите в промышленных, чем в жилых помещениях. Эти петли могут выдерживать больший вес, чем обычные. Вы можете увидеть их, например, в военных и медицинских учреждениях.

Однако вы можете использовать их для некоторых шкафов в вашем доме, особенно если двери ваших шкафов большие из-за материала или из-за того, что они слишком большие. Поворотные и цилиндрические петли — это распространенные типы тяжелых петель, которые могут выдерживать большой вес, но позволяют двери легко открываться и закрываться.

Обычно петли для тяжелых условий эксплуатации могут иметь толщину до дюйма и предназначены для использования на дверях весом не менее 1000 фунтов, что необычно для домашних условий.

4. Скрытый

Источник: Amazon

Скрытый шарнир, как следует из названия, — это тот, который вы не увидите снаружи шкафа. Эти петли, также иногда называемые невидимыми или скрытыми петлями, могут помочь домовладельцам добиться идеального внешнего вида своих шкафов. Скрытые петли прикрепляются только к внутренней стороне дверцы шкафа и рамы, так что дверцы кажутся плавающими на лицевой стороне рамы шкафа.

Одним из самых больших преимуществ скрытых петель является то, что вы можете разместить их там, где они вам нужны, не влияя на внешний вид ваших шкафов. Если есть небольшие неточности в размерах шкафа, петли могут помочь скрыть эти недостатки, потому что вы не заметите никаких различий в их размещении снаружи.

5. Самозакрывающийся

Источник: Amazon

Самозакрывающиеся петли часто называют подпружиненными петлями. Однако некоторые из них вообще не имеют пружин и вместо этого используют гидравлическую конструкцию.Обе конструкции позволяют дверцам вашего шкафа закрываться самостоятельно, используя свой собственный вес. Петли такого типа часто можно встретить в системах домашнего кинотеатра и шкафчиках в спортзале, но нередко можно встретить и в шкафах для ванной и на кухне.

Подпружиненные петли имеют пружину, которая разматывается, когда вы открываете дверь, а затем отскакивает при нажатии на дверные створки. Этот шарнир со временем изнашивается, особенно в шкафах, которыми вы часто пользуетесь.

Гидравлический самозакрывающийся шарнир, с другой стороны, использует гидравлическое давление, чтобы позволить вашим шкафам закрываться.Когда вы сбрасываете давление, удерживающее дверь открытой, вакуум воздуха внутри петли заставляет петлю закрыться самостоятельно.

Недостатком петель любого типа является то, что в случае их износа или неисправности вы можете получить дверь, которую не сможете открыть, пока не удалите и не замените петли.

ВИДЕО:

6. Мягкое закрытие

Источник: Amazon

Петли с плавным закрытием похожи на самозакрывающиеся петли, но немного отличаются друг от друга.Хотя самозакрывающаяся петля закроет для вас дверь шкафа, это не всегда будет тихим закрытием. Петля с плавным закрытием, с другой стороны, заглушит шум, который может издавать закрывающийся шкаф, но он не является полностью самозакрывающимся.

Когда вы закрываете дверцу шкафа с помощью петли с мягким закрыванием, вам нужно приложить некоторую силу, чтобы закрыть дверцу. Однако как только дверь достигает определенного положения, петля берет на себя, позволяя ей скользить в закрытое положение без хлопка.

Подобно самозакрывающейся гидравлической петле, петли с плавным закрыванием используют гидравлику для создания вакуума, который закрывает дверь.Конструкция такова, что дверь закрывается медленно, предотвращая стук во время оседания.

3. Типы петель шкафа

Мы обсудили некоторые особенности петель шкафа, которые влияют на внешний вид дверей шкафа. Теперь давайте перейдем к множеству типов петель для шкафов, которые различаются по внешнему виду и функциям.

1. Ствол

Источник: Amazon

Петли для бочек скрывают, чтобы их не было видно снаружи дверцы шкафа. Люди часто используют эти петли для деревообрабатывающих проектов с крышками, таких как деревянные ящики для хранения, потому что они помогают крышке перемещаться вверх и вниз, не меняя внешнего вида.

Однако вы также можете использовать их на дверцах шкафов, на которых вы хотите, чтобы они выглядели без петель. Петли для бочек могут быть разной глубины и диаметра, поэтому вам нужно будет найти такие, которые меньше толщины дверцы и рамы вашего шкафа.

Используя сверло подходящего размера, просверлите два отверстия, одно в двери, а другое в раме шкафа, и вставьте в них цилиндрические петли. Рука, соединяющая концы, позволит открывать и закрывать дверь.

2.Прикладом

Источник: Amazon

Петли встык — один из наиболее распространенных типов, используемых для различных дверей, в том числе для шкафов. Эти петли имеют две стороны, которые расходятся веером. Обе стороны соединяются с шарниром, позволяя им свободно перемещаться. Вы прикрепите одну сторону к дверце шкафа, а другую — к раме шкафа. Обычно вы видите стык снаружи шкафа, поэтому важно выбрать отделку, которая дополняет отделку вашего шкафа.

Стыковые петли могут перемещаться с помощью центрального пальца или шарового шарнира.Они призваны быть простыми, но их простая конструкция также делает их относительно надежным вариантом для тех, кто ищет простую установку для своего проекта и петли, которые могут прослужить долгие годы.

Петли встык требуют прорезания паза, чтобы двери закрывались должным образом. В следующем видео рассказывается, как вырезать паз в шкафу для точной подгонки:

3. Лицевая рамка

Источник: Amazon

Шкафы с лицевой рамкой — это самый распространенный стиль, который выбирают в Соединенных Штатах.Эти шкафы имеют небольшую рамку, огибающую проем шкафа. Для этих шкафов вам понадобится петля лицевой рамы, которая будет прикрепляться одной стороной к двери, а другой — к лицевой раме. Это вид скрытых петель, которые не видны снаружи шкафа.

Конструкция этой петли позволяет перемещать дверцы шкафа, которые перекрывают лицевую рамку или находятся перед ней. Если ваши шкафы безрамные (т. Е. У них нет лицевой рамки), вам понадобится другой тип скрытых петель, которые крепятся к внутренней части каркаса шкафа.

4. Промывка

Источник: G John’s and Sons

Петля заподлицо похожа на петлю встык в том, что она прикрепляется к внутренней части дверцы шкафа и рамы. Однако эти петли могут занимать гораздо меньше места в двери, потому что, когда дверь закрывается, маленькая часть петли закрывается на большую часть, делая ее похожей на одно целое.

Как и стыковое соединение, вы увидите плоское шарнирное соединение с внешней стороны корпуса, поэтому выберите отделку, которая вам нравится. Преимущество стыка заподлицо в том, что вам не нужно создавать паз, как при стыковом стыке, чтобы дверца шкафа закрывалась правильно.

5. Полное наложение

Источник: Amazon

Накладка указывает на то, как дверцы вашего шкафа соединяются с рамой шкафа. Некоторые двери устанавливаются перед лицевой стороной шкафа, а другие — вставными, что означает, что они прикреплены к внутренней части рамы шкафа, а лицевая сторона дверей находится заподлицо с рамой. В шкафах с частичной накладкой между дверцами остается небольшой зазор, через который можно увидеть часть лицевой рамы за ними.

Петля с полным перекрытием — это то, что вам нужно для дверей шкафа, которые закрывают всю поверхность шкафа.Они могут быть разных стилей, но обычно они идут внутри шкафа, прикрепляются к двери и либо к лицевой раме, либо к внутренней части безрамного шкафа.

6. Половина наложения

Источник: Amazon

Петли с полуналожением — это вариант, который вам понадобится для шкафов с частичным наложением или с половинным наложением. Половинные шкафы имеют две двери, которые встречаются посередине и разделяют небольшую стену или перегородку. Эти петли прикрепляются к дверям изнутри и позволяют им открываться рядом друг с другом, не задевая друг друга.

Эти петли устанавливаются на перегородку, разделяемую двумя дверьми. Они должны быть небольшого размера, чтобы они могли поместиться на перегородке.

7. Вставка

Источник: Amazon

Петли-вкладыши имеют одну узкую сторону, которая прикрепляется к дверной коробке, а более широкая сторона прикрепляется к внутренней части двери. Вы увидите узкую часть снаружи шкафа, поэтому обычно встречаются петли-вставки с декоративными элементами.

Как и другие петли, врезные петли бывают разных видов отделки и декоративного оформления, чтобы соответствовать дизайну ваших шкафов.

8. Невидимый

Источник: Amazon

Термин «невидимые петли» иногда заменяют термином «скрытые петли». Но есть настоящий тип петли, называемый невидимой петлей, который выглядит как на фото выше. Чаще всего их можно увидеть в системах домашнего кинотеатра. Эти петли также можно использовать на металлических дверях.

Эти петли относительно невелики и занимают очень мало места внутри двери и рамы, к которой они крепятся. Даже когда вы открываете дверцы шкафа, петли не будут очень заметны.

9. Офсет

Источник: Amazon

Если у вас есть дверцы шкафа, которые немного выступают из каркаса шкафа, то петля со смещением может быть тем, что вам нужно, чтобы прикрепить их. Две стороны петли не совпадают, что помогает двери выступать из рамы. Это особенно полезно, если у вас толстые дверцы шкафа, которые должны выступать из рамы, чтобы они не ударялись о раму, когда вы их открываете.

Эти петли прикрепляются к раме шкафа и двери снаружи, поэтому они часто бывают разных стилей и отделок, чтобы вы могли найти ту, которая хорошо сочетается с дизайном вашего шкафа.

10. Поворотный

Источник: Amazon

Поворотный шарнир — это шарнир, который вы обычно найдете на нижних шкафах или в корпусах систем домашнего кинотеатра. Эти петли лучше всего подходят для врезных дверей, на которых петли не должны быть видны.

Эти петли устанавливаются сверху и снизу дверцы и рамы шкафа. Рама будет иметь вставные детали, а дверь будет иметь деталь, которая выступает и надежно входит в вставные детали, позволяя ей поворачиваться внутри вставной детали.

11.Ремешок

Источник: Amazon

Петля для ремешка получила свое название благодаря своей конструкции, напоминающей ремешок, с длинными крыльями, которые охватывают область, где дверца шкафа встречается с рамой. Они устанавливаются на внешней поверхности ваших шкафов, поэтому вы найдете их в различных цветах, формах, фактурах и отделках.

Петли с ремешком также могут быть очень длинными или короткими, чтобы соответствовать размеру и весу дверцы вашего шкафа. Это универсальные петли в отношении их внешнего вида и того, что они могут удерживать.Вы заметите эти петли на воротах, обычно намного длиннее, чем на шкафах, потому что они могут выдерживать большой вес.

12. Крепление на поверхность (бескаркасное)

Источник: Amazon

Петли для накладного монтажа — это еще одно название дверных петель для безрамных дверей. Они устанавливаются на внутренней стороне двери и рамы шкафа и позволяют дверце иметь достаточно места, чтобы ее можно было откинуть, не задевая раму. Обычно вы можете отрегулировать петли для поверхностного монтажа, чтобы они открывались и закрывались правильно для ваших шкафов и их дверей.

Эти петли установить проще, чем другие, поскольку вам не нужно создавать паз перед их установкой.

13. Обертывание

Источник: Amazon

Петли

с обхватом имеют лицевую сторону, которая прикрепляется к задней части двери, а другая грань оборачивается вокруг рамы шкафа или лицевой рамы, а затем внутри шкафа. Петли такого типа могут придать дверцам шкафа большую устойчивость и поддержку, особенно если они тяжелые.

Соединение этих петель будет видно снаружи шкафа, поэтому вам нужно будет выбрать отделку, соответствующую вашему дизайну.

D. Подробнее

Теперь, когда вы знаете о типах петель, которые можно найти в строительном магазине, чтобы завершить проект шкафа, давайте поговорим о видах отделки петель, правильном измерении для установки петли и других важных деталях, которые вы должны знать, прежде чем выбирать свой петли.

1. Типы отделки петель

Если вы не планируете покупать петли, которые устанавливаются внутри шкафов, то, возможно, вас не беспокоит их внешний вид.Но помните, что, когда вы открываете свои шкафы, большинство петель хотя бы немного видны, поэтому вы можете не захотеть выбирать золотую отделку, когда у вас есть все серебряные фурнитуры на остальной части вашей кухни.

Петли

бывают самых разных стилей и отделок, которые помогут вам завершить общий вид. Вы можете подумать о покупке нескольких ваших любимых отделок, чтобы поднести их к своим шкафам и посмотреть, какой из них подойдет лучше всего. Или возьмите оставшуюся часть шкафа с собой в строительный магазин для справки.

Некоторые распространенные варианты отделки:

• Латунь
• Медь
• Черный
• Хром
• Никель
• Белый
• Сталь
• Нержавеющая сталь

2. Определите тип вашей двери

Мы кратко поговорили о шкафах с безрамной и лицевой рамой, а также о типах дверей, которые могут быть на ваших шкафах, например, о накладных и вставных дверях. Эта информация крайне важна для понимания, чтобы вы могли выбрать петли правильного типа для своей двери.

Следующее видео дает хорошее визуальное представление и объяснение того, как лежат разные двери:

3. Измерение петель шкафа

Точные размеры петель нового шкафа — важнейший элемент головоломки при размещении петель на шкафах. Вам нужно будет измерить накладку двери, чтобы получить точный размер для вашего проекта.

Чтобы измерить накладку, поместите дверцу шкафа туда, где она будет открываться после установки петель.Прикрепите кусок ленты от двери к раме, почти как самодельную петлю. Затем откройте дверцу и измерьте расстояние от края ленты до проема шкафа. Результирующее измерение — это размер вашего оверлея.

Убедитесь, что петля тоже обращена в правильную сторону. Правая петля будет обозначена как правая, а левая петля обозначена как левая.

Когда дело доходит до размеров петель, совершенно нормально беспокоиться о том, что вы выбираете не ту петлю, которая вам нужна.Вы всегда можете сфотографировать свои шкафы с собой в хозяйственный магазин, чтобы сотрудник помог вам подобрать шкаф, подходящий вашему стилю.

4. Замена изношенных петель шкафа

Если вы начнете замечать, что ваши шкафы скрипят или начинают прилипать, то простая смазка может помочь, чтобы они снова заработали. В противном случае вам может потребоваться их замена.

К счастью, замена петель шкафа может быть простым делом своими руками, но только в том случае, если вы выберете петли аналогичного типа с такими же размерами отверстий под винты, что и ваш старый.

Попробуйте приобрести новые петли у той же фирмы, что и ваши старые петли. Вам будет проще подобрать стиль и размеры, чтобы избежать ненужных дырок в шкафах.

Снимите дверцы шкафа перед тем, как полностью снять петлю, чтобы не повредить дверцу в процессе.

E. Где купить петли для шкафов онлайн

Если вы хорошо представляете, какой тип петли для шкафа вы хотите купить, и чувствуете себя уверенно, покупая их в Интернете вместо того, чтобы идти в хозяйственный магазин, мы предлагаем воспользоваться услугами следующих розничных продавцов, чтобы найти то, что вам нужно:

Сайт полипролина в шарнире 2 влияет на функциональную способность усеченных дистрофинов

Abstract

Мутации в дистрофине могут привести к мышечной дистрофии Дюшенна или более легкой форме заболевания, мышечной дистрофии Беккера.Шарнирная область 3 в стержневом домене дистрофина особенно подвержена делеционным мутациям. Предполагается, что делеции шарнира 3 в рамке приводят к МПК, однако тяжесть заболевания может значительно варьироваться. Здесь мы провели обширный структурно-функциональный анализ усеченных дистрофинов с модифицированными петлями и спектриноподобными повторами у мышей mdx . Мы обнаружили, что сайт полипролина в шарнире 2 сильно влияет на функциональную способность микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} с большой делецией в области шарнира 3.Включение полипролина в микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} привело к появлению небольших миофибрилл (на 12% меньше, чем у дикого типа), разрыву ахиллово-сухожильных мышц, кольцевых волокнах и аберрантных нервно-мышечных соединениях в икроножных мышцах mdx . Замена шарнира 2 микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} шарниром 3 значительно улучшила функциональную способность предотвращать дегенерацию мышц, увеличивать площадь мышечных волокон и поддерживать соединения. Мы пришли к выводу, что жесткая α-спиральная структура сайта полипролина значительно ухудшает функциональную способность усеченных дистрофинов поддерживать соответствующие связи между цитоскелетом и внеклеточным матриксом.

Сведения об авторе

Дистрофин действует как большая молекулярная пружина между мышечным цитоскелетом и внеклеточным матриксом, чтобы защитить мембрану от повреждения, вызванного сокращением. Мутации в дистрофине могут привести к тяжелой болезни, вызывающей истощение мышц, которая называется мышечной дистрофией Дюшенна (МДД) у мальчиков. Пациенты с МДД обычно прикованы к инвалидной коляске в возрасте 9–13 лет и умирают примерно в 30 лет. Есть также мутации в гене дистрофина, которые приводят к внутреннему усечению несущественных областей, таких как внутренний стержневой домен, что приводит к легкой форме заболевания, называемого мышечной дистрофией Беккера.Однако эти внутренние усечения часто возникают в «горячей точке» внутри стержневой области, где тяжесть результирующего заболевания трудно предсказать. Здесь мы обнаружили, что последовательные остатки пролина, которые функционируют во многом как молекулярная линейка, могут резко влиять на функцию этих внутренне усеченных дистрофинов в скелетных мышцах. Используя эту информацию, мы разработали мини-ген дистрофина, который может приспособиться к ограниченному размеру упаковки рекомбинантного аденоассоциированного вируса. Этот вирус может доставлять мини-ген дистрофина к большинству мышц дистрофической мыши, чтобы предотвратить дегенерацию мышц и частично восстановить мышечную функцию.

Образец цитирования: Banks GB, Judge LM, Allen JM, Chamberlain JS (2010) Сайт полипролина в шарнире 2 влияет на функциональную емкость усеченных дистрофинов. PLoS Genet 6 (5): e1000958. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958

Редактор: Грегори А. Кокс, Лаборатория Джексона, Соединенные Штаты Америки

Поступила: 21 декабря 2009 г .; Принята к печати: 20 апреля 2010 г .; Опубликован: 20 мая 2010 г.

Авторские права: © 2010 Banks et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Эта работа была поддержана грантами Национальных институтов здравоохранения (R01 AR44533 и R01 AG033610 для АО). LMJ был поддержан Программой обучения ученых-медиков, Стипендиальным фондом Понсина и Наградами за достижения для ученых колледжей.GBB был поддержан стипендией CJ Martin для получения докторской степени от Национального совета по здравоохранению и медицинским исследованиям Австралии (372212). У авторов нет конфликта интересов. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Мышечная дистрофия Дюшенна (МДД) — это летальное Х-сцепленное рецессивное заболевание, вызываемое мутациями в 2.2 гена дистрофина MB [1] — [3]. В скелетных мышцах дистрофин обеспечивает гибкую связь между цитоскелетом и комплексом дистрофин-гликопротеин в сарколемме, мышечно-сухожильном соединении (MTJ) и нервно-мышечном соединении (NMJ) [4] — [6]. Мутации, которые влияют на механическую целостность этого молекулярного каркаса, делают мышцы более восприимчивыми к повреждениям, вызванным сокращением, что приводит к циклам некроза и регенерации [3].

Как правило, большинство мутаций со сдвигом рамки считывания в дистрофине приводят к МДД, тогда как внутренние усечения (делеции внутри рамки считывания) приводят к более легкой форме заболевания, называемой мышечной дистрофией Беккера (МПК) [7] — [14].Тяжесть МПК также может варьироваться в зависимости от того, удалена ли критическая область дистрофина и количество экспрессируемого дистрофина [7] — [14]. Дистрофин состоит из N-концевого актин-связывающего домена, большого центрального стержневого домена, богатой цистеином области и C-концевого домена (Рис. 1A) [15], [16]. Центральный стержневой домен содержит 24 спектриноподобных повтора, 4 шарнира и второй актин-связывающий домен [15] — [20]. Локус, кодирующий N-концевой актин-связывающий домен, и область около шарнира 3 дистрофина более восприимчивы к делеционным мутациям [7] — [13].Делеции центрального стержневого домена в рамке считывания обычно приводят к умеренной BMD [8] — [13]. Однако делеции внутри рамки в «горячей точке» возле шарнира 3 могут приводить к более вариабельным фенотипам [8] — [13], [21].

Рис. 1. Шарнирные домены дистрофина влияют на созревание и поддержание мышц.

(A) Молекулярная структура усеченных дистрофинов (см. Обзор: [15]). ABD1 на N-конце состоит из двух доменов гомологии кальпонина, обозначенных двумя кружками. Центральный стержневой домен содержит 24 спектриноподобных повтора (R1-24), 4 шарнирных домена, вставку из 20 аминокислот между спектриноподобными повторами 15 и 16 и центральный актин-связывающий домен (ABD2).Кластер основных повторов формирует ABD2, который связывается с актином посредством электростатического взаимодействия [20]. Шарнирные домены различаются тем, что шарнир 2 содержит сайт полипролина, а шарнир 4 содержит мотив WW, который необходим для связывания с β-dystroglycan [19], [68]. Богатая цистеином область содержит две руки EF и домен ZZ, который также необходим для связывания с β-дистрогликаном. Микродистрофины, использованные в этом исследовании, показаны ниже полноразмерного дистрофина. Микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} лишен большой части центрального стержневого домена между спектриноподобными повторами 4 и 23, а также лишен С-концевого домена (ΔR4-R23 / ΔCT) [24].Обратите внимание, что микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} и микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} отличаются одним шарнирным доменом. (B) Поперечные срезы икроножных мышц мышей дикого типа, mdx и mdx , экспрессирующих либо микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , либо микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} . Масштабная линейка = 100 мкм. (C) Экспрессия усеченных дистрофинов в обработанных мышцах икроножной мышцы mdx была аналогичной. Вестерн-блоттинг проводили с использованием замороженных мышц, извлеченных из ОКТ.Все дорожки были загружены одинаково, как показывает α-саркомерный актин. (D) Показано среднее значение +/- S.D. процент дистрофин-положительных мышечных волокон. ТА — передняя большеберцовая мышца. (E) Показано среднее значение +/- S.D. процента мышечных волокон, содержащих центрально расположенные ядра. Микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} с шарниром 3 был более эффективен в предотвращении дегенерации мышц у мышей mdx по сравнению с микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} с шарниром 2. Обработанные мышцы показывают среднее значение +/- SD для только дистрофин-положительные волокна.*** P <0,001 по сравнению с необработанными мышами mdx . ^# P <0,05 по сравнению с микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , обработанным mdx мышц. (F) Шарнирные области дистрофина влияют на площадь поперечного сечения мышечных волокон. Показано среднее +/- распределение (25-й и 75-й процентили (прямоугольник) в дополнение к самой дальней (усы) области мышечных волокон. * P <0,05 и *** P <0,001 по сравнению с диким типом.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pgen.1000958.g001

Роль дистрофина in vivo в значительной степени определяется структурно-функциональной взаимосвязью усеченных дистрофинов у людей и мышей [8] — [13], [22] — [24]. Рациональный дизайн мини-генов дистрофина оказался высокоэффективным в предотвращении и изменении функциональных аномалий дистрофических мышц [22] — [29]. В частности, мы ранее разработали микродистрофин (ΔR4-R23 / ΔCT; определяемый как микродистрофин с 4 или менее спектриноподобными повторами [24]), который приспосабливает ограниченную клонирующую способность рекомбинантных аденоассоциированных вирусных векторов (rAAV) [24].Внутривенная инъекция векторов rAAV, псевдотипированных капсидом серотипа 6 (rAAV6), экспрессирующим микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , может предотвратить и обратить вспять большинство аспектов дистрофической патологии в мышцах mdx [24], [28], [30] — [35] ]. Микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} также значительно защищает мышцы от повреждений, вызванных сокращением [24], [28], [30] — [35].

В то время как трансген микродистрофина ^ΔR4-R23 дает явное преимущество для дистрофических мышц [24], более подробный анализ выявил потенциально серьезные нарушения в некоторых группах мышц.Трансгенные мыши с микродистрофином ^ΔR4-R23 / mdx имеют хроническое повреждение ахиллово-сухожильного сустава, которое приводит к образованию кольцевых волокон и фрагментации нервно-мышечных соединений [33], [36]. В настоящем исследовании мы изучили, приводит ли состав домена или небольшой размер микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} к этой миопатии у мышей mdx . Мы обнаружили, что шарнирные области микродистрофина, а не его небольшой размер, могут существенно влиять на поддержание, созревание и структуру скелетных мышц.

Результаты

Шарнирные домены дистрофина влияют на поддержание и созревание скелетных мышц

Сначала мы проверили несколько усеченных дистрофинов и обнаружили, что включение шарнира 2, но не шарнира 3, может привести к структурным аномалиям, которые мы наблюдали в некоторых мышцах трансгенных мышей с микродистрофином ^ΔR4-R23 (текст S1; рисунки S1, S2, S3 ). Впоследствии мы сравнили эффективность двух микродистрофинов, которые различаются только включением петли 2 (микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} ) или петли 3 (микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} ) (Рисунок 1A), чтобы проверить, шарнирный состав микродистрофина может влиять на различные аспекты мышечной болезни.

Мы ввели субоптимальную дозу 2 × 10 ¹² векторных геномов псевдотипного вектора rAAV6, экспрессирующего либо микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , либо микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} внутривенно в возрасте 2 недель. mdx ^4cv мышей. Мы использовали субоптимальную дозу rAAV6-микродистрофина, чтобы мы могли изучить, увеличило или уменьшило изменение шарнирного домена функциональную способность микродистрофина. Через шесть месяцев после лечения оба микродистрофина экспрессировались в аналогичном процентном соотношении икроножных и передних большеберцовых (TA) мышечных волокон (в диапазоне от примерно 61% до 71%; P = 0.238 при сравнении микродистрофинов; Рисунок 1B и 1D). Вестерн-блоттинг подтвердил аналогичные уровни экспрессии усеченных дистрофинов в обработанных икроножных мышцах (рис. 1С). Оба микродистрофина восстанавливали ассоциированные с дистрофином белки в сарколемме, за исключением nNOS (текст S1; рисунок S4). Микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , содержащий шарнир 2, значительно предотвращал дегенерацию мышц (~ 11% центральных ядер для обработанных мышц, против ~ 78% для необработанных мышц mdx ; P <0.001) и ограничивал площадь волокон скелетных мышц (на 12% меньше, чем у дикого типа; P <0,05; рис. 1E), что согласуется с предыдущими исследованиями [24], [32], [33]. Микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} , содержащий шарнир 3, был значительно лучше способен предотвращать мышечную дегенерацию (1-2% центральных ядер; P <0,05 по сравнению с микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} ) и неожиданно увеличил среднее количество мышечных волокон. площадь поперечного сечения (на 34% больше, чем у дикого типа; P <0,001; Рисунок 1E).Таким образом, замена шарнира 2 микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} шарниром 3 значительно улучшила его способность предотвращать дегенерацию мышц и способствовать созреванию скелетных мышц.

Шарнирные домены дистрофина влияют на повреждение мышечно-сухожильных соединений и образование кольцевых волокон

Сухожилие расширяет глубокие складки в скелетные мышцы дикого типа, чтобы минимизировать мембранное напряжение при сдвиге (Рисунок 2) [37]. Большинство складок в стыках mdx не доходили до икроножных мышц (рис. 2).rAAV6-микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} серьезно нарушил ахиллово-мышечно-сухожильные соединения у мышей mdx . Многие из соединительных складок отсутствовали, и была очевидна дегенерация миофибрилл (рис. 2). Примерно 17% прилегающих мышц икроножной мышцы mdx имели кольцевидные волокна. Напротив, rAAV6-микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} с шарниром 3 сохранил нормальную архитектуру ахиллово-сухожильного соединения, и мы не обнаружили кольцевых волокон в прилегающих икроножных мышцах (рис. 2).Таким образом, шарнирные домены влияют на то, способен ли микродистрофин поддерживать мышечно-сухожильное соединение и структуру миофибрилл в мышцах mdx gastrocnemius.

Рис. 2. Шарнирные домены дистрофина влияют на структуру мышечно-сухожильных соединений и формирование кольцевых волокон.

Представлены изображения, полученные с помощью электронной микроскопии, продольных срезов ахиллово-сухожильных сочленений в дополнение к поперечным сечениям икроножных мышц. Обратите внимание, что экспрессия микродистрофина нарушает мышечно-сухожильные соединения и приводит к образованию кольцевых волокон (стрелка).Масштабная линейка = 5 мкм для мышечно-сухожильных соединений и 2 мкм для поперечных срезов икроножных мышц.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958.g002

Шарнирные домены дистрофина влияют на структуру нервно-мышечных синапсов

Мы также исследовали нервно-мышечные синапсы у мышей mdx , получавших rAAV6-микродистрофины. Большинство нервно-мышечных синапсов у мышей дикого типа (~ 97%) образуют непрерывную третичную структуру, как показано окрашиванием целых мышечных волокон α-бунгаротоксином (рис. 3А).Нервно-мышечные синапсы у мышей mdx начинают фрагментироваться во времени одновременно с дегенерацией мышц [38]. Приблизительно 89% нервно-мышечных синапсов были фрагментированы в икроножных мышцах мышей mdx (рис. 3B). Ранее мы показали, что нервно-мышечные синапсы в трансгенном микродистрофине ^ΔR4-R23 / mdx икроножных мышц фрагментированы во времени, что совпадает с образованием кольцевых волокон [36]. В настоящем исследовании мы обнаружили, что rAAV6-микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , содержащий шарнир 2, поддерживал непрерывные синапсы только в 46% икроножных мышц mdx (рис. 3A и 3B).Напротив, приблизительно 84% синапсов были непрерывными в мышцах икроножной мышцы mdx , обработанных rAAV6-микродистрофином ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} , содержащим шарнир 3 (рис. 3A и 3B).

Рис. 3. Шарнирные домены дистрофина влияют на структуру нервно-мышечных синапсов.

(A) Топографический вид кластеров AChR, окрашенных α-бунгаротоксином. Шкала шкалы = 10 мкм. (B) График показывает средний процент непрерывных синапсов +/- SD. Значительное отличие от mdx *** P <0.001. Значительное отличие от микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} / mdx мышей ^### P <0,001. (C) Ультраструктура нервно-мышечных синапсов дикого типа, mdx и mdx икроножных мышц, экспрессирующих микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} и микродистрофин ^{Δh3-R23 / ΔCT + h4} . Обратите внимание, что синаптическое сворачивание снижается у мышей mdx и увеличивается в мышцах, обработанных rAAV6-микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} (стрелки).Шкала шкалы = 0,5 мкм. (D) График показывает среднее +/- SD количество складок на мкм постсинаптической мембраны, прилегающей к пресинаптической щели. Значительная разница по сравнению с диким типом ** P <0,01. (E) Средняя +/- SD глубина складок была значительно увеличена в мышцах mdx , обработанных rAAV6-микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} (*** P <0,001).

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958.g003

Нервно-мышечные синапсы также содержат складки в постсинаптической мембране, которые прилегают непосредственно к участкам высвобождения пузырьков (активные зоны) в пресинаптическом нервном окончании (стрелки; Рисунок 3C).Количество синаптических складок у мышей mdx было значительно снижено по сравнению с мышами дикого типа (P <0,01; рис. 3C и 3D), как описано ранее [4], [39]. Количество складок было восстановлено в мышцах, обработанных микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} и микродистрофином ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} (фиг. 3C и 3D). Синаптические складки значительно расширились в мышцах mdx , обработанных микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , по сравнению с мышцами дикого типа ( P <0.001; Фигуры 3C и 3E), как описано ранее на трансгенных мышах microdystrophin ^ΔR4-R23 / mdx [36]. Напротив, количество и длина синаптических складок в мышцах mdx , обработанных микродистрофином ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} , были аналогичны мышцам дикого типа (фиг. 3C-3E). Таким образом, микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} , содержащий шарнир 3, может поддерживать структуру нервно-мышечных соединений в мышцах mdx .

Механические свойства мышц, экспрессирующих микродистрофины, с шарниром 2 или шарниром 3

Повреждение, вызванное сокращением, может инициировать дегенерацию мышц у мышей mdx [40].Скелетные мышцы мышей mdx обладают меньшей способностью производить силу, чем мышцы дикого типа, и более восприимчивы к повреждениям, вызванным сокращением (рис. 4). Мы обнаружили, что субоптимальные дозы как rAAV6-микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , так и rAAV6-микродистрофина ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} поддерживали максимальную способность производить силу mdx икроножных и большеберцовых мышц (рис. ). Оба микродистрофина также значительно улучшили производство удельной силы (силы на площадь поперечного сечения мышцы) в мышцах размером mdx ( P <0.05; Рисунок 4B). Удельная сила не была восстановлена ​​для дикого типа отчасти потому, что субоптимальная доза rAAV6-микродистрофина не предотвратила псевдогипертрофию, обычно обнаруживаемую в мышцах mdx ( P = 0,454 при сравнении мышечной массы между mdx и обработанные мышцы mdx ; односторонний дисперсионный анализ). Каждый микродистрофин значительно защищал обработанные мышцы конечностей от повреждения, вызванного сокращением ( P <0,001; Фигуры 4C и 4D). Однако мы не обнаружили значительной разницы между пиковой силой, удельной силой или защитой от повреждения, вызванного сокращением, при сравнении двух микродистрофинов с шарниром 2 или шарниром 3.

Рис. 4. Микродистрофины значительно улучшают механические свойства мышц задних конечностей mdx .

(A) На графике показано среднее значение +/- S.D. пиковая сила. * P <0,05 и ** P <0,01 по сравнению с диким типом. ^# P <0,05 и ^### P <0,001 по сравнению с mdx . (B) График показывает среднее значение +/- S.D. удельная сила. *** P <0,001 по сравнению с диким типом. ^# P <0.05 и ^## P <0,01 по сравнению с mdx . Сократительная способность (C) икроножных мышц и (D) передней большеберцовой мышцы непосредственно перед увеличением длины изменяется во время создания максимальной силы. Столбцы представляют собой среднее значение +/- S.D. процент начального оптимального сокращения мышц. Мышцы, обработанные rAAV6-микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , были значительно (* P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001), как и rAAV6-микродистрофин ^{Δh3-R23 / ΔCT + h4} ( ^# P <0.05; ^## P <0,01; ^### P <0,001) обработанных мышц по сравнению с мышами mdx .

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958.g004

Полипролин в шарнире 2 влияет на патологию волокон скелетных мышц

В совокупности наши результаты предполагают, что структурные аномалии, наблюдаемые в некоторых обработанных мышцах размером mdx , могут быть связаны с присутствием шарнира 2 внутри микродистрофина. Затем мы исследовали молекулярный состав петель, чтобы определить, что было уникальным в петле 2.Петли в дистрофине определяются как таковые из-за более высокой концентрации остатков пролина, которые функционируют, чтобы ограничивать продолжение α-спиральных спиралей спектриноподобных повторов по всей длине домена стержня дистрофина [19]. Как шарнир 2, так и шарнир 3 имеют шесть остатков пролина, и длина этих шарниров одинакова [19]. Мы предположили, что размещение пролинов, скорее всего, приводит к их различным функциям [5], [19]. Петля 2 имеет 5 последовательных остатков пролина (полипролин; рис. 5А), тогда как остатки пролина в петле 3 более равномерно распределены по всей петле [19].Считается, что остатки полипролина имеют свою собственную определенную жесткую спиральную структуру [41], [42], и это может влиять на функциональную способность микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} .

Рисунок 5. Микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} не вызывал структурных аномалий, когда сайт полипролина был удален из шарнира 2.

(A) Молекулярная структура микродистрофинов. Под каждой структурой находится аминокислотная последовательность шарнира 2. Обратите внимание, что остатки пролина выделены красным цветом и что у микродистрофина ^{ΔPolyP / ΔR4-R23 / ΔCT} отсутствует сайт полипролина.(B) Поперечные срезы икроножных мышц мышей mdx , экспрессирующих микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} (верхняя панель) или микродистрофин ^{ΔPolyP / ΔR4-R23 / ΔCT} (нижняя панель). Масштабная линейка = 100 мкм. (C) Экспрессия усеченных дистрофинов из обработанных икроножных мышц. Вестерн-блоттинг проводили с использованием срезов тканей, замороженных в ОКТ. (D) Показано среднее значение +/- S.D. процент миофибрилл с центрально расположенными ядрами. Обработанные мышцы показывают среднее значение +/- SD только для дистрофин-положительных волокон.*** P <0,001 по сравнению с необработанными мышами mdx . (E) Область полипролина влияла на площадь поперечного сечения мышечных волокон. Показано среднее +/- распределение (25-й и 75-й процентили (прямоугольник) в дополнение к самым дальним (усам) мышечных волокон. *** P <0,001 по сравнению с диким типом. ^## P < 0,01 по сравнению с микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} . (F) Экспрессия микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} привела к нарушению мышечно-сухожильных соединений и образованию кольцевых волокон (стрелка; верхние панели) в mdx икроножных мышцах, но не тогда, когда сайт полипролина был удален (нижние панели).Масштабные линейки = 2 мкм. (G) Электронно-микроскопические изображения нервно-мышечных соединений (НМС) в мышцах mdx , обработанных rAAV6-микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} или rAAV6-микродистрофином ^{ΔPolyP / ΔR4-R23 / ΔCT} . Шкала шкалы = 1 мкм. (H) График показывает среднее +/- SD количество складок на мм постсинаптической мембраны, прилегающей к пресинаптической щели. (I) Удаление сайта полипролина из микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} восстановило нормальное среднее значение +/- SD длины синаптических складок (*** P <0.001 по сравнению с микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} ).

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958.g005

Чтобы проверить эту гипотезу, мы сравнили мышцы, экспрессирующие исходный микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , с недавно разработанным микродистрофином ^{ΔpolyP / ΔR4-R23 / ΔCT.} , у которого отсутствует сайт полипролина в шарнире 2 (рис. 5A). Мы доставили 6 × 10 ¹⁰ мкг каждого микродистрофина в икроножные мышцы mdx в возрасте 2 дней и исследовали мышей через 7 недель после лечения.Оба микродистрофина были экспрессированы в одинаковом процентном соотношении мышечных волокон (рис. 5B; 59–68%) и были экспрессированы на аналогичных уровнях (рис. 5C). Каждый микродистрофин значительно уменьшал дегенерацию мышечных волокон (рис. 5D). Как и ожидалось, исходный микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} ограничивал площадь поперечного сечения мышечных волокон (рис. 5E), был связан с нарушением мышечно-сухожильных соединений (рис. 5F), приводил к образованию кольцевых волокон (рис. 5F) и нарушал нервно-мышечные соединения (рис. 5G – 5I).Напротив, мышцы mdx , обработанные микродистрофином ^{ΔpolyP / ΔR4-R23 / ΔCT} , не показали каких-либо отклонений в созревании или структуре мышечных волокон (рис. 5). Таким образом, присутствие этого участка полипролина в шарнире 2 микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} препятствовало соответствующей интеграции мышц в среду нервно-сухожилия.

Обсуждение

Большинство стратегий генной терапии МДД требует генерации высокофункциональных усеченных дистрофинов.rAAV является эффективным и безопасным вектором для системной доставки усеченных дистрофинов в поперечно-полосатые мышцы для предотвращения мышечной дегенерации в моделях МДД на животных ([28]; обзор в [43]). Ранее нами был получен микродистрофин ^ΔR4-R23 , который обладал высокой способностью смягчать дегенерацию мышц и улучшать механическую функцию скелетных мышц mdx [24], [28]. Однако трансген микродистрофина ^ΔR4-R23 приводит к хроническому деформационному повреждению ахиллова мышечно-сухожильного соединения [33].Это привело к образованию кольцевых волокон, которые защищают скелетные мышцы от повреждений, вызванных сокращением, даже лучше, чем у мышей дикого типа [33]. Образование колец привело к фрагментации нервно-мышечных контактов [36]. Другие эффекты трансгена включали уменьшение мышечных волокон [24] и увеличение длины синаптических складок [36]. Здесь мы обнаружили, что каждое из этих фенотипических изменений повторяется в mdx икроножных мышцах, обработанных rAAV6-микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} .Скрининг нескольких недавно разработанных мини-генов дистрофина показал, что шарнирная область 2 влияет на функциональную способность микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} . Замена шарнира 2 шарниром 3 привела к нескольким преимуществам, таким как лучшая защита скелетных мышц (только 1-2% центральных ядер через 6 месяцев после лечения), более крупные мышечные волокна и нормальные соединения. Удаление сайта полипролина из шарнира 2 микродистрофина ^{ΔR4-R23 / ΔCT} также предотвратило эти структурные аномалии.

Механические свойства скелетных мышц, экспрессирующих микродистрофины

Микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} с шарниром 3 значительно увеличивал пиковую силу, удельную силу и защищал мышцы от повреждений, вызванных сокращением. Однако морфологические улучшения мышц, обработанных микродистрофином ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} , не привели к функциональному улучшению по сравнению с мышцами, обработанными микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} . Это может быть результатом молекулярных и клеточных реакций на повреждение мышечно-сухожильных мышц, которые помогают защитить мышцы, обработанные rAAV6-микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} , от повреждения, вызванного сокращением [33].Другая возможность состоит в том, что присутствие некоторых дистрофин-отрицательных волокон маскирует любые функциональные различия между двумя белками. Включение шарнира 2 в микродистрофин ограничивало площадь мышечных волокон, тогда как включение шарнира 3 увеличивало площадь мышечных волокон (Рисунок 1). Более крупные мышечные волокна у мышей, получавших микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} , могут иметь два очевидных преимущества: они могут заменить часть мышечной массы, потерянную на поздних стадиях заболевания, и они могут быть лучше защищены от повреждений, вызванных сокращением [44] .Однако субоптимальная доза любого из rAAV6-микродистрофина не предотвращала псевдогипертрофию у мышей mdx , и при сравнении лечения не было выявлено никаких механических преимуществ. Уровни насыщения rAAV6-микродистрофинов или трансгенных мышей, скорее всего, потребуются для обнаружения незначительных различий в механических свойствах мышц, экспрессирующих различные усеченные дистрофины.

Как полипролин влияет на функциональную способность усеченных дистрофинов?

Наши самые эффективные усеченные дистрофины, разработанные для генной терапии, были разработаны для максимизации функциональных взаимодействий между специфическими спектриноподобными повторами и шарнирными доменами.На этот дизайн повлияли генетические исследования на мышах и человеке, а также биофизические исследования in vitro по структуре, складыванию и физическим свойствам как отдельных, так и тандемно экспрессируемых спектриноподобных повторов и шарнирных доменов [24], [45] — [52]. Отдельные спектриноподобные повторы не все взаимозаменяемы, и те, которые примыкают к шарнирам, обладают свойствами, отличными от тех, которые фланкируются другими спектриноподобными повторами [21], [24], [47], [51], [52]. Кроме того, спектриноподобные повторы редко функционируют как изолированные единицы [15], [24], [50] — [53].Вместо этого они, по-видимому, сворачиваются во вложенные домены, прерываемые различными вставками (шарнирами), которые нарушают однородность и жесткость спектриноподобного повторяющегося стержневого домена [24], [45] — [48], [53] — [55]. Эти прерывания, по-видимому, важны для эластичной и гибкой структуры, в которой дистрофин играет роль преобразователя силы и амортизатора в мышцах [56] — [59]. Наши исследования показывают, что наиболее функциональные укороченные части дистрофина сохраняют центральный шарнирный домен, который фланкирован спектриноподобными повторами, обнаруженными рядом с шарниром у дистрофина дикого типа [24].Нарушение этой связи может влиять на фолдинг, стабильность и функцию белков, приводя к вариабельным фенотипам у пациентов, ассоциированных с делециями в шарнире 3 или рядом с ним, который кодируется экзонами 50-51 [21].

Индивидуальные спектриноподобные повторы состоят из 3 спиральных доменов, соединенных неспиральными линкерами, которые складываются в структуру тройной спиральной спиральной спирали (Рис. 5A; [45], [47]). Линкерные области между дискретными повторами также обычно короткие и относительно неструктурированные, чтобы обеспечить плавное соединение между третьей спиралью предыдущего повтора и первой спиралью следующего повтора (рис. 6А).Однако шарнирные домены прерывают вложенную природу соседних спектриноподобных повторов и обеспечивают большую гибкость стержневому домену (Рис. 6B). Эта степень гибкости, по-видимому, значительно отличается при наличии петли 2 или петли 3. В то время как оба шарнира содержат 6 пролинов, которые действуют, разрушая альфа-спиральные структуры, в шарнире 3 они рассредоточены, тогда как 5 из 6 пролинов в шарнире 2 сгруппированы вместе (Рисунок 5A, Рисунок 6C и 6D; [10]). Остатки полипролина образуют жесткую α-спираль [41], [42], очень похожую на молекулярную линейку [60].Мы предполагаем, что расположение этой полипролиновой последовательности в сильно усеченном стержневом домене вызывает серьезные структурные нарушения, которые могут влиять на способность дистрофина образовывать механически гибкую связь между F-актином и β-дистрогликаном. Спектриноподобные повторы 1-3, как было показано, связаны с сарколеммой мембраной, тогда как WW домен в шарнире 4 формирует критическую часть связывающего домена β-dystroglycan [45], [61]. Домен жесткого стержня, индуцированный полипролином в шарнире 2, может напрямую нарушать способность микродистрофина формировать гибкое взаимодействие с одной или обеими из этих структур (рис. 6С).Напротив, когда шарнир 2 присутствует в полноразмерном дистрофине, значительно большее количество спектриноподобных повторов присутствует между шарниром и связывающим доменом β-дистрогликана, обеспечивая большую гибкость в общей структуре.

Рис. 6. Предсказанная вложенная структура специфических спектриноподобных повторов дистрофина, относящихся к микродистрофинам, и то, как они взаимодействуют с шарнирными доменами.

(A) Предсказанная структура 3 вложенных повторов [15]. Каждый повтор состоит из 3 спиральных доменов (a, b, c), соединенных неспиральными линкерами.Повторяющаяся структура с тройной спиральной спиральной спиралью образована спиралями b и c предыдущего повтора, соприкасающимися с N-концевой спиралью a ‘из следующего повтора. Спирали a и b складываются в длинный повтор, а спираль c складывается в короткий повтор. (B) В дистрофине повторяющиеся домены прерываются шарниром 2 (между повторами 3 и 4) и шарниром 3 (повторы 19 и 20). Показана предсказанная структура повторяющегося 19-шарнирного 3-повтора 20 домена в полноразмерном дистрофине. (C) Шарнирный 2-микродистрофин вызывает необычное структурное изменение, которое нарушает нормальную связь между соседними повторами.(D) Напротив, использование петли 3 создает аналогичную структуру, как в (B), за исключением того, что петля 3 соединяется с повторениями 3 и 24, а не с повторениями 19 и 20.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958.g006

Трудно предсказать функцию сайта полипролина у пациентов с делециями экзона 17 (шарнир 2) дистрофина внутри рамки. Описанные делеции (страницы лейденской мышечной дистрофии) обычно охватывают более крупные области дистрофина, чем сайт полипролина, и неясно, как эти делеции влияют на стабильность белка.Наше открытие, что микродистрофин шарнира 3 может предотвращать мышечную дегенерацию, предполагает, что участок полипролина не является необходимым компонентом дистрофина, подобно предыдущим сообщениям о более длинных формах усеченных дистрофинов [24], [62].

Flanigan et. al., 2009 предположил, что примерно 62% всех пациентов с МДД можно лечить олигонуклеотидами, которые пропускают экзоны 45–55 (из спектриноподобных повторов 18–22) [14]. Это создало бы усеченный дистрофин, который содержит шарнир 2, но не шарнир 3, аналогичный, но намного больший, чем наш трансген микродистрофина ^ΔR4-R23 .Следовательно, будет интересно определить, может ли сайт полипролина в шарнире 2 влиять на функциональную способность более крупных, усеченных дистрофинов. Также будет интересно изучить, влияет ли сайт полипролина на функциональную способность укороченных конструкций утрофина, предназначенных для генной терапии МДД [63], [64].

Материалы и методы

Заявление о мышах и этике

Мы использовали мышей C57Bl / 10 дикого типа и мышей mdx ^4cv .Все эксперименты проводятся в соответствии с комитетом по уходу и использованию животных (IACUC) Вашингтонского университета.

Создание конструкций

Вектор экспрессии CMV-ΔR4-R23 / ΔCT, который использует предранний промотор и энхансер цитомегаловируса для управления экспрессией кДНК микродистрофина, был получен, как описано ранее [32]. Мы создали конструкции Δh3-R24 / ΔCT, ΔR2-R23 + R18-h4 / ΔCT, Δh3-R23 + h4 / ΔCT и ΔPolyP / ΔR4-R23 / ΔCT конструкции, используя рекомбинационную ПЦР с CMV-ΔR4-R23 / ΔCT в качестве матрицы [ 65].Праймеры, использованные для создания Δh3-R24 / ΔCT, ΔR2-R23 + R18-h4 / ΔCT, Δh3-R23 + h4 / ΔCT и ΔPolyP / ΔR4-R23 / ΔCT, приведены в таблице S1. Полученные векторы экспрессии секвенировали и котрансфицировали упаковывающей плазмидой pDGM6 в клетки HEK293 для создания рекомбинантных векторов AAV, содержащих капсиды серотипа 6, которые собирали, очищали и количественно оценивали, как описано ранее [29]. Полученный титр определяли путем сравнения с ранее известными концентрациями rAAV6-CMV- lac Z и ΔR4-R23 / ΔCT с помощью анализа по Саузерну с зондом на промотор CMV.RAAV6-микродистрофины вводили внутривенно путем инъекции в хвостовую вену в возрасте двух недель или непосредственно в икроножные мышцы mdx в возрасте 2 дней, в то время как мышей анестезировали.

Крупная морфология и морфометрия мышц

Грубую морфологию мышц анализировали, как описано ранее [24], [32]. Первичные антитела включали N-конец дистрофина (1–800; [23]), утрофин A (1–300; подарок от Стэнли Френера, Вашингтонский университет), мышиные моноклональные анти-α-дистробревин (Transduction Laboratories; 1–200). ), кроличьи поликлональные анти-Syn17 (α-синтрофин; 1–200; [66]), кроличьи поликлональные анти-nNOS (Alexis; 1–200).Вторичные антитела включали поликлональные антитела Alexa 488, кроличьи Alexa 594 или моноклональные вторичные антитела мыши Alexa 488 (Molecular Probes; 1∶800). Срезы помещали в монтажную среду, препятствующую выцветанию, содержащую DAPI (Vector Labs). Флуоресцентные срезы получали с помощью флуоресцентного микроскопа Nikon eclipse E1000 (Nikon; Нью-Йорк) и снимали с помощью флуоресцентного микроскопа DeltaVision. Площадь мышечных волокон определяли количественно с помощью Image J (NIH).

Иммуноблоттинг

Для иммуноблотов n = 4 икроножных мышц от мышей mdx и мышей mdx , получавших rAAV6-микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} или rAAV6-микродистрофин ^{Δh3-R23 + h174 / ΔwCT, оттаявших блоки OCT 90/174 / помещают в буфер экстракта (50 мМ Трис-HCl, 150 мМ NaCl, 0.2% додецилсульфат натрия, 10% глицерин, 24 мМ дезоксихолат натрия, 1% NP40, 47,6 мМ фторид натрия, 200 мМ ортованадат натрия, Roche). Концентрации белка определяли с помощью анализа Coomassie Plus Bradford (Peirce). Равные количества белка (15 мг) были разделены на 4–12% полиакриламидном геле SDS. Блоты инкубировали с кроличьими поликлональными антителами к дистрофину (1-500; любезный подарок Джеймса Эрвасти, Университет Миннесоты) и мышиными моноклональными антителами к α-саркомерному актину (1-500; SIGMA).}

Мы также выполнили иммуноблоттинг замороженных срезов ткани из n = 4 икроножных мышц, обработанных rAAV6-микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} и микродистрофином ^{ΔPolyP / ΔR4-R23 / ΔCT} , как описано ранее [67], с небольшими модификациями.Вкратце, мы разрезали двадцать пять срезов по 20 мкм и разводили срезы в 200 мкл лизирующего буфера (4% SDS, 25 мМ Трис, pH 8,8, 40% глицерин, 0,5 М фенилметилсульфонилфторид, 100 мМ дитиотреитол и бромфеноловый синий). Образцы кратковременно обрабатывали ультразвуком (10 секунд при 4 ° C), нагревали до 95 ° C в течение 5 минут, центрифугировали в течение 5 минут при 13 200 × g и подвергали электрофорезу в 4–12% SDS-полиакриламидном геле. Блоты инкубировали с первичными кроличьими поликлональными антителами против N-конца дистрофина (1-500; любезный подарок от Джеймса Эрвасти, Университет Миннесоты).Все блоты были проявлены с помощью ECL Plus (Pierce) и сканированы с помощью системы визуализации Storm 860 (Amersham Biosciences).

Электронная микроскопия

Электронную микроскопию проводили, как описано ранее [33]. Число и длину соединительных складок измеряли у n = 4 мышей в возрасте 6 месяцев с использованием изображения J (NIH) и сравнивали с использованием t-критерия Стьюдента (призма). Подсчеты представляют собой количество складок и длины всех волокон (положительный и отрицательный для дистрофина).

Количественное определение окольцованных волокон

Мы подсчитали количество кольцевых миофибрилл на ЭМ-изображениях и толстых (1 мкм) срезах толуидинового синего, по крайней мере, у 4 животных в группе.По меньшей мере 300 мышечных волокон из n = 4 икроножных мышц были исследованы у мышей дикого типа, mdx ^4cv и mdx ^4cv , экспрессирующих различные микродистрофины.

Количественная оценка нервно-мышечных синапсов

Нервно-мышечные синапсы анализировали в мышцах, окрашенных иммунофлуоресценцией, и количественно оценивали, как описано ранее [36]. Кластеры рецепторов ацетилхолина окрашивали конъюгированным с TRITC α-бунгаротоксином (αBTX; 1-800; Molecular Probes).Синапсы были классифицированы как непрерывные, если они представлены 3 или менее непрерывными областями кластеризации AChR, и прерывистыми, если они представлены более чем 3 областями кластеризации AChR. Было проанализировано более 50 синапсов обработанных и необработанных волокон скелетных мышц икроножной мышцы n = 4 мышей. Подсчет в обработанных мышцах включает как положительные, так и отрицательные по дистрофину волокна. Мы сравнили долю непрерывных синапсов с помощью t-критерия Стьюдента.

Физиология мышц

Физиология мышц выполнялась, как описано ранее, для передней большеберцовой [29] и икроножной [33] мышц.Мы исследовали шестимесячных мышей дикого типа, mdx и mdx , получавших rAAV6-микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} или rAAV6-микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} (n = 5). .

Дополнительная информация

Рисунок S1.

Молекулярная структура усеченных дистрофинов. ABD1 на N-конце состоит из двух доменов гомологии кальпонина, обозначенных двумя кружками. Центральный стержневой домен содержит 24 спектриноподобных повтора (R1-24), 4 шарнирных домена, вставку из 20 аминокислот между спектриновыми повторами 15 и 16 и центральный актин-связывающий домен (ABD2).Кластер основных повторов формирует ABD2, который связывается с актином посредством электростатического взаимодействия. Шарнирные домены различаются тем, что шарнир 2 содержит сайт полипролина, а шарнир 4 содержит мотив WW, который необходим для связывания с дистрогликаном. Область, богатая цистеином, содержит две руки EF и домен ZZ, который также необходим для связывания с дистрогликаном. Микродистрофины, использованные в этом исследовании, показаны ниже полноразмерного дистрофина. Микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} имеет большую часть домена центральной палочки, отсутствующую между повторами спектрина 4 и 23, а также не имеет С-концевого домена (ΔR4-R23 / ΔCT).Обратите внимание, что микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} и микродистрофин ^{Δh3-R23 + h4 / ΔCT} отличаются одним шарнирным доменом.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958.s001

(9,25 МБ TIF)

Рисунок S2.

Экспрессия различных микродистрофинов в икроножных мышцах мышей mdx значительно снижает процент центральных ядер. (A) Среднее +/- S.D. процента мышечных волокон, экспрессирующих микродистрофины. (B) Среднее +/- S.D. процент центральных ядер. *** P <0,001 по сравнению с мышами mdx .

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958.s002

(3,06 МБ TIF)

Рисунок S3.

Микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} приводит к образованию кольцевых волокон при наличии петли 2. Показаны поперечные срезы мышц дикого типа, mdx и mdx gastrocnemius, экспрессирующих различные микродистрофины. Стрелки указывают на кольцевидные волокна в мышцах размером mdx , обработанных микродистрофином ^{ΔR4-R23 / ΔCT} .Масштабные полосы = 2 мкм для изображений электронной микроскопии и 50 мкм для других изображений.

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958.s003

(9,93 МБ TIF)

Рисунок S4.

Шарнирные домены дистрофина не влияют на восстановление гликопротеинового комплекса дистрофина. Показана локализация дистрофин-ассоциированных белков в поперечных срезах от мышей дикого типа, mdx и mdx , получавших rAAV6-микродистрофин ^{ΔR4-R23 / ΔCT} или rAAV6-микродистрофин ^{Δh3-R23 / Δh3-R23 / Δh3-R23 / Δh3-R23 / Δh3-R23 / Δh3-R23 / h3 .Масштабная линейка = 200 мкм.}

https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1000958.s004

(10,31 МБ TIF)

Благодарности

Мы благодарны Кейтлин С. Дормус и Эрику Э. Финну за техническую помощь. Мы также хотели бы поблагодарить Джудит Боусман и Бобби Шнайдер за электронную микроскопию в Исследовательском институте рака им. Фреда Хатчинсона.

Вклад авторов

Эксперимент задумал и спроектировал: GBB LMJ JSC. Проведены эксперименты: GBB LMJ.Проанализированы данные: GBB. Внесенные реактивы / материалы / инструменты анализа: JMA JSC. Написал статью: GBB JSC.

Ссылки

1. 1. Hoffman EP, Brown RH Jr, Kunkel LM (1987) Дистрофин: белковый продукт локуса мышечной дистрофии Дюшенна. Ячейка 51: 919–928.
2. 2. Кениг М., Хоффман Е.П., Бертелсон С.Дж., Монако А.П., Финер С. и др. (1987) Полное клонирование кДНК мышечной дистрофии Дюшенна (МДД) и предварительная геномная организация гена МДД у нормальных и больных людей.Ячейка 50: 509–517.
3. 3. Эмери А.Е., Мунтони (2003) мышечная дистрофия Дюшенна., 3 ^rd edn. Издательство Оксфордского университета, Оксфорд.
4. 4. Banks GB, Fuhrer C, Adams ME, Froehner SC (2003) Постсинаптический субмембранный аппарат в нервно-мышечном соединении: потребность в рапсине и комплексе, связанном с утрофином / дистрофином. J Neurocytol 32: 709–726.
5. 5. Бхасин Н., Ло Р., Ляо Дж., Сейфер Д., Эллмер Дж. И др. (2005) Молекулярная растяжимость мини-дистрофинов и конструкция стержня дистрофина.J Mol Biol 352: 795–806.
6. 6. Ervasti JM (2007) Дистрофин, его взаимодействия с другими белками и последствия для мышечной дистрофии. Biochim Biophys Acta 1772: 108–117.
7. 7. Чемберлен Дж. С., Гиббс Р. А., Раньер Дж. Э., Нгуен П. Н., Каски СТ (1988) Скрининг на удаление локуса мышечной дистрофии Дюшенна посредством мультиплексной амплификации ДНК. Nucleic Acids Res 16: 11141–11156.
8. 8. Baumbach LL, Chamberlain JS, Ward PA, Farwell NJ, Caskey CT (1989) Молекулярные и клинические корреляции делеций, ведущих к мышечным дистрофиям Дюшенна и Беккера.Неврология 39: 465–474.
9. 9. Гиллард Э. Ф., Чемберлен Дж. С., Мерфи Э. Г., Дафф С. Л., Смит Б. и др. (1989) Молекулярный и фенотипический анализ пациентов с делециями в богатой делециями области гена мышечной дистрофии Дюшенна (МДД). Am J Hum Genet 45: 507–520.
10. 10. Кениг М., Беггс А.Х., Мойер М., Шерпф С., Хайндрих К. и др. (1989) Молекулярные основы мышечной дистрофии Дюшенна и Беккера: корреляция степени тяжести с типом делеции.Am J Hum Genet 45: 498–506.
11. 11. Werneck LC, Scola RH, Maegawa GH, Werneck MC (2001) Сравнительный анализ обнаружения ПЦР-делеции и иммуногистохимии у бразильских пациентов с мышечной дистрофией Дюшенна и Беккера. Am J Med Genet 103: 115–120.
12. 12. Den Dunnen JT, Grootscholten PM, Bakker E, Blonden LA, Ginjaar HB, et al. (1989) Топография гена мышечной дистрофии Дюшенна (DMD): анализ 194 случаев с помощью FIGE и кДНК выявил 115 делеций и 13 дупликаций.Am J Hum Genet 45: 835–847.
13. 13. Корал-Васкес Р., Аренас Д., Сиснерос Б., Пеналоза Л., Кофман С. и др. (1993) Анализ делеций гена дистрофина у пациентов из мексиканской популяции с мышечной дистрофией Дюшенна / Беккера. Arch Med Res 24: 1–6.
14. 14. Фланиган К.М., Данн Д.М., фон Нидерхаузерн А., Солтанзаде П., Гаппмайер Э. и др. (2009) Мутационный спектр мутаций DMD у пациентов с дистрофинопатией: применение современных диагностических методов к большой когорте.Хум Мутат 30: 1657–1666.
15. 15. Абмайр С., Чемберлен Дж. (2006) Структура и функция дистрофина. В: Winder SJ, редактор. Молекулярные механизмы мышечных дистрофий. Джорджтаун: Landes Biosciences. С. 14–34.
16. 16. Бэнкс Г.Б., Чемберлен Дж.С. (2008) Значение моделей млекопитающих мышечной дистрофии Дюшенна в разработке терапевтических стратегий. Curr Top Dev Biol 84: 431–453.
17. 17. Koenig M, Monaco AP, Kunkel LM (1988) Полная последовательность дистрофина предсказывает палочковидный цитоскелетный белок.Ячейка 53: 219–226.
18. 18. Davison MD, Baron MD, Critchley DR, Wootton JC (1989) Структурный анализ гомологичных повторяющихся доменов в альфа-актинине и спектрине. Int J Biol Macromol 11: 81–90.
19. 19. Koenig M, Kunkel LM (1990) Детальный анализ повторяющегося домена дистрофина выявляет четыре потенциальных шарнирных сегмента, которые могут придавать гибкость. J Biol Chem 265: 4560–4566.
20. 20. Amann KJ, Renley BA, Ervasti JM (1998) Кластер основных повторов в домене стержня дистрофина связывает F-актин посредством электростатического взаимодействия.J Biol Chem 273: 28419–28423.
21. 21. Carsana A, Frisso G, Tremolaterra MR, Lanzillo R, Vitale DF, et al. (2005) Анализ делеций гена дистрофина показывает, что область шарнира III белка коррелирует с тяжестью заболевания. Анн Хам Генет 69: 253–259.
22. 22. Фелпс С.Ф., Хаузер М.А., Коул Н.М., Рафаэль Дж.А., Хинкль Р.Т. и др. (1995) Экспрессия полноразмерных и усеченных мини-генов дистрофина у трансгенных мышей mdx. Hum Mol Genet 4: 1251–1258.
23. 23. Рафаэль Дж. А., Кокс Г. А., Коррадо К., Юнг Д., Кэмпбелл К. П. и др. (1996) Принудительная экспрессия конструкций делеции дистрофина выявляет структурно-функциональные корреляции. J Cell Biol 134: 93–102.
24. 24. Harper SQ, Hauser MA, DelloRusso C, Duan D, Crawford RW и др. (2002) Модульная гибкость дистрофина: значение для генной терапии мышечной дистрофии Дюшенна. Nat Med 8: 253–261.
25. 25. Crawford GE, Faulkner JA, Crosbie RH, Campbell KP, Froehner SC и др.(2000) Сборка дистрофин-ассоциированного белкового комплекса не требует COOH-концевого домена дистрофина. J Cell Biol 150: 1399–1410.
26. 26. Wang B, Li J, Xiao X (2000) Аденоассоциированный вирусный вектор, несущий гены минидистрофина человека, эффективно уменьшает мышечную дистрофию в модели мыши MDX. Proc Natl Acad Sci U S A 97: 13714–13719.
27. 27. Yuasa K, Miyagoe Y, Yamamoto K, Nabeshima Y, Dickson G, et al. (1998) Эффективное восстановление белков, ассоциированных с дистрофином, in vivo путем опосредованного аденовирусом переноса укороченных кДНК дистрофина.FEBS Lett 425: 329–336.
28. 28. Грегоревич П., Бланкиншип М.Дж., Аллен Дж.М., Кроуфорд Р.В., Мёз Л. и др. (2004) Системная доставка генов к поперечно-полосатым мышцам с использованием аденоассоциированных вирусных векторов. Нат Мед 10: 828–834.
29. 29. Грегоревич П., Аллен Дж. М., Минами Э., Бланкиншип М. Дж., Харагути М. и др. (2006) rAAV6-микродистрофин сохраняет мышечную функцию и увеличивает продолжительность жизни у мышей с тяжелой дистрофией. Nat Med 12: 787–789.
30. 30. Йошимура М., Сакамото М., Икемото М., Мотидзуки Ю., Юаса К. и др.(2004) Опосредованная вектором AAV экспрессия микродистрофина в относительно небольшом проценте миофибрилл mdx улучшала фенотип mdx. Мол Тер 10: 821–828.
31. 31. Yue Y, Liu M, Duan D (2006) C-концевой усеченный микродистрофин привлекает дистробревин и синтрофин к дистрофин-ассоциированному гликопротеиновому комплексу и снижает мышечную дистрофию у мышей с симптомами двойного нокаута утрофина / дистрофина. Мол Тер 14: 79–87.
32. 32. Banks GB, Gregorevic P, Allen JM, Finn EE, Chamberlain JS (2007) Функциональная способность дистрофинов, несущих делеции в N-концевом актин-связывающем домене.Hum Mol Genet 16 (17): 2105–2113.
33. 33. Banks GB, Combs AC, Chamberlain JR, Chamberlain JS (2008) Молекулярные и клеточные адаптации к хроническому повреждению мышечно-сухожильных мышц у мышей mdx, экспрессирующих усеченный дистрофин. Хум Мол Жене (17) 24: 3975–3986.
34. 34. Foster H, Sharp PS, Athanasopoulos T, Trollet C, Graham IR, et al. (2008) Оптимизация последовательности кодонов и мРНК трансгенов микродистрофина улучшает экспрессию и физиологический результат у мышей с дистрофическим mdx после переноса гена AAV2 / 8.Mol Ther.
35. 35. Gregorevic P, Blankinship MJ, Allen JM, Chamberlain JS (2008) Системная доставка гена микродистрофина улучшает структуру и функцию скелетных мышц у старых дистрофических мышей mdx. Mol Ther 16: 657–664.
36. 36. Banks GB, Chamberlain JS, Froehner SC (2009) Усеченные дистрофины могут влиять на структуру нервно-мышечных синапсов. Mol Cell Neurosci 40: 433–441.
37. 37. Tidball JG (1991) Передача силы через мембраны мышечных клеток.J Biomech 24: Suppl 143–52.
38. 38. Lyons PR, Slater CR (1991) Структура и функция нервно-мышечного соединения у молодых взрослых мышей mdx. J Neurocytol 20: 969–981.
39. 39. Грэди Р.М., Тенг Х., Никол М.К., Каннингем Дж.С., Уилкинсон Р.С. и др. (1997) Скелетные и сердечные миопатии у мышей, лишенных атрофина и дистрофина: модель мышечной дистрофии Дюшенна. Cell 90: 729–738.
40. 40. Lynch GS (2004) Роль повреждения, вызванного сокращением, в механизмах повреждения мышц при мышечной дистрофии.Clin Exp Pharmacol Physiol 31: 557–561.
41. 41. Kay BK, Williamson MP, Sudol M (2000) Важность пролина: взаимодействие богатых пролином мотивов в сигнальных белках с их родственными доменами. Faseb J 14: 231–241.
42. 42. Rath A, Davidson AR, Deber CM (2005) Структура «неструктурированных» регионов в пептидах и белках: роль спирали полипролина II в сворачивании и распознавании белков. Биополимеры 80: 179–185.
43. 43.Судья Л. М., Чемберлен Дж. С. (2005) Генная терапия мышечной дистрофии Дюшенна: AAV лидирует. Acta Myol 24: 184–193.
44. 44. Гериг С.М., Купман Р., Наим Т., Тьоакарфа С., Линч Г.С. (2009) Увеличение размеров быстро сокращающихся дистрофических мышц защищает их от сокращений и ослабляет дистрофическую патологию. Am J Pathol.
45. 45. Cross RA, Stewart M, Kendrick-Jones J (1990) Структурные прогнозы для центрального домена дистрофина. FEBS Lett 262: 87–92.
46. 46. Ян Й., Виноград Э., Виль А., Кронин Т., Харрисон С.К. и др. (1993) Кристаллическая структура повторяющихся сегментов спектрина. Наука 262: 2027–2030.
47. 47. Kahana E, Marsh PJ, Henry AJ, Way M, Gratzer WB (1994) конформация и фазировка структурных повторов дистрофина. J Mol Biol 235: 1271–1277.
48. 48. Calvert R, Kahana E, Gratzer WB (1996) Стабильность складки домена стержня дистрофина: свидетельство наличия вложенных повторяющихся единиц.Biophys J 71: 1605–1610.
49. 49. Паскуаль Дж, Кастресана Дж, Сарасте М. (1997) Эволюция спектринового повтора. Биологические исследования 19: 811–817.
50. 50. Бродерик MJ, Winder SJ (2002) К полной атомной структуре белков семейства спектринов. J. Struct Biol 137: 184–193.
51. 51. Harper SQ, Crawford RW, DelloRusso C, Chamberlain JS (2002) Спектриноподобные повторы дистрофина и альфа-актинина-2 функционально не взаимозаменяемы. Hum Mol Genet 11: 1807–1815.
52. 52. Саадат Л., Питтман Л., Менхарт Н. (2006) Структурная кооперативность в спектральном типе повторяет мотивы дистрофина. Biochim Biophys Acta 1764: 943–954.
53. 53. Winder SJ, Gibson TJ, Kendrick-Jones J (1995) Дистрофин и утрофин: недостающие звенья! FEBS Lett 369: 27–33.
54. 54. Kahana E, Gratzer WB (1995) Минимальная единица сворачивания домена стержня дистрофина. Биохимия 34: 8110–8114.
55. 55. Pascual J, Pfuhl M, Walther D, Saraste M, Nilges M (1997) Структура раствора спектринового повтора: левосторонняя антипараллельная трехспиральная спиральная катушка.J Mol Biol 273: 740–751.
56. 56. Ervasti JM, Campbell KP (1993) Роль комплекса дистрофин-гликопротеин как трансмембранного линкера между ламинином и актином. J Cell Biol 122: 809–823.
57. 57. Рыбакова И.Н., Патель Дж. Р., Эрвасти Дж. М. (2000) Дистрофиновый комплекс образует механически прочную связь между сарколеммой и костамерным актином. J Cell Biol 150: 1209–1214.
58. 58. Эрвасти JM (2003) Costameres: ахиллесова пята геркулесовой мышцы.J Biol Chem 278: 13591–13594.
59. 59. Ozawa E (2006) Функциональная биология дистрофина: структурные компоненты и патогенез мышечной дистрофии Дюшенна. В: Чемберлен Дж. С., Рандо Т. А., редакторы. Мышечная дистрофия Дюшенна: достижения в терапии. Нью-Йорк: Тейлор и Фрэнсис. С. 21–54.
60. 60. Моради М., Бабин В., Роланд С., Дарден Т.А., Сагуи С. (2009) Конформации и ландшафты свободной энергии полипролиновых пептидов. Proc Natl Acad Sci U S A.
61. 61. Ishikawa-Sakurai M, Yoshida M, Imamura M, Davies KE, Ozawa E (2004) ZZ-домен по существу необходим для физиологического связывания дистрофина и утрофина с бета-дистрогликаном. Hum Mol Genet 13: 693–702.
62. 62. Lai Y, Thomas GD, Yue Y, Yang HT, Li D и др. (2009) Дистрофины, несущие спектриноподобные повторы 16 и 17, прикрепляют nNOS к сарколемме и улучшают выполнение упражнений на мышиной модели мышечной дистрофии. Дж. Клин Инвест 119: 624–635.
63. 63. Odom GL, Gregorevic P, Allen JM, Finn E, Chamberlain JS (2008) Доставка микротрофина через rAAV6 увеличивает продолжительность жизни и улучшает мышечную функцию у мышей с дефицитом дистрофина / утрофина. Мол Тер 16: 1539–1545.
64. 64. Зоннеманн К.Дж., Хойн-Джонсон Х., Тернер А.Дж., Балтгалвис К.А., Лоу Д.А. и др. (2009) Функциональная замена на ТАТ-утрофин у мышей с дефицитом дистрофина. PLoS Med 6: e1000083.
65. 65. Чемберлен Дж. (2004) ПЦР-опосредованный мутагенез.
66. 66. Peters MF, Adams ME, Froehner SC (1997) Дифференциальная ассоциация пар синтрофинов с комплексом дистрофина. J Cell Biol 138: 81–93.
67. 67. Cooper ST, Lo HP, North KN (2003) Вестерн-блот с одним разделом: улучшение молекулярной диагностики мышечных дистрофий. Неврология 61: 93–97.
68. 68. Ervasti JM, Ohlendieck K, Kahl SD, Gaver MG, Campbell KP (1990) Дефицит гликопротеинового компонента дистрофинового комплекса в дистрофической мышце.Природа 345: 315–319.

Кабинетные шкафы

Уменьшающий зажим для европейских петель на 165 градусов. Ограничивает раскрытие до 125 градусов.		Стопор для всех петель с углом открытия 94 ° и чашкой 35 мм.Он ограничивает открытие до 86º.
Удобный комплект петель для европейских шкафов. Включает петли и крепеж.		Удобный комплект европейских петель для шкафов.Включает петли, монтажные пластины и монтажное оборудование.
Зажим для уменьшения угла для петель Silentia Face Frame. Совместим со всеми накладками; зажимы на легком.Ограничивает открытие до 86 градусов.		Однокомпонентные скрытые европейские петли, используемые на лицевых каркасах шкафов с 3-х кулачковой регулировкой.
Сплошные скрытые европейские петли с мягким закрыванием, используемые на лицевых каркасах шкафов с 2-кулачковой регулировкой.		Сплошные скрытые европейские петли с мягким закрытием, используемые на лицевых каркасах шкафов с 3-х кулачковой регулировкой.
Сверхмощные 3/4 «петли шкафа с функцией автоматического закрывания с трехсторонней регулировкой с установленной дверцей.		Открытие на 110 градусов Петли Silentia со встроенным механизмом плавного закрывания и крышкой.
Заглушка из лазурита со стороны корпуса.Должна соответствовать такой же накладке с рычагами петель Lapis — полной или половинной.		Заглушка из лазурита со стороны двери. Совместима как с полными, так и с накладными петлями Lapis.
Петля с реверсивной пружиной позволяет открывать дверцу шкафа нажатием пальца.Получите чистый, без оборудования внешний вид ваших шкафов. Эти петли необходимо использовать вместе с подходящей магнитной защелкой и монтажной пластиной, которые продаются отдельно.		Эта магнитная защелка, используемая для деревянных дверей, может использоваться с нажимными петлями Salice.
Регулируемый пластиковый адаптер для магнитной защелки.Для фиксации с помощью шурупов. 8х32 сверление.		Регулируемый продольный пластиковый адаптер для магнитной защелки. Для фиксации с помощью шурупов. Сверление 8 + 16мм. Заглушка, показанная на изображении, в комплект не входит, продается отдельно.
Удобный комплект европейских петель для шкафов.Включает петли, монтажные пластины и монтажное оборудование.		Удобный комплект европейских петель для шкафов. Включает петли и крепеж.
Титановое покрытие является новым и отличается от традиционного вороненого или никелированного покрытия, оно менее агрессивно и имеет приглушенный блеск.Петля с функцией замедления закрывания является революционной с технической точки зрения и передовой с эстетической точки зрения. Система замедления скрыта от глаз и совмещена с элементами петли. Silentia обеспечивает стильную функциональность и бесшумную и плавную работу.		Особенности: титановая отделка и петли на защелках с уникальной автоматической регулировкой.
Петля с функцией замедления закрывания является революционной с технической точки зрения и передовой с эстетической точки зрения.Система замедления скрыта от глаз и совмещена с элементами петли. Silentia обеспечивает стильную функциональность и бесшумную и плавную работу.		Петля с функцией замедления закрывания является революционной с технической точки зрения и передовой с эстетической точки зрения. Система замедления скрыта от глаз и совмещена с элементами петли. Silentia обеспечивает стильную функциональность и бесшумную и плавную работу.
Петля с функцией замедления закрывания является революционной с технической точки зрения и передовой с эстетической точки зрения.Система замедления скрыта от глаз и совмещена с элементами петли. Silentia обеспечивает стильную функциональность и бесшумную и плавную работу.		Петли для европейских шкафов. Самозакрывающийся из нержавеющей стали. Монтажная пластина 0 мм продается отдельно.
Монтажная пластина из нержавеющей стали для европейских петель Sugatsune из нержавеющей стали.		Эта регулируемая перемычка Salice с мягким закрыванием предназначена для смягчения закрывания дверей шкафа. Легкая установка, дымоход крепится к шкафу винтами. Легко отрегулировать, поверните вращающийся винт, чтобы увеличить или уменьшить эффект замедления. Предлагается по одной вырубке на шкаф в зависимости от двери.
Эта универсальная петля в виде ножа идеально подходит для изготовления мебели на заказ.Он имеет одну точку поворота, прочную нейлоновую износостойкую поверхность и пожизненную гарантию. Доступны четыре модели для размещения различных накладок и дверей толщиной от 5/8 «-1 ¼» и открываются до 180 °. Петли неручные и имеют монтажные петли на дверных и стропильных частях. Отверстия с прорезями позволяют регулировать. Оптовые упаковки продаются только в коробках. Единица: пара		Отверстия с потайной головкой по центру 2 дюйма. Все изделия с полиэтиленовыми пакетами включают в себя крепежные винты 5/8 дюйма с цинковым покрытием. Изготовлен из 19 калибра.040, кроме материала шириной 3 дюйма (0,060).
Разработан, чтобы обеспечить годы надежной работы. Изготовлен из высокопрочной стали с гальваническим покрытием и отливок из прочного цинкового сплава.В закрытом состоянии петлю нельзя увидеть или повредить. Установленная петля надежно закреплена в пазе для глубокой засыпки, что помогает винтам поддерживать дверь, обеспечивая более прочную и жесткую установку.		Разработан, чтобы обеспечить годы надежной работы. Изготовлен из высокопрочной стали с гальваническим покрытием и отливок из прочного цинкового сплава. В закрытом состоянии петлю нельзя увидеть или повредить. Установленная петля надежно закреплена в пазе для глубокой засыпки, что помогает винтам поддерживать дверь, обеспечивая более прочную и жесткую установку.
Разработан, чтобы обеспечить годы надежной работы. Изготовлен из высокопрочной стали с гальваническим покрытием и отливок из прочного цинкового сплава. В закрытом состоянии петлю нельзя увидеть или повредить.Установленная петля надежно закреплена в пазе для глубокой засыпки, что помогает винтам поддерживать дверь, обеспечивая более прочную и жесткую установку.		Разработан, чтобы обеспечить годы надежной работы. Изготовлен из высокопрочной стали с гальваническим покрытием и отливок из прочного цинкового сплава. В закрытом состоянии петлю нельзя увидеть или повредить. Установленная петля надежно закреплена в пазе для глубокой засыпки, что помогает винтам поддерживать дверь, обеспечивая более прочную и жесткую установку.
Разработан, чтобы обеспечить годы надежной работы. Изготовлен из высокопрочной стали с гальваническим покрытием и отливок из прочного цинкового сплава. В закрытом состоянии петлю нельзя увидеть или повредить.Установленная петля надежно закреплена в пазе для глубокой засыпки, что помогает винтам поддерживать дверь, обеспечивая более прочную и жесткую установку.		Разработан, чтобы обеспечить годы надежной работы. Изготовлен из высокопрочной стали с гальваническим покрытием и отливок из прочного цинкового сплава. В закрытом состоянии петлю нельзя увидеть или повредить. Установленная петля надежно закреплена в пазе для глубокой засыпки, что помогает винтам поддерживать дверь, обеспечивая более прочную и жесткую установку.
Разработан, чтобы обеспечить годы надежной работы. Изготовлен из высокопрочной стали с гальваническим покрытием и отливок из прочного цинкового сплава. В закрытом состоянии петлю нельзя увидеть или повредить.Установленная петля надежно закреплена в пазе для глубокой засыпки, что помогает винтам поддерживать дверь, обеспечивая более прочную и жесткую установку.		Однокомпонентные скрытые европейские петли, используемые на лицевых каркасах шкафов с 2-х кулачковой регулировкой.
Поверхностная самозакрывающаяся петля.		Пластины оснащены шарнирами на защелках и уникальной автоматической регулировкой; легкий поворот кулачка передней регулировки или кулачка вертикальной регулировки быстро позиционирует петлю, устраняя необходимость в ручном позиционировании путем ослабления винтов.
Пластины оснащены шарнирами на защелках и уникальной автоматической регулировкой; легкий поворот кулачка передней регулировки или кулачка вертикальной регулировки быстро устанавливает петлю, устраняя необходимость в ручном позиционировании путем ослабления винтов.		Пластины оснащены петлями на клипсах.

5 эстетических и функциональных соображений

Если вы разрабатываете изделие с шарниром, есть большая вероятность, что вы захотите спрятать его от мира.

Хотя существует множество товаров с открытыми петлями, большинство потребительских товаров имеют привлекательный внешний вид. (К сожалению, петля не в глазах большинства людей.) Есть и другие полезные применения скрытых петель, о которых мы расскажем ниже.

Как вы понимаете, встроить скрытую петлю в изделие на сложнее, чем использовать открытую петлю . Вот самые важные вопросы, которые следует учитывать при проектировании петель для скрытых дверей:

Петли для скрытых дверей: 5 соображений при проектировании

Если вы хотите создать холодильник, шкаф со скрытыми петлями или другой продукт, вам нужно быть осторожным с выбором дизайна.Рассмотрим следующее:

1. Вы переоцениваете дизайн?

Скрытые петли используются во многих изделиях, но не во всех. Например, кухонные шкафы, как правило, имеют скрытые петли. Петли такого типа можно купить в местном хозяйственном магазине, они предназначены для легких и тонких дверок шкафов. Вероятно, не стоит разрабатывать противовес или скрытые петли шкафа по индивидуальному заказу, если только дверца шкафа не громоздкая и не представляет угрозы для безопасности.

У приборов тоже часто есть скрытые петли.В грилях есть элементы скрытой шарнирной конструкции, в частности противовес, позволяющий с легкостью открыть чудовищную крышку. Даже в некоторых холодильниках используются скрытые петли. (Вы спросите, что такое скрытые петли на холодильнике? У некоторых холодильников есть декоративные панели, которые выглядят как шкафы — скрытые петли помогают добиться единообразия на кухне.)

Есть несколько причин, в том числе функциональные, для использования скрытых петель:

• Эстетика: Многие потребительские товары выглядят лучше без громоздких противовесов или шарнирных петель.
• Экономия места: Петля для незаезда позволяет продукту поместиться в более узкое пространство и меньшую упаковку, чем упаковка с открытыми петлями.
• Избегать тепла: Хранение петли вдали от сильной жары может продлить срок ее службы. В грилях, духовках, прессах и других кухонных приборах петли часто перемещаются в более безопасное место.
• Избегайте критических компонентов: Возможно, вам придется держать петли подальше от критических компонентов, чтобы не повредить эти компоненты.Грили и освещение на грилях, панели управления холодильников и ручки духовок — вот примеры того, чего следует избегать.

2. Скрытая петля будет дороже стандартной петли.

Скрытые противовесные петли — это не те петли за 5 долларов, которые можно достать с полки в строительном магазине. Они обеспечивают дополнительную ценность, но за эту ценность нужно платить. Это связано с тем, что поставщик петель должен учесть дополнительных производственных и инженерных соображений .

Поскольку невидимые петли более дороги и сложны в проектировании, убедитесь, что они необходимы для вашего приложения. В противном случае ваша цена может быть без надобности завышена.

Если вы хотите узнать, какие характеристики потребуются вашей конструкции петли, будь то конструкция солярия или петли для гриля, воспользуйтесь приложением Vectis DYO.

3. Где вы хотите, чтобы ваша дверь была открыта?

• Вы хотите, чтобы ваша дверь была открыта в пространстве шкафа?
• Вы хотите, чтобы дверь открывалась за пределы шкафа?
• Какой вид открытого угла вы хотите добиться?
• Вы хотите механизм самозакрывания?
• На какой угол вы хотите, чтобы он сработал?

Ваш производитель должен задать все вышеперечисленные вопросы.В большинстве случаев вы будете покупать скрытую петлю нестандартной конструкции , поэтому уточняйте свои цели при обсуждении своих целей с производителем петли.

4. Какой дверной проем вам нужен?

Некоторые двери нужно отодвинуть только на небольшое расстояние от шкафа, в то время как другие нужно отодвинуть намного дальше. Вам нужно знать, как далеко вы хотите отвести дверь от продукта, чтобы вы могли определить характеристики вашей петли.

Чем больше дверной проем, тем больше должна быть петля для правильной работы двери.

5. Какой цикл жизни вы ожидаете?

Поскольку петля изготавливается на заказ почти во всех случаях, у вас есть возможность выбрать конструкцию петли, рассчитанную на определенное количество циклов.

Как часто крышка, крышка или дверца вашего продукта будут открываться и закрываться каждый день? Петля со сроком службы 10 000 циклов отличается от петли со сроком службы 200 000 циклов. Уточните , сколько вы хотите, чтобы петля прослужила (учитывая рост стоимости по мере увеличения номера цикла), чтобы производитель мог выбрать подходящие элементы дизайна.